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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
唐国芳 王婧蓝 胡胜 陈雯莉 王莉
为克服传统方法不能实现对特定菌丝或细胞的连续定点观察的难题，利用低熔点琼脂糖培养基将菌丝包埋在玻底培养皿中，制备了鱼腥蓝细菌ＰＣＣ ７１２０菌株实时观察的微型培养体系。结果表明：在该培养体系中，菌丝能进行正常的生长、分裂和分化；利用该系统可以观察细胞分裂蛋白ＦｔｓＺ和ＤＮＡ双链损伤修复蛋白ＲｅＣＮ在细胞分裂过程中的动态变化，实现对同一菌丝进行长时间的连续定点观察。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王静 张巨源 王莉 陈雯莉
鱼腥蓝细菌PCC 7120中已有较为成熟的诱导表达系统,但缺乏可控的蛋白降解系统。本研究基于Mesoplasma florum中的Lon蛋白酶(mf-Lon),在蓝细菌中建立可诱导的蛋白降解系统,并通过该系统对关键基因编码产物进行可控降解以研究其生理功能。结果发现降解系统并无预期作用,需进一步改进。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李之萌 王莉 陈雯莉
在鱼腥蓝细菌PCC 7120中,all3555是一个乙酰羟酸合成酶的编码基因,为研究该基因在鱼腥蓝细菌PCC 7120的生长和环境适应过程中的作用,构建了该基因的超表达和缺失突变菌株,结果显示该基因缺失后鱼腥蓝细菌PCC 7120仍可继续生长,但对NaCl胁迫的敏感性有一定程度提高,而超表达该基因则会提高鱼腥蓝细菌PCC 7120对氧化胁迫和NaCl胁迫的抗性,表明all3555对鱼腥蓝细菌PCC 7120的正常生长影响较小,但对菌株的抗氧化胁迫和抗NaCl胁迫等有重要作用。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
樊贵安 张巨源 陈雯莉 王莉
鱼腥蓝细菌ＰＣＣ ７１２０是一种光合自养型丝状蓝细菌。缺氮条件下，菌丝上５％～１０％的营养细胞分化为异形胞，发挥固氮作用。异形胞是研究生物固氮和细胞分化的理想材料。为研究异形胞生理功能及其发育过程中的基因表达变化，需要从菌丝中分离高质量的异形胞。用２ｍｇ／ｍＬ溶菌酶与０．１％ＴｒｉＴｏｎ Ｘ－１００同时处理菌丝３０ｍｉｎ，得到了完整性好、纯度高的异形胞。
关键词：
鱼腥蓝细菌PCC 7120 异形胞 分离
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李敏 徐韶足 陈雯莉 王莉
为寻找新型生物吸附剂用于重金属污染环境的修复,本研究通过设置不同时间、质量浓度以及氮源缺乏等条件,检测了鱼腥蓝细菌PCC 7120对Mn(2+)的吸附情况。结果表明:在Mn(2+)质量浓度低于10mg/L时,PCC 7120对Mn(2+)的去除率最高能达到80%,并且PCC 7120对Mn(2+)的吸附过程符合Freundlich等温吸附模型和准二级吸附动力学方程。缺氮后,PCC 7120对Mn(2+)的耐受力降低且吸附能力大大减弱。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
苏 波 陈雯莉 王 莉
为明确鱼腥蓝细菌PCC 7120中sigC（all1692）基因与异形胞分化的关系，通过同源重组构建了sigC的缺失突变体MsigC和互补菌株，对其进行表型分析。结果表明，在缺乏化合态氮源时，MsigC的异形胞分化频率显著低于野生型,而在互补菌株CsigC中，异源表达的sigC可以互补突变体异形胞分化频率降低的表型。表明sigC参与异形胞分化的调控。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
苏波 陈雯莉 王莉
为明确鱼腥蓝细菌PCC 7120中sigC(all1692)基因与异形胞分化的关系,通过同源重组构建了sigC的缺失突变体MsigC和互补菌株,对其进行表型分析。结果表明,在缺乏化合态氮源时,MsigC的异形胞分化频率显著低于野生型,而在互补菌株CsigC中,异源表达的sigC可以互补突变体异形胞分化频率降低的表型。表明sigC参与异形胞分化的调控。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
牛天彩 胡胜 陈雯莉 王莉
利用单交换法将ｇｆｐ整合到鱼腥蓝细菌ｐＣＣ ７１２０基因组上，构建ｆｔｓＺ－ｇｆｐ的翻译融合菌株，并观察了ｆｔｓＺ蛋白的亚细胞定位。结果表明：通过同源重组，ｇｆｐ与基因组中唯一完整的ｆｔｓＺ融合，既保证了ｆｔｓＺ基因的正常表达又能准确反映ｆｔｓＺ蛋白的亚细胞定位，并且实验周期短、操作方便，是研究蛋白质亚细胞定位的一种简单有效的方法。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李东霞 王莉 陈雯莉
为研究Anabaena sp. PCC 7120中的细胞形态决定蛋白MreB的亚细胞定位和功能,构建了由mreB自身启动子驱动的mreB-gfp融合载体,通过接合转移的方法将其转化到野生型Anabaena sp. PCC 7120中,获得绿色荧光蛋白标记的MreB的鱼腥蓝细菌菌株,同时用MreB的抑制剂A22处理菌株。结果显示,MreB的亚细胞定位随着细胞周期的进程而发生变化,A22处理可导致MreB无法正确聚合定位。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
靳松 尹利方 夏体渊 李冰 徐胜光 任禛 张永福 牛燕芬 刘一鸣
对污染蓝莓组培苗的细菌进行分离和鉴定，为防治蓝莓组织培养过程中细菌污染提供科学依据。采用ＮＡ培养基分离纯化细菌，通过形态特征、生理生化指标结合１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列同源性分析，对引起蓝莓组培苗污染的细菌进行鉴定。引起蓝莓组培苗污染的细菌为菌株ＬＭ５３和ＬＭ８５，１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列分析结果表明，ＬＭ５３和Ｂ．ＡＭｙＬｏＬｉｑｕｅｆＡｃｉｅＮＳ（Ｈｑ７２７９７１）、Ｂ．ｖＡＬＬｉＳＭｏｒｔｉＳ（ｆＪ３８６５４１）、Ｂ．ＬｉｃＨｅＮｉｆｏｒＭｉＳ（ｅｆ６４４４１４）、Ｂ．ＳｕＢｔｉＬｉＳ（Ａｙ５８３２１６）聚在同一系统发育分支，同源性为９９．９％～１００％；ＬＭ８５与苏云金芽孢杆菌Ｂ．ｔＨｕｒｉ．．．
关键词：
蓝莓 组织培养 污染 细菌 分离 鉴定
[期刊] 水产学报
[作者]
可小丽 李庆勇 黄秋标 王淼 衣萌萌 刘志刚 卢迈新
为了解罗非鱼-鱼腥草共生系统中鱼草不同配比对池塘水质及细菌群落结构的影响，实验构建了相同池塘覆盖面积不同鱼腥草种植密度(350、450、600和0 g/m~2)(M1)和相同种植密度不同池塘覆盖面积占比(5%、10%、15%和0%)(M2)的两种养殖模式。通过在以上两种模式养殖条件下，研究各组对罗非鱼养殖池塘水质以及水体和鱼体肠道微生物群落的影响，探讨了罗非鱼-鱼腥草池塘共生系统中鱼草的相对最佳搭配比例。结果显示，在M1实验模式下，不同密度组鱼腥草浮床均能显著改善养殖水体氨氮(NH_4~+-N)、亚硝氮(NO_2–-N)、硝酸氮(NO_3–-N)、总氮(TN)、总磷(TP)、正磷酸盐(PO_4~(3–)-P)等水质指标，且在3个月养殖周期内，初始种植密度为450 g/m~2的鱼腥草浮床组与350和600 g/m~2实验组相比，效果相对更加稳定。16S rRNA V4区的高通量测序分析显示，M1模式下各组鱼腥草均能显著优化鱼体肠道和水体的菌群结构，并增加菌群多样性，且养殖时间越长，优化效果越明显。相同月份中，实验组450和350 g/m~2比600 g/m~2优化效果相对更稳定。在不同月份下，环境变化对罗非鱼肠道及水体细菌多样性的影响大于鱼腥草浮床对养殖水体的影响。在M2实验模式中，各组鱼腥草浮床均能显著净化罗非鱼养殖池塘水质，其TN、TP、NH_4~+-N、NO_2~–-N、NO_3~–-N和PO_4~(3–)-P等均呈曲线变化。研究表明，在该养殖周期内，鱼腥草覆盖面积为10%的实验组对养殖水体NH_4~+-N、NO_3~–-N、TN、TP以及PO_4~(3–)-P等指标的净化效率较实验组5%和15%稳定。高通量测序分析结果表明，不同覆盖面积鱼腥草浮床均能增加养殖水体和鱼体肠道的微生物多样性，相对而言，10%覆盖面积组的效果更稳定。此结果为完善罗非鱼-鱼腥草共生养殖模式的鱼草配比提供了数据支撑。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
单体江 王伟 余炳伟 王小晴 吴春银 翁道玥 崔紫宁 王军
【目的】为了分析和鉴定鱼腥草挥发油的化学组成,测定鱼腥草挥发油和乙酸乙酯层次生代谢产物对7种供试细菌的抑制活性。【方法】本文采用水蒸汽蒸馏法和甲醇冷浸提取法分别提取鱼腥草挥发油和乙酸乙酯层次生代谢产物,通过GC-MS对提取得到的挥发油进行化学成分分析,采用抑菌圈法和TIC-MTT-生物自显影法分别测定挥发油和乙酸乙酯层次生代谢产物对供试细菌的抑制活性。【结果】鱼腥草挥发油的得率为0.09%,从鱼腥草挥发油中共鉴定出49个组分,占总相对含量的93.35%,主要成分是β-蒎烯(23.65%)、2-十三烷酮(1
关键词：
鱼腥草 次生代谢产物 抗细菌活性
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
胡璠 王莉 陈雯莉
为研究在不分化异形胞的钙化裂须蓝细菌Schizothrixcalcicola中schetR基因的功能,本研究构建由强启动子petE驱动的schetR基因的表达质粒,通过三亲本接合转移的方法将此表达质粒转入模式生物鱼腥蓝细菌AnabaenaPCC 7120的hetR突变体中进行功能验证。结果显示:超表达schetR能够互补鱼腥蓝细菌hetR突变体的表型,这说明schetR能够促进异形胞的发育。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
杨绍斌 廉大海 祝莹 李威
光合细菌作为环保型饲料添加剂 ,具有营养丰富、净化水质、防治鱼病、维持水体生态平衡的作用。采用大棚简易富集培养法 ,可大量培养光合细菌 ,此技术成本低、效益高、操作简单 ,适于在北方淡水养鱼中推广使用。
关键词：
光合细菌 大棚 富集培养
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李琳 张雪梅 李旭锋 罗鹏 蓝泽蘧
用茎尖培养方法建立了甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｉｃａｎａｐｕｓ）×蓝花子（ＲａｐｈａｎｕｓｓａｔｉｖｕｓＬ．ｖａｒ．ｒａｐｈａｎｉｓｔｒｏｉｄｅｓＭａｋｉｎｏ）杂种Ｆ１代无性系并长期保存。对长期保存后的田间栽培植株进行了形态学和细胞学观察，结果表明，这些植株与甘蓝型油菜×蓝花子杂种Ｆ１代无明显差异。说明茎尖培养方法保存这一油菜育种材料是有效的。
关键词：
甘蓝型油菜,蓝花子,杂种,茎尖培养
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