搜索文献-EPS

以12 5Ⅰ标记的、人工合成的人胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )为底物 ,以鸡肾脏的提取液为粗酶液 ,研究在不同时间、粗酶液浓度、温度及pH值等条件下的酶促分解反应情况。结果显示 :①IGF Ⅰ分解酶反应时间以 30min为宜 ;②粗酶液的含量宜在 1 0 8μg·μL-1以下 ;③酶活性在 4 5℃时最高 ;④此酶在 5 0℃以下稳定 ,当温度升至 5 5℃时其活性急剧下降 ,升至 6 0℃时将降至最大活性的 2 0 %左右 ;⑤此酶最适pH值为 6 5～ 7 0。

关键词：胰岛素样生长因子Ι 分解酶酶特性

鲫胰岛素样生长因子-Ⅰ cDNA克隆及序列分析

[期刊] 淡水渔业 [作者] 刘军陈爱敬黄峰赵胜军胡兵侯永清

利用One-Step RT-PCR技术,从鲫(Carassius auratus)肝胰脏组织中克隆了胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ),并进行了序列分析。结果表明,鲫IGF-ⅠcDNA由486个核苷酸组成,编码包括信号肽、成熟肽(B、C、A、D四个域)和E域的161个氨基酸。核苷酸同源性分析揭示,鲫IGF-ⅠcDNA序列与金鱼的同源性最高,为99.18%;与鲮、三角鲂、团头鲂的同源性次之,分别为94.44%、94.65%、94.44%;与鲤、草鱼的同源性相对较低,为86.03%和85.29%。E区域的分析结果表明,鲫IGF-Ⅰ序列为Ea-2亚型。

关键词：鲫(Carassius auratus) 胰岛素样生长因子-Ⅰ cDNA RT-PCR 序列分析

哲罗鱼胰岛素样生长因子-II的原核表达与活性分析

[期刊] 中国水产科学 [作者] 吴秀梅徐黎明赵景壮刘淼曹永生卢彤岩尹家胜

在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF-II基因开放阅读框。将目的基因IGF-II与原核表达载体p SUMO连接构建出重组表达载体p SUMO-IGF。将该重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,约在40 k D处含有清晰的条带,与预期结果相符;目的蛋白以包涵体形式存在。对包涵体进行...

关键词：胰岛素样生长因子-II 哲罗鱼生物活性 MTT

哲罗鲑胰岛素样生长因子-I的原核表达及活性鉴定

[期刊] 水产学报 [作者] 王晓玉徐黎明刘淼赵景壮卢彤岩曹永生尹家胜

为进一步了解哲罗鲑ＩＧＦ－Ｉ，实验采用逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，从哲罗鲑肝脏的总ＲＮＡ中扩增出胰岛素样生长因子－Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）的ＣＤＮＡ开放阅读框（ｏＰｅＮＲｅＡＤＩＮＧＦＲＡｍｅ，ｏＲＦ）序列。利用原核表达载体ＰＳ构建重组表达质粒（ＩＧＦ－Ｉ／ＰＳ），并将其转化到宿主大肠杆菌ＲｏＳｅＴＴＡ后经ＩＰＴＧ诱导获得重组哲罗鲑ＩＧＦ－Ｉ蛋白。经ＳＤＳ－ＰＡＧｅ电泳检测，在３５～５０ｋｕ有条带与预期相符，且重组蛋白以包涵体的形式存在。包涵体经变性／复性实验后，获得纯化的ＩＧＦ－Ｉ融合蛋白。ｅＬＩＳＡ鉴定结果显示，目的蛋白能特异性识别抗鱼类ＩＧＦ－Ｉ抗体，表明获得了具有免疫．．．

关键词：哲罗鲑胰岛素样生长因子-I 原核表达生物活性

胰岛素样生长因子-1的放射免疫测定方法的建立

[期刊] 南京农业大学学报 [作者] 刘根桃陈伟华郑元林陈杰韩正康

胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）分别与两种载体蛋白——牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和卵清蛋白（ＯＡ）用戊二醛连接，经紫外分光光度仪扫描确定偶联成功。以ＩＧＦ－１－ＢＳＡ作为免疫原，皮内多点注射免疫青紫兰兔，制备ＩＧＦ－１抗体，经ＥＬＩＳＡ法测定，血清效价为１∶２０００，放免工作浓度为１∶１５０００。采用氯胺－Ｔ标记ＩＧＦ－１，用酸醇抽提法处理样品，去除ＩＧＦ－１结合蛋白。所建立的ＩＧＦ－１放免标准曲线，其最小检测量为０．０６ｎｇ／ｍＬ，批内误差为４．８％，批间误差为８．２％（ｎ＝１０）。

关键词：胰岛素样生长因子-1 放射免疫测定法

猪胰岛素样生长因子-Ⅰ的克隆及生物信息学分析

[期刊] 西南农业学报 [作者] 王锐赵跃张永云李卫真王淑燕霍海龙刘丽仙苗永旺霍金龙

为了克隆猪胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-I)以及检测该因子在各组织中的转录水平,分别提取猪13种组织RNA并反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增IGF-I编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH 5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与牛等5个物种构建系统进化树。同时采用半定量RT-PCR方法分析IGF-I在猪13种组织中的表达情况。结果显示,猪IGF-I编码区全长462 bp(GenBank登录号:JX827417),编码153个氨基酸。氨基酸二级结构预测表明无规卷曲占的比例最大,为57.52%。氨基酸序列同源性分析表明,与牛...

关键词：胰岛素样生长因子基因克隆生物信息学分析组织表达

鸡胰岛素样生长因子受体基因对胚胎发育的影响

[期刊] 华中农业大学学报 [作者] 赵瑞霞李邦佑周木清夏瑜梁佐钊杨中祥吴新诚龚炎长彭秀丽李文明熊家军余勇张淑君

以广东温氏集团培育的黄羽肉鸡种蛋胚胎为研究对象,并以与人和小鼠胚胎发育相关的胰岛素样生长因子2受体(insulin-like growth factor type II receptor,IGF2R)基因为候选基因,进行了SNP位点的筛选和多态性的检测,探讨了IGF2R的变异对胚胎死亡的影响。在IGF2R第34外显子中发现2个SNP位点,对具有AlwNⅠ酶切位点的SNP位点进行了PCR-RFLP检测,分析了胚胎IGF2R的SNP位点PCR-RFLPs基因型在死亡和正常发育胚胎中分布特征。经2χ检验,鸡基因IGF2R第34外显子AlwNⅠ-RFLP基因型在死亡和正常发育胚胎中存在显著差异,在死亡...

关键词：死亡胚胎正常发育胚胎鸡胰岛素样生长因子2受体基因 SNPs

草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因克隆及序列分析

[期刊] 水产学报 [作者] 白俊杰叶星李英华李新辉简清罗建仁

采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从草鱼肝脏的总RNA中扩增出胰岛素样生长因子 I(IGF I)基因序列 ,定向克隆至质粒pUC18。测定了该基因序列 ,推导其编码的蛋白质序列。克隆的cDNA序列编码包括B、C、A、D和E五个区域的 117个氨基酸。与鲤IGF I成熟肽比较 ,核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为 93.8%和 97.1%。E区域分析结果表明 ,所克隆的草鱼IGF I序列属于IGF IEa 2亚型

关键词：草鱼胰岛素样生长因子I 基因克隆

伊莎笼养蛋鸡胰岛素样生长因子I限制性片断多态性与骨矿的研究

[期刊] 南京农业大学学报 [作者] 邓益锋张皎侯加法

选择58周龄高产期伊莎笼养蛋鸡90羽,应用PCR扩增鸡IGF-I启动子上游7 kb处基因片段,用PstI消化产生限制性片段长度多态性,分析IGF-I多态性与胫骨、股骨、肱骨骨密度之间的关系。结果表明,伊莎蛋鸡PP、Pp、pp基因型频率分别为0.256、0.311、0.433,P和p等位基因频率分别为0.411 1和0.588 9。方差分析显示,肱骨的骨密度与IGF-I基因多态性相关,PP基因型组的骨密度和骨矿含量均显著大于pp基因型(P<0.05),股骨、胫骨基因型间无显著差异。PP基因型体质量显著大于Pp基因型。表明伊莎笼养蛋鸡IGF-I基因多态性和肱骨骨密度显著相关,P等位基因具有一定的优...

关键词：伊莎笼养蛋鸡胰岛素样生长因子-I 多态性骨密度

七带石斑鱼类胰岛素生长因子-Ⅰ成熟肽的克隆及原核表达与活性分析

[期刊] 水产学报 [作者] 陈圣毅刘新富徐永江刘芝亮柳学周史宝王妍妍

应用RT-PCR方法扩增七带石斑鱼类胰岛素生长因子-Ⅰ(esIGF-Ⅰ)成熟肽序列。该成熟肽序列由210个碱基组成,编码70个氨基酸,包括B-C-A-D 4个结构域。将此成熟肽片段导入原核表达载体pET-28a上,在IPTG诱导下成功在E.coli BL21(DE3)中融合表达。SDS-PAGE分析表明,融合蛋白大小为11 ku,在IPTG诱导后3 h表达量最高,占菌体总蛋白的51.8%,重组蛋白主要以包涵体形式存在。对重组蛋白进行变性、纯化和复性,获得了纯化的重组蛋白。Western-blotting免疫印迹分析表明,融合蛋白可特异性地被6×His抗体识别。细胞增殖实验表明,纯化的IGF-Ⅰ...

关键词：七带石斑鱼类胰岛素生长因子-Ⅰ 成熟肽克隆原核表达生物活性分析

牙鲆胰岛素样生长因子结合蛋白IGFBP-1 cDNA全长的克隆及表达分析

[期刊] 水产学报 [作者] 翟万营张俊玲施志仪李巍

利用RACE-PCR技术,从牙鲆肝脏组织总RNA中克隆得到胰岛素样生长因子结合蛋白-1(insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1)基因的全长cDNA序列,该cDNA全长为1 070 bp,开放阅读框为729 bp,编码242个氨基酸。通过系统进化树分析,牙鲆IGFBP-1与鱼类IGFBP-1基因紧密聚为一支;通过同源性比对,牙鲆IGFBP-1基因的核苷酸序列与大菱鲆同源性最高,为95%,而其推导的氨基酸序列与其它鱼类如大菱鲆、五条、黄金鲈、红点鲑、鲤和斑马鱼的同源性分别为89%、89%、84%、79%、67%和67%。半定量RT-...

关键词：牙鲆胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1) cDNA全长基因表达

达氏鲟2种胰岛素样生长因子的克隆及其对饥饿胁迫的响应

[期刊] 西南农业学报 [作者] 陈叶雨刘亚赖见生宋明江龚全

【目的】胰岛素样生长因子(IGF)是一类在细胞增殖与分化、免疫及个体生长发育中具有重要作用的调控因子。因此,对IGF表达特征的分析有利于揭示其在鱼类生长及营养调控等过程中的功能。【方法】本研究以达氏鲟转录组测序获得的unigene序列为基础,获得了胰岛素生长因子-1(IGF-1)和胰岛素生长因子-2(IGF-2)的cDNA全序列,并分析了IGF-1和IGF-2基因在各组织及饥饿胁迫下的表达情况。【结果】达氏鲟IGF-1全长为2262 bp,其中5′非编译区为292 bp,3′非编译区为1841 bp,开放阅读框(ORF)为489 bp,共编码163个氨基酸;IGF-2的全长为1821 bp,其中5′非编译区为109 bp,3′非编译区为1052 bp,开放阅读框为660 bp,编码220个氨基酸。达氏鲟IGF氨基酸序列与其他鲟鱼类具有较高的同源性。IGF-1和IGF-2在达氏鲟各组织中广泛分布,IGF-1在眼睛中的表达量最高,而IGF-2在肝脏和性腺中的表达量最高。饥饿条件下,肝脏、肠道和肌肉中的IGF-1表达量呈先上升后降低的趋势。【结论】与饥饿第0天相比,饥饿14 d后各组织中的IGF-1表达量显著性降低(P0.05),提示着达氏鲟IGF-2和IGF-1的功能可能存在一定的差异。

关键词：达氏鲟胰岛素样生长因子组织表达饥饿胁迫

肉鸡和蛋鸡早期发育阶段胰岛素样生长因子水平的比较

[期刊] 南京农业大学学报 [作者] 张根华陈伟华赵茹茜周浩良陈杰

应用放射免疫分析法，对出雏后５日龄和１０日龄的肉鸡和蛋鸡血清中胰岛素样生长因子（ＩＧＦ－１）水平进行了测定。结果表明：胚后早期发育阶段，蛋鸡的血清ＩＧＦ－１水平随体重的增加而增加，并且高于肉鸡，尤以１０日龄时更为显著（Ｐ＜０．０１）。不同品种相同日龄的雌性雏鸡间差异不显著，但雄性蛋鸡的血清ＩＧＦ－１水平却显著高于雄性肉鸡（Ｐ＜０．０１）；另外，同一品种雏鸡的血清ＩＧＦ－１水平未见有显著的性别差异（Ｐ＞０．０５）。

关键词：蛋鸡肉鸡胰岛素样生长因子(IGF-1) 放射免疫分析法(RIA)

首页
下一页
尾页
第 页

文献操作() 导出元数据文献计量分析

全选

导出文件格式：WXtxt

作者：

删除

推荐搜索

大豆黄酮对大鼠离体肝脏氮代谢和胰岛素样生长因子1水平的影响胰岛素样生长因子-Ⅰ对鸡等级前卵泡发育的促进作用哲罗鲑胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)cDNA分子克隆、序列分析及组织表达大菱鲆胰岛素样生长因子-I成熟肽的克隆、重组表达及活性分析星突江鲽胰岛素样生长因子II的原核表达与生物活性分析草鱼胰岛素样生长因子1受体基因cDNA全序列的克隆及功能大豆黄酮对大鼠肝脏氮代谢和胰岛素样生长因子生成和分泌的影响黄颡鱼胰岛素样生长因子结合蛋白1基因的克隆及表达分析三角鲂形态特征和胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的序列分析(英文) 草鱼胰岛素样生长因子结合蛋白IGFBP-1基因的全长cDNA克隆及表达