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[期刊] 中国水产科学  [作者] 汪登强  危起伟  罗晓松  方耀林  
使用长PCR技术扩增鲟形目(Acipenseriformes)15个种的核糖体DNA(rDNA)18S rRNA基因与28S rRNA基因之间约2.5 kb的片段,并用7个限制性内切酶对该片段进行限制性位点分析。结果显示,使用LATaqDNA聚合酶及GCBuffer结合长PCR技术能够很好地扩增鲟形目鱼类的rDNA。根据酶切图谱可确定93个限制性位点,其中21个为保守位点,72个多态信息位点。HhaⅠ酶切的带型在所有个体中完全一致,提示这些位点对保持rDNA的功能有重要作用。一些酶的酶切产物长度之和大于扩增产物的长度,暗示鲟形目鱼类个体内存在多个rDNA等位基因。对种间遗传距离进行计算,并构建...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 杜晓华  王得元  巩振辉  
为了避开基于限制性酶切位点分子标记技术的DNA酶切环节,简化其复杂的程序,试验以辣椒为材料,建立了一种新型DNA标记技术——限制性位点扩增多态性(RSAP),并对其反应体系进行了优化,对RSAP适用性、重复性进行了检验。结果显示,RSAP技术的引物为2条长度均为18 bp的引物,引物的3′端为4~6个碱基的限制性酶切位点序列,接着是12~14个碱基的随机序列,2条引物的限制性位点和随机序列不同;PCR扩增的前5个循环采用35℃的退火温度,随后的35个循环采用48℃的退火温度;在25μL反应体系中,模板DNA用量为20 ng,M g2+浓度为2.5 mm o l/L,dNTP s浓度为0.2 m...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 汪登强  危起伟  王朝明  罗晓松  
以白鲟科和鲟科的13种鲟鱼为研究对象,设计7对特异引物,利用PCR技术扩增鲟形目(Acipenseriformes)鱼类线粒体DNA(mtDNA),扩增片段大小在2~3kb,总长度约为整个mtDNA的97%。同时利用3个限制性内切酶,即MboⅠ、CfoⅠ和HaeⅢ对13种鲟形目鱼类进行限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析。结果总共检出233条电泳带,其中209条有多态现象,表明鲟形目鱼类mtDNA存在广泛变异。但是各个扩增片段的变异程度并不相同,其中NADH脱氢酶亚基基因的RFLP多态性较丰富,其次是细胞色素c氧化酶亚基基因,而两个rRNA基因最贫乏。说明在鲟形目鱼类mtDNA的进化中NA...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 郭晓令  姜志华  刘红林  黄月英  
采用纯种大约克和纯种二花脸猪血样提取基因组DNA,分别用11种限制性内切酶消化,以非放射性狄高辛试剂盒标记4.8kb21-羟化酶(CYP21)基因为探针,经Southern杂交对猪的CYP21基因位点的限制性片段长度多态性(RFLPs)进行了研究。结果在BanⅠ、HindⅢ、KpnⅠ、PstⅠ和TaqⅠ5种限制性内切酶位点检测出了RFLPs,且BanⅠ和KpnⅠ酶切位点的多态性为首次发现;而在其他6种酶切位点(ApaⅠ、BamHⅠ、DraⅠ、EcoRⅠ、ScaⅠ、XbaⅠ)没有发现RFLPs。用上述5种发现RFLPs的限制酶对无亲缘关系的12头大约克和12头二花脸猪进行RFLPs分析,各限制酶...
[期刊] 商业经济研究  [作者] 黄荣生  
文章以互联网营销活动为研究背景,通过对相关文献的调研和梳理,从社会心理学家斯蒂芬·沃切尔提出的稀缺效应出发,以实验问卷的形式收集数据,利用SPSS软件研究了限时样本与限量样本对用户消费意向的影响,并详细分析了限制性营销成功的原因,以期帮助商家更好的将其运用到实践当中。
[期刊] 统计与决策  [作者] 董伟  
税收对消费、投资、净出口和微观市场主体的经济行为能够产生强有力的影响,是政府调控经济的重要手段。文章在分析税收调控基本原理的基础上,对限制税收调控作用发挥的主要因素进行了探讨,以充分了解税收调控的局限性,为制定有效的税收调控政策提供参考。
[期刊] 水产学报  [作者] 谢明树  孙冰  张博  邵长伟  王启龙  王磊  陈松林  
利用荧光原位杂交(FISH)技术将5S rDNA基因定位在牙鲆和半滑舌鳎染色体上,结果表明,5S rDNA基因在雌、雄性半滑舌鳎的一对同源染色体上分别存在2个杂交信号位点;在二、三倍体牙鲆的同源染色体上分别存在2个和3个杂交信号位点,杂交信号明显且特异。本研究首次将5S rDNA基因定位在半滑舌鳎和三倍体牙鲆的染色体上,为牙鲆及半滑舌鳎倍性鉴定、染色体鉴别提供了有效方法。此外,根据牙鲆5S rDNA基因编码区序列设计引物,扩增出大菱鲆和半滑舌鳎5S rDNA基因编码区序列,与鲽、塞内加尔鳎、大口黑鲈、七鳃鳗的5SrDNA基因序列进行同源性比较后发现,5种鲽形目鱼类5S rDNA基因序列同源性高...
[期刊] 管理世界  [作者] 阮利民  曹国华  谢忠  
矿产资源限制性开发补偿的核心是补偿标准的确定问题。本文在对实物期权理论进行总结的基础上,针对以折现现金流法为代表的传统估价方法在矿产资源限制性开发生态补偿的补偿额测定中的不足,从一个全新的视角,研究了实物期权理论在矿产资源限制性开发补偿机制中测算补偿额方面的应用,建立了矿产资源限制性开发补偿额测算的总体框架。
[期刊] 金融与经济  [作者] 江琴  黄丽娜  
网络营销是以现代电子技术和通信技术的应用与发展为基础,与市场的变革、竞争以及营销观念的转变密切相关的一门新学科。与传统市场营销相比,具有跨时空、多媒体、交互性、拟人化、成长性、整合性、超前性、高效性、经济性和技术性等特点。然而,在现阶段由于各方面的原因,网络营销发展还有许多限制性因素。
[期刊] 农业现代化研究  [作者] 孙涛  郭杰  欧名豪  
产量差表征粮食增产空间,缩减产量差是提高粮食产量的重要途径,解析产量差限制因子为探索产量差缩减路径、提高粮食产量提供依据。本文基于江苏省2000—2018年地市统计数据,借助边界线分析法定量分析粮食生产限制因子对产量差的贡献率,并解析限制性因子最适值。结果表明:江苏省耕地平均产量差占到最高产量和平均产量的比例分别为23.47%和64.05%,表明粮食产量具有较高的提升空间;苏南、苏中和苏北地区产量差的关键限制性因素分别为复种指数、劳动力和单产;江苏省粮食复种指数为1.6、机械总动力为5.3 kW/hm~2、施肥强度为487.64 kg/hm~2时粮食产量最高,是粮食生产要素投入最适值,其中施肥量超出施肥警戒线,表明江苏省农业施肥利用效率低下;转化产量差可实现苏南、苏中和苏北粮食增产30.30%、17.73%和21.45%,同时对耕地的需求量减少8.80%、13.38%和9.02%。因此,提出增加耕地复种规模,改善农业生产条件,政府加强对农户施肥指导以及提高机械化水平等缩减江苏省粮食产量差,促进粮食可持续生产和保障粮食安全的政策建议。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 晏勇  张兴忠  龙华  
本文报道了用BamHⅠ,BglⅠ,BglⅡ,ClaI,EcoRI,HindⅢ,PvuⅡ,SacⅠ,XbaⅠ,XhoⅠ等十种限制性内切酶酶切草鱼线粒体DNA,计算出各酶切片段长度及草鱼mtDNA大小。其中六种酶有多个切点,在所检测的样品中未发现碱基替换。
[期刊] 财务与会计  [作者] 沈小平  
对于企业股权激励的会计处理方法,《企业会计准则第11号——股份支付》以及《企业会计准则讲解》和《企业会计准则应用指南》中做了相应的规定、解释、说明,但对限制性股票操作层面的一些问题没有明确。本文拟对限制性股票的会计及税务处理问题进行分析。
[期刊] 对外经贸实务  [作者] 胡心宇  
国际服务贸易是当前贸易中发展最为迅速的部分。本文采用OECD发布的国际服务贸易限制指数,分析了当前国际服务贸易壁垒的发展现状,然后分析了国际服务贸易限制性措施对国际投资流量、国际贸易、具体的部门业绩以及制造业的不利影响,最后总结出对我国服务业开放的启示。
[期刊] 海洋水产研究  [作者] 汪文俊  王飞久  陈松林  孙修涛  王翔宇  邢士超  王俊  
对来自东海-黄海海区10个站位以及青岛沿岸4个站位共14个站位的浒苔样品依据形态学特征,归类分离获得70个样品,对其ITS+5.8S rDNA区进行PCR扩增、测序和分析,并与NCBI数据库中相应序列进行了比对。结果表明,70个样品具有完全相同的ITS和5.8S rDNA序列,说明青岛沿岸漂浮的大量浒苔与东海-黄海海区的浒苔为同一个来源。聚类分析显示,浒苔ITS区的变异程度与地理间隔距离呈正相关,我国海域浒苔与日本海域浒苔聚类一起,与英国海域浒苔相聚较远,与美国海域浒苔距离最远。
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 赵金良  李思发  蔡完其  王伟伟  
为验证鳜类系统分类位置的各种假说,对部分鳜类鱼类线粒体16S rDNA基因片段进行PCR扩增和测序,利用其与GenBank中科以及鲈形目其它科鱼类的同源序列,初步构建了鳜类与部分低等鲈形目鱼类的分子系统关系。结果表明,鳜类为单系类群,但未与科聚合成单系群体,与目前假设的暖鲈科、狼鲈科、锯盖鱼群、花鲈等亲缘关系相对较远。由于鳜类为淡水特化类群,系统演化上较晚发生,因而,支持将其独立为一科鳜科。本研究结果可为理解低等鲈形目鱼类的系统进化关系提供分析资料。
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