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[期刊] 水产学报  [作者] 戴建华  殷文莉  杨代淑  熊全沫  
采用差速离心法及DNaseⅠ、RNase消化法制备并纯化了鲇(Silurusasotus)肝脏线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)。用8种限制性内切酶对mtDNA进行了分析。BgⅡ、EcorⅠ、PstⅠ、BglⅠ、BamHⅠ、XbaⅠ、HindⅢ、XhoⅠ在鲇mtDNA分子上分别具1、1、1、2、2、7、7和0个切点。mtDNA分子量约10.84×10 ̄6道尔顿,大小为17.54kilobasepairs。根据单酶和双酶解片段的数目和分子量,建立了鲇mtDNA的限制性酶切图谱。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 史宪伟  曾凡同  邱祥聘  张亚平  
 用18种限制性内切酶对7只云南鹅的线粒体DNA(mtDNA)进行了限制性片段长度多态(RFLP)分析。17种酶在所有受试个体表现为一致的限制性态型(morph),一只灰羽鹅用PvuI消化时出现变异。用14种限制性内切酶构建了云南鹅mtDNA的酶切图谱。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 杨少闻  刘楚吾  
用识别5、6碱基序列的17种限制性内切酶,即BamHⅠ、BglⅠ、BglⅡ、DraⅠ、EcoRⅠ、EcoRⅤ、HindⅢ、KpnⅠ、MluⅠ、PstⅠ、PvuⅡ、SalⅠ、ScaⅠ、SmaⅠ、StyⅠ、XbaⅠ和XhoⅠ,对南海海域石斑鱼属(EpinephelusBloch)野生蜂巢石斑鱼(E.merra)、鲑点石斑鱼(E.fario)、青石斑鱼(E.awoara)、赤点石斑鱼(E.akaara)和七带石斑鱼(E.septem-fasciatus)的线粒体DNA(mtDNA)进行RFLP分析。测算出蜂巢石斑鱼、鲑点石斑鱼、青石斑鱼、赤点石斑鱼和七带石斑鱼的mtDNA分子大小分别为(18.52±...
[期刊] 水产学报  [作者] 宋平  李小迎  熊全沫  
以十一种限制性内切酶对鲢鱼mtDNA进行单酶完全酶解的切点数:SalI和BglⅡ为0;PstI.XhoI.KpnI和SacI为1;HpaI和XbaI为2;BamHI为3;BglI和EcoRI为4。以九种限制性内切酶对鳙鱼mtDNA进行单酶完全酶解,其切点数;PstI.XhoI.SalI.KpnI.BglⅡ均为1;HPaI和XbaI为2;SacI为3;BglI为4。采用琼脂糖凝胶电泳法测得鲢鱼mtDNA分子量为15930±220碱基对(bp);鳙鱼mtDNA分子量为16650±150碱基对(bp)。用单、双酶解法和部份酶解法构建了鲢鱼九种酶18个切点和鳙鱼九种酶16个切点的限制性内切酶酶切图谱。...
[期刊] 海洋水产研究  [作者] 王中铎  刘楚吾  郭昱嵩  
取星点笛鲷(白星笛鲷LutjanusstellatusAkuzaki)和千年笛鲷(L.sebaeCuvieretValenci-ennes)肝脏组织,分离纯化其线粒体DNA(mtDNA),用限制性内切酶分析构建了两个种mtDNA的物理图谱,进行了限制性片段长度多态性分析,得到两个种的分歧时间大约为5.1Ma(取序列进化率为每百万年1.5%),发现4种内切酶(BglⅠ、MluⅠ、KpnⅠ、SalⅠ)酶切位点在两种间存在明显差异。这些差异为区分两个种提供了遗传标记,同时也为笛鲷类进化遗传学的研究和育种提供了资料。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 晏勇  张兴忠  龙华  
本文报道了用BamHⅠ,BglⅠ,BglⅡ,ClaI,EcoRI,HindⅢ,PvuⅡ,SacⅠ,XbaⅠ,XhoⅠ等十种限制性内切酶酶切草鱼线粒体DNA,计算出各酶切片段长度及草鱼mtDNA大小。其中六种酶有多个切点,在所检测的样品中未发现碱基替换。
[期刊] 水产学报  [作者] 张四明  龙华  张兴忠  
用 Bam HI、Eco RI、Dra I、Hinf I、Hind III、Hpa II、Msp I、Pst I、Sau 3AI、Sma I、Xba I、Xho I和 Sal I等十三种限制性内切酶对方正银鲫(Carassius aur-atus gibelio)、白鲫(Carassius auratus cuvieri)和鲫(Carassius auratus auratus)的线粒体 DNA(mt DNA)进行单酶酶切以及其中八种识别六碱基对序列的限制性内切酶的双酶酶切,经琼脂糖凝胶电泳后,分析且计算出各酶切片断大小,得出三种鲫鱼的 mt DNA分子大小:方正银鲫为 15990±90碱基对...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 汤显春  彭辉银  张小霞  赵淑玲  肖宇宙  
将从自然罹死的分月扇舟蛾Closteraanastomosis (L .)幼虫中分离到的一种颗粒体病毒 (简称CaL GV)置于电子显微镜下观察 ,其形态为椭圆形 ,大小为 (30 4 .5 3× 139.0 9)nm ;经碱解病毒粒子为杆状 ,大小为(2 4 6 .2 1× 6 1.36 )nm ;经酚∶氯仿∶异戊醇 (2 5∶2 4∶1)抽提 ,氯仿∶异戊醇 (2 4∶1)洗涤 ,2倍体积无水乙醇沉淀 ,抽提的核酸经EcoRⅠ ,HindⅢ ,NcoⅠ ,PstⅠ限制型内切酶酶解 ,1×TAE缓冲液 ,0 .8%琼脂糖凝胶电泳 ,获得CaLGV核酸酶解图谱。以λDNA HindⅢ酶解片段在...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 周锦萍  李刚  郑明球  蔡宝祥  
采用差速离心法纯化鸡源和鸭源减蛋综合征(EDS)病毒,酚-氯仿抽提法提取两种毒株的核酸。选取EcoRⅠ、BamHⅠ、BglⅠ、BglⅡ、KpnⅠ、PstⅠ和HindⅢ7种限制性内切酶,对两种毒株进行酶切图谱比较。结果显示,鸡源株酶切片段数分别为4,4,6,8,5,9,10,共计46个片段;鸭源株产生的酶切片段数分别为4,4,5,7,9,10,8,共计47个片段。两者的酶切结果除EcoRⅠ完全相同外,其余均存在不同程度的差异。由此表明,鸡源和鸭源EDS病毒虽然血清型相同,但在基因水平上存在较大的差异,属不同基因型。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 丁波  姜志华  郭晓令  刘红林  黄月英  
用噬菌体M13mp18单链DNA作探针,对二花脸和大约克夏猪进行了DNA指纹的研究。采用六种限制性内切酶获得了高分辨率的、具有个体特异性的DNA指纹图谱。这六种限制性内切酶是:HinfⅠ,HaeⅢ,EcoRⅠ,BanⅠ,TaqⅠ和PstⅠ。不同酶消化产生的图谱带数有差异,并有品种特征带趋向。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 傅蕙英  曾王勇  陈珈  
针对重组子中100bp左右的小插入片段与载体不能同时在普通琼脂糖胶上呈现而无法用内切酶图谱鉴定此类重组子的问题,提出了小插入片段间接内切酶图谱,并用普通琼脂糖凝胶电泳研究分析了此类图谱,获得了通过间接内切酶图谱的间接比较来鉴定此类重组子的实验依据,为在国内普通实验室条件下,经济有效地进行小插入片段基因重组研究提供了有益的启示和参考。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 唐首杰  李思发  蔡完其  
测定了来自5个不同倍性团头鲂(Megalobrama amblycephala)群体(4n-F1、正交3n、反交3n、异源3n、二倍体2n)57个个体的线粒体DNA控制区、细胞色素b基因、16S rRNA基因和COⅡ基因序列,通过对这4段基因序列的联合分析,研究了5个不同倍性团头鲂群体的遗传变异。这4个基因片段的长度分别为:控制区937bp,细胞色素b基因1140bp,16S rRNA基因片段564bp,COⅡ基因片段642bp。将4个基因片段合并为1条总长度为3283bp的片段;在这条3283bp片段中,T、C、A、G4种核苷酸的平均含量分别为27.18%、25.45%、30.71%、16....
[期刊] 水产学报  [作者] 黎双飞  刘少军  张轩杰  罗琛  周工建  刘筠  
用密度梯度离心和DNase Ⅰ、RNase消化法从异源四倍体鲫鲤(F8)和鲫鲤F2肝组织中提取和纯化线粒体DNA(mtDNA)。用9种限制性内切酶对异源四倍体鲫鲤和鲫鲤F2的mtDNA进行了分析,结果表明XbaⅠ和BglⅡ两种限制性内切酶在异源四倍体鲫鲤mtDNA上存在酶切位点多态性。通过凝胶电泳测得异源四倍体鲫鲤mtDNA相对分子量平均约 10.29 × 106道尔顿,分子大小为 16.20kb;鲫鲤 F2 mtDNA相对分子量为 10. 18 × 106道尔顿,分子大小为16.02kb。根据单酶解和双酶解的片段数目和分子大小,构建了异源四倍体鲫鲤mtDNA的7种限制性内切酶(Kpn Ⅰ、P...
[期刊] 华北农学报  [作者] 王宏英  黄占景  仇艳光  沈银柱  
利用RAPD技术分析了小麦耐盐突变体RH8706 49、其母本濮农3665以及与49同为"一粒传"后代的敏盐材料H8706 34的线粒体DNA,发现三个材料的线粒体DNA存在有明显的差异,初步认为这些差异可能与突变体49耐盐性的增强相关,回收克隆了突变体49线粒体DNA的特异扩增产物,为进一步的研究打下了基础。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 高玉时  唐修君  屠云洁  陆俊贤  薛茂云  施祖灏  张小燕  
【目的】探明地方鸡种与引进鸡种遗传多态性特点,探讨COⅠ这一特定基因的特定区段作为DNA条形码在识别鸡种方面的可行性和有效性。【方法】以13个中国地方鸡种和2个国外引进品种为研究对象,利用DNA测序技术测定了线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome c oxidaseⅠ,COⅠ)基因部分序列。【结果】选择的这段COⅠ基因序列有38个突变位点,15个鸡种单倍型多样度平均为0.963,核苷酸多样度平均为0.00518,其中引进鸡种明显低于地方鸡种(除藏鸡外);15个鸡种品种间Kimura双参数遗传距离为0.056%—0.917%,种内遗传距离为0—0.346%,15个鸡种的DNA分类和形...
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