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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
马海田 韩正康 王国杰 邹思湘
研究 3种异黄酮 (Da、IPF和 7HF) 对雄性大鼠芳香化酶活性及骨骼肌生长的影响。试验选用 20只 28日龄雄性SD大鼠, 随机分成 4组, 每组 5只, 其中 1组为对照组, 另外 3组在每千克日粮中分别添加 5mg的Da、IPF和 7HF。实验结果表明, Da、IPF和 7HF均能升高腿肌中RNA/DNA的比值, 分别较对照组升高了 19 09%、9 09%和 15 45%;同时显著增加血清中睾酮的含量, 降低血清中雌二醇的含量, 抑制睾丸组织中芳香化酶的活性。提示异黄酮 (Da、IPF、7HF) 通过抑制芳香化酶活性而降低睾酮向雌二醇的转化, 使体内睾酮含量升高, 有助于促进动物的...
关键词：
异黄酮 雄性大鼠 芳香化酶 肌肉生长
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
董在杰 缪为民 尤洋 袁新华 陈家长
从尼罗罗非鱼的细菌人工染色体基因文库中提取和纯化含有卵巢和脑芳香化酶基因的重组质粒DNA,通过简并PCR制备芳香化酶基因原位杂交探针,并用荧光素进行标记。结果显示,尼罗罗非鱼卵巢和脑芳香化酶基因位于2对不同的小染色体上,而不是位于性染色体上。结果提示:芳香化酶基因不是尼罗罗非鱼主要的性别决定基因。
关键词：
芳香化酶 基因 定位 尼罗罗非鱼 性别
[期刊] 中国水产科学
[作者]
孙晶 李广丽 朱春华 吴天利 邓思平
采用RT-PCR和RACE法,克隆了胡子鲇(Clarias fuscus)脑型芳香化酶基因Cyp19a1b,应用荧光实时定量PCR检测其在前脑、下丘脑、脑垂体、肝、精巢和卵巢6种组织,以及性腺分化前后(出膜后12～30 d)全鱼中的mRNA表达。结果表明,Cyp19a1b cDNA全长2 347 bp,5′端非编码区219 bp,3′端[不包括poly(A)]596 bp,开放阅读框(ORF)1 503 bp,编码500个氨基酸,推测其编码蛋白质分子量为56.388 kD。序列分析及分子系统进化树结果表明,胡子鲇Cyp19a1b氨基酸序列与非洲鲇(Clarias gariepinus)Cyp1...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李广丽 邓思平 孙晶 王文达 师尚丽 朱春华
采用组织学和荧光实时定量PCR方法,检测饲喂不同剂量芳香化酶抑制剂来曲唑(letrozole,50、100和200μg/g)对胡子鲇(Clarias fuscus)性腺组织学和性别比率的影响,以及200μg/g来曲唑对性分化前后脑型芳香化酶基因(Cyp19a1b)和翼状螺旋/叉头转录因子2(Foxl2)基因表达的影响,结果表明,50μg/g剂量的来曲唑对胡子鲇性腺分化无显著影响;但100μg/g和200μg/g剂量的来曲唑可促进胡子鲇精巢分化,抑制卵巢分化,卵巢腔最早出现时间和初级卵母细胞出现时间均分别推迟3 d和6 d,而初级精母细胞最早出现时间则分别提前2 d和5 d,且雄性率分别达65....
[期刊] 中国水产科学
[作者]
唐永凯 李建林 陈文华 俞菊华
采用RT-PCR和快速扩增cDNA末端(Rapid amplification of cDNAends,RACE)法分离出奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)卵巢芳香化酶(P450aromA)的全序列,得到1784bp的全长cDNA,包括38bp5′非翻译区,1566bp阅读框以及含Poly(A)信号(AATAAA)的167bp3′非翻译区[不包括Poly(A)]。阅读框共编码521个氨基酸,推算的蛋白质分子量为59kD。同源性分析显示,奥利亚罗非鱼P450aromA的氨基酸序列与其他鱼类性腺芳香化酶(P450arom)具有70%以上的同源性,与其他鱼类脑P450arom有60...
[期刊] 水产学报
[作者]
徐跑 俞菊华 李建林 夏德全
P-450芳香化酶(P450arom)是催化雄激素生物合成雌激素的关键酶。本文采用RT-PCR和RACE法,首次分离和克隆了黄颡鱼脑P450芳香化酶基因HP450aromB,并使用荧光实时定量RT-PCR对其组织表达进行了研究。结果表明HP450aromB cDNA全长2080 bp(不包括poly(A)),5′端非翻译区有25 bp,3′端555 bp(不包含poly(A)),阅读框(open reading frame,ORF)1500 bp,编码500个氨基酸,推测的蛋白质分子量为56 kDa。同源性分析显示,HP450aromB的氨基酸序列与其它鱼脑P450arom具有70%以上的同源...
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
唐永凯 李建林 陈文华 俞菊华
采用RT-PCR和RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)法分离出奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶(P450aromA)的全序列,得到1784 bp的全长cDNA,包括38 bp 5’非翻译区,1566 bp阅读框以及含Poly(A)信号(AATAAA)的167 bp 3’非翻译区[不包括Poly(A)]。阅读框共编码521个氨基酸,计算的蛋白质分子量为59 ku。同源性分析显示,奥利亚罗非鱼P450aromA的氨基酸序列与其它鱼性腺P450arom具有70%以上的同源性,与其它鱼脑P450arom为60%左右同源,但芳香化酶高保守区包括I-螺旋区,芳香化酶特异保守...
[期刊] 水产学报
[作者]
陶敏 刘少军 张卓慧 陈婕 刘文彬 刘筠
为研究性腺型芳香化酶P450aromA(cyp19a1a基因编码)在不同倍性鲫鲤卵巢发育过程中的作用,实验采用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(RACE),获得了二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的cyp19a1a基因cDNA全长。结果显示,3种鱼cyp19a1a基因均编码517个氨基酸残基,而且编码的蛋白都包含P450aromA特有的跨膜螺旋区、I-螺旋区、Ozol’s肽区、芳香化酶特异保守区以及血红素结合区。采用RT-PCR分析cyp19a1a基因mRNA在3种不同倍性鱼类组织中的表达情况,结果显示,cyp19a1a基因主要在实验鱼的卵巢中表达,其次在精巢、脑、脾脏有少量表达。采用实时...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
温海深 刘淼 祁保霞 何峰 李吉方 史丹 马瑞芹 胡建 母伟杰 张远青
在水温分别为20(常温对照组)、25、30℃条件下,采用RT-PCR方法,研究性腺成熟期雄性黄颡鱼组织中P450芳香化酶(P450aromA和P450aromB)的mRNA表达水平,同时测定性腺成熟系数(GSI)、肝重指数(HSI)、肥满度(CF)和血浆睾酮(T),雌二醇(E2)含量。结果表明,P450aromA在性腺发育成熟期雄性黄颡鱼心脏、肝、脾、胃、肾脏、精巢、鳃、脑、头肾、肠管组织中均无表达,P450aromB只在脑和肠中有表达,在脑中表达量高于肠,表达量随着水温升高而显著下降;各组实验鱼血浆T和E2含量与芳香化酶基因表达量存在相关关系。该实验结果表明,P450aromA可能与精子发生...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王丹丹 张桂蓉 魏开建 GARDNER Jonathan P.A. 杨瑞斌 陈昆慈 邹桂伟
为了解乌鳢（Ｃｈａｎｎａ ａｒｇｕｓ）性别分化相关机制，采用ｒＴ－ＰＣｒ和ｒａＣＥ法克隆了乌鳢脑型芳香化酶基因ＣｙＰ１９ａ１ｂ ＣＤｎａ部分序列，运用半定量ｒＴ－ＰＣｒ和ｑ ＰＣｒ技术检测其在雌雄个体组织中的表达情况。结果显示，乌鳢ＣｙＰ１９ａ１ｂ ＣＤｎａ部分序列为１ ４３２ ｂＰ，包括１２０ ｂＰ ３＇－ｕＴｒ和１ ３１１ ｂＰ编码区，编码４３６个氨基酸。序列比对表明乌鳢ＣｙＰ１９ａ１ｂ氨基酸序列包含三个功能保守区，与毛足鲈、平鲷和金钱鱼ＣｙＰ１９ａ１ｂ同源性较高，分别为８９％、８８％和８８％。半定量ｒＴ－ＰＣｒ和ｑ ＰＣｒ结果显示，乌鳢ＣｙＰ１９ａ１ｂ基因在雌、雄成鱼垂体中表达量高，在肠．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
翁幼竹 张为民 方永强 刘丽丽
用免疫细胞化学双重染色技术和鼠抗人芳香化酶抗体、兔抗人雌激素α受体与β受体亚型(ER α和ER β)抗体、兔抗人雌激素(E2)抗体,对鲻鱼(Mugilcephalus)脑各部位进行定位研究。结果显示,芳香化酶和E2、芳香化酶和ER α、芳香化酶和ER β、ER α和E2的双染免疫活性物质分布在鲻鱼嗅脑、大脑、间脑和小脑的神经细胞的胞核或胞质及其突起或神经纤维上。值得指出的是,鲻鱼下丘脑视前区芳香化酶免疫活性细胞上共存有雌激素α受体与β受体亚型,提示E2诱发鲻鱼雌性化的作用机制是,E2先与芳香化酶样神经细胞上的雌激素受体结合,而后激发与性分化相关的芳香化酶基因的表达。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
郑尧 张永泉 陈家长 邴旭文 尹家胜 王在照
[目的]本文旨在比较实验室和池塘养殖F1代,高、低密度实验室养殖F2代雌、雄鱼在激素含量和芳香化酶活力上的差异。[方法]采用ELISA方法对激素含量和芳香化酶活力进行了检测。[结果]发现实验室养殖F1代雌鱼全鱼组织雌二醇(E2)含量极显著高于雄鱼(P<0.01)。池塘养殖F1代雌鱼脑中E2和睾酮(T)含量均极显著高于雄鱼,且卵巢中的芳香化酶活力极显著低于雄鱼(P<0.01)。低密度养殖组F2代中卵巢T含量极显著低于高密度养殖组精巢中的含量(P<0.01)。低密度养殖组F2代雌鱼脑、卵巢中的E2含量分别极显著高于高密度养殖组F2代雄鱼脑、精巢中的含量(P<0.01)。F2代雌鱼脑中的芳香化酶活力...
关键词：
雌核发育 彭泽鲫 睾酮 雌二醇 芳香化酶
[期刊] 中国水产科学
[作者]
黄波 杨小玉 戴奇 汪奇 云丹 周忠良
采用组织学和分子生物学方法,研究了投喂芳香化酶抑制剂来曲唑(LE)后暗纹东方鲀(Takifugu obscures)初孵仔鱼CYP19A、DMRT1基因表达以及性腺的组织学变化,以期进一步了解P450芳香化酶(P450arom)在鱼类早期性别分化过程中的作用。RT-PCR结果显示,对照组样品CYP19A和DMRT1表达显示性二态,雌性表达CYP19A基因,雄性表达DMRT1基因。LE处理组在性别分化期间,雄性样品单一表达DMRT1,雌性样品则同时表达CYP19A和DMRT1。qRT-PCR结果显示:LE处理组雌性仔鱼CYP19A基因表达被显著抑;虽然在仔鱼出膜后22d(dph)的表达水平高于9...
[期刊] 水产学报
[作者]
李永婧 吴利敏 王磊 马晓 李学军
为探索脑型芳香化酶基因(cyp19a1b)在雌核发育三倍体鱼淇河鲫性别决定与分化过程中的作用,利用RACE方法克隆淇河鲫cyp19a1b基因cDNA全长序列,采用Real-time PCR分析其在不同组织、胚胎及胚后不同发育时期的表达情况,同时检测芳香化酶抑制剂Letrozole诱导性逆转及腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后cyp19a1b在脑中的表达情况。结果显示,淇河鲫cyp19a1b cDNA全长2 984 bp(GenBank ID:MF926270),包含132 bp5′非编码区,1 319 bp 3′非编码区,1 533 bp开放读码框,编码510个氨基酸残基;氨基酸序列比对及系统进化分析结果显示,淇河鲫Cyp19a1b与其他鲤科鱼类同源性较高,与哺乳类、爬行类等脊椎动物同源性较低,这与其分类地位一致;组织分布检测结果显示,cyp19a1b基因在淇河鲫脑中表达量最高,在卵巢等其他组织中表达量较低;Realtime PCR结果表明,在胚胎发育过程中cyp19a1b在外源精子刺激后从囊胚期开始上调,神经胚期达到最高,随后降低;出膜后随着发育的进行,该基因在脑中表达量逐步上调,在躯体中一直维持在较低水平;除此之外,伴随着Letrozole诱导的性逆转,cyp19a1b在脑中表达量降低;腹腔注射hCG可以促进cyp19a1b在脑中表达。研究表明,淇河鲫cyp19a1b基因可能通过参与神经系统的形成及神经内分泌活动,在性别决定与分化过程中起到一定的作用。
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