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[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李芙蓉 施文正 李燕
采用复合蛋白酶酶解南极磷虾得到虾粉多肽,经超滤分离和高速逆流色谱技术进行分离纯化并检验其体外抗氧化活性。结果表明:经超滤分离后的多肽在分子量范围为5～10 ku时多肽抗氧化活性最好,当浓度为10 mg/m L时,其超氧阴离子自由基清除率达到21. 28%,DPPH自由基清除率为86. 52%,对羟基自由基清除率为53. 49%,Fe~(2+)螯合率为85. 35%。对分子量范围在5～10 ku的多肽进行高速逆流色谱分析,采用体积比为氯仿∶丁醇∶甲醇∶水=4∶0. 75∶3∶2作为两相溶剂体系,下相作固定相,上相作流动相;反转,转速900 r/min,恒温水浴温度为25℃,在流动相的流速1. 5 m L/min,进样浓度20 mg/m L的条件下分离得到5个组分。经测定:当浓度为5 mg/m L时,P3组分清除超氧阴离子自由基的能力和Fe~(2+)螯合能力均显著高于其余4个组分,分别为37. 18%和92. 33%,P2组分的DPPH自由基清除率最高,为90. 33%,P5组分的羟基自由基清除率最高,为70. 11%。与未经HSCCC分离的对照组相比,抗氧化活性均得到明显增强。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
张元元 汪之和 陈敏 施文正
本文研究了３种不同的蛋白酶（木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶）分别水解南极磷虾得到多肽的体外抗氧化活性，以清除超氧阴离子、羟自由基和ＤＰＰＨ的能力为指标。结果表明，木瓜蛋白酶水解制备的多肽抗氧化活性比较好，其次是碱性蛋白酶。用响应面法优化木瓜蛋白酶水解南极磷虾制备多肽的工艺参数，经凝胶电泳测定其分子量，显示该多肽有３个明显条带，其分子量大多位于３～７ ｋｕ。将上述多肽溶液脱氟后经超滤系统分离，按分子量（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇＨｔ，ｍｗ）大小分为ｍｗ≥１０ ｋｕ，５～１０ ｋｕ，ｍｗ≤５ ｋｕ的３种多肽，并比较其抗氧化活性的强度。在本实验体系浓度范围内，３种不同分子量的多肽对超氧阴离子、羟．．．
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
赵侠 李燕 孙慧敏 郑昌亮 宋益善
食源性二肽基肽酶IV（dipeptidyl peptidase-IV，DPP-IV）抑制肽和抗氧化肽分别有助于清除体内自由基和调节机体血糖。为实现脱脂南极磷虾粉的高值化利用，为糖尿病治疗寻找新方法，从脱脂南极磷虾粉酶解产物中制备DPP-IV抑制肽和抗氧化肽。使用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰酶水解脱脂南极磷虾粉，探究时间与水解度、活性、产率的关系，并分离纯化多肽，最后通过分子对接确定抑制作用位点。结果表明，酶解液经超滤、Sephadex G15分离纯化和液相-质谱联用技术鉴定后，得到了4条具有DPP-IV抑制和抗氧化作用的肽，氨基酸序列分别为WPPLSPFRCPR、IPDWFLNRQ、FLWLKKTPLPL和DTVPWFPR。其中IPDWFLNRQ具备较高DPP-IV抑制活性，DPP-IV抑制活性IC_(50)值为（0.616±0.097) mmol/L；WPPLSPFRCPR具有较高的抗氧化活性，DPPH EC_(50)值为(0.0983±0.011) mmol/L，ABTS EC_(50)值为(0.116±0.073) mmol/L。分子对接结果表明这4种肽主要通过氢键与DPP-IV活性中心及其以外的位点相结合，从而达到抑制DPPP-IV活性的作用。本研究基于脱脂南极磷虾粉制备食源性DPP-IV抑制肽和抗氧化肽，以期为南极磷虾粉的开发利用提供理论依据。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陆英 廖红梅 谭君 吴朝比 刘仲华
以徐薯18型甘薯茎叶为原料,建立了高速逆流色谱法制备分离甘薯茎叶中化合物的方法.以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(0.5%乙酸)(体积比0.5:5:1:5)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2mL/min,转速900r/min,进行2次分离,并结合1次制备高效液相,共分离得到7个高纯度化合物.结合化学显色反应、紫外扫描、高效液相色谱等,初步鉴定4个为黄酮类化合物,其中1个为芦丁,1个为槲皮苷.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
蔡海林 杜良伟 刘祥英 陈桂华 王彦辉 柏连阳
采用超临界CO2流体萃取中药前胡中总香豆素,以石油醚∶乙酸乙酯为洗脱系统,对提取物进行硅胶柱初步分离,利用高效液相色谱确定石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇∶水=5∶5∶5∶4作为高速逆流色谱(HSCCC)分离的溶剂体系,在主机转速为850 r/min、流动相流速为2.0 mL/min、254 nm波长检测条件下,根据色谱图手动收集各色谱峰组分,分离所得化合物通过核磁共振(NMR)检测并确定其结构,得到4个单体化合物,分别是前胡香豆素Ⅱ、北美芹素、白花前胡甲素、补骨脂素。
[期刊] 水产学报
[作者]
李玉锋 王敬敬 檀利军 彭知云 赵晟 刘海泉 赵勇
为了提升可溶性南极磷虾蛋白的抗氧化性能，将芦丁复合到可溶性南极磷虾蛋白(SAKP)上，成功制备了SAKP-芦丁复合物，一种新型的多酚-蛋白复合物。通过测定SAKP-芦丁复合物清除二苯基苦基苯肼自由基(DPPH-)和羟基自由基(OH-)的能力来评估其抗氧化能力。同时采用H2O2诱导HepG-2细胞氧化损伤模型评价了SAKP-芦丁复合物对细胞受到氧化损伤时的保护能力。结果发现，与芦丁复合后，SAKP的抗氧化和清除自由基的能力明显增强；与天然SAKP相比，SAKP-芦丁复合物显著提升了HepG-2细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性，减少了细胞因氧化应激产生的脂质过氧化产物(MDA)含量，最终降低了氧化应激损伤对细胞的伤害。以上结果表明，SAKP-芦丁复合物是一种新型的、有希望应用于开发功能性食品的蛋白资源。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈思远 刘永祥 曹小舟 张逸婧 陈海娟 沈新春
【目的】探究能有效地从小麦胚芽清蛋白二步双酶酶解物中分离得到高活性抗氧化肽的工艺。【方法】以小麦胚芽清蛋白为原料，ＤＰＰＨ自由基清除率和Ｆｅ～（２＋）螯合能力为抗氧化活性的评价指标，通过胰蛋白酶进行酶解，依次采用超滤膜和凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－７５）对酶解产物进行分离纯化，筛选出活性较高的组分；采用碱性蛋白酶对获得的活性较高组分进行酶解，通过凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－１５）和反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）分离纯化其酶解产物；采用质谱技术（ｅＳＩ－ＴＯＦ ＭＳ／ＭＳ）对抗氧化活性最高的组分进行结构鉴定。【结果】分离得到３个活性组分（峰）Ｐ＿ａ、Ｐ＿ｂ、Ｐ＿Ｃ，采用ＤＰＰ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
欧阳杰 赵昕源 马田田
虾青素由于结构稳定性较差，在高温条件下易降解和异构化。为了掌握南极磷虾粉加工过程中虾青素含量、结构及抗氧化能力的变化情况，采用高效液相色谱法测定虾青素在各加工阶段的含量及结构变化，对比虾青素在各加工阶段的抗氧化性差异，分析虾青素结构与功能活性的相关性。结果显示，南极磷虾原料中虾青素含量为110.6 mg/kg，其中全反式结构虾青素占比90.7%,13-顺式虾青素和9-顺式虾青素占比分别为4.7%和4.6%，经过蒸煮和干燥后，虾青素含量分别为88.7和52.1 mg/kg，全反式虾青素占比分别为76.2%和72.2%,13-顺式虾青素占比分别为19.9%和21.9%,9-顺式虾青素占比分别为3.9%和5.9%。南极磷虾原料中虾青素的3S, 3′S,3S, 3′R和3R, 3′R三种光学异构体含量分别为16.8、17.9和72.1 mg/kg，蒸煮后分别为12.0、25.5和55.3 mg/kg，干燥后分别为2.8、8.1和12.4 mg/kg。各阶段虾青素清除DPPH自由基能力均显著强于Vc，在羟基自由基清除实验中，蒸煮和干燥后的虾青素抗氧化能力强于原料中的虾青素，在FRAP铁离子还原实验中，蒸煮和干燥后的虾青素也表现出了更高的还原能力。研究表明，在虾粉加工过程中，虾青素的几何异构主要发生在蒸煮阶段，光学异构主要发生在干燥阶段，相对于磷虾原料，经蒸煮和干燥后的虾青素抗氧化能力增强。本研究可为南极磷虾粉加工工艺优化及虾青素提取利用提供理论依据和技术参考。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
郎蒙 李燕 蒋蔚薇 孙慧敏 宋益善
该研究以南极磷虾（Euphausia superba）粉为原料，α-葡萄糖苷酶抑制率为指标，在确认最佳生物酶的基础上，通过单因素实验和响应面优化酶解工艺条件，并用超滤和G-25进行分离纯化，凝胶色谱法探究酶解液和多肽的分子量及其分布情况。结果表明：复合蛋白酶酶解效果最佳；最佳酶解条件为酶解时间5.9 h、料液比3.75:1、酶添加量0.062 g/g_((原料))；酶解液的分子量集中分布在3000 u以下，占98.63%；经超滤C4（
[期刊] 海洋渔业
[作者]
杨程 高权新 张晨捷 彭士明 施兆鸿
以银鲳(Pampus argenteus)幼鱼为研究对象,设置4组不同南极磷虾粉替代鱼粉水平(0%、10%、20%、40%,其中0%为对照组)的饲料,进行60 d的饲养实验,探讨饲料中添加南极磷虾粉对银鲳幼鱼生长、非特异性免疫及抗氧化功能的影响。结果显示:饲料中添加南极磷虾粉的处理组银鲳增重率与特定生长率(SGR)较对照组均有显著性提高(P 0.05)。血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)及溶菌酶(LZM) 20%饲料组活性均为最高,但与对照组无显著差异;肝脏AKP活性、肾脏LZM活性10%饲料组均分别显著高于其它各组(P 0.05);添加南极磷虾粉的饲料组血清和肌肉中过氧化氢酶(CAT)的活性均高于对照组,其中40%饲料组血清和肌肉CAT的活性均显著高于对照组(P <0.05)。结果表明,本实验条件下,结合银鲳幼鱼生长性能、非特异性免疫及抗氧化能力的分析,南极磷虾粉替代饲料中鱼粉的适宜比例建议控制在10%～20%。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
赵敏 梁萌青 郑珂珂 徐后国
饲料中添加０、１０％、２０％的南极磷虾粉，配制３组（对照组Ｋ－０、Ｋ－１０、Ｋ－２０）等氮等脂的实验饲料，在室内流水养殖系统进行为期９０ ｄ的养殖实验，探讨南极磷虾粉对半滑舌鳎（Ｃｙｎｏｇｌｏｓｓｕｓ ｓｅｍｉｌａｅｖｉｓ）雄鱼繁殖性能和抗氧化能力的影响。结果显示，饲料中添加南极磷虾粉对半滑舌鳎雄鱼肝体比、性体比、精液浓度、睾酮含量均无显著性影响（Ｐ＞０．０５）；Ｋ－１０组与Ｋ－２０组精巢中超氧化物歧化酶（ｓｏｄ）活性无显著性差异（Ｐ＞０．０５），但均显著高于对照组（Ｐ０．０５），但均显著低于对照组（．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈田 商婷婷 何珍 崔亚丽 陆英
以干辣椒为材料,正己烷为溶剂,提取辣椒中的生物碱,采用高速逆流色谱法进行分离、纯化,利用质谱和核磁共振鉴定化合物的结构,测定其抗炎活性。结果表明:采用正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水、冰乙酸的体积比15∶15∶20∶20∶7.5为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2 m L/min,主机转速850 r/min,分离温度25℃,检测波长为270 nm,300 min内连续2次进样,每次进样300 mg,获得22 mg、纯度为98.2%的化合物1,16 mg、纯度为98.0%的化合物2;经质谱及核磁共振鉴定
关键词：
辣椒 高速逆流色谱 辣椒碱 抗炎活性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张莹 施兆鹏 聂洪勇 黄志强
为了进一步研究儿茶素的作用机理 ,对自制的制备型逆流色谱分离纯化绿茶提取物中多种儿茶素单体的技术进行了研究 .采用两组溶剂系统 ,一组是石油醚 -乙酸乙酯 -水 ( 0 .2∶ 1∶ 2 ) ;另一组是正丁醇 -乙酸乙酯 -水 ( 0 .2∶ 1∶ 2 )系统 .每次实验进样量为 4 g绿茶提取物 .用前一组溶剂系统 ,表儿茶素 ( EC)、表没食子儿茶素没食子酸酯 ( EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯 ( GCG)和表儿茶素没食子酸酯 ( ECG)得到了很好的分离 ,每一种单体的纯度达到了 98% ,其中 ECGC达到 99% ;用后一组溶剂系统 ,表没食子儿茶素 ( EGC)、儿茶素 (...
关键词：
逆流色谱仪 绿茶提取物 儿茶素 咖啡碱
[期刊] 中国水产科学
[作者]
牛瑞 孙谧 于建生 郑媛 王海英
以扇贝(Chlamys farreri)裙边为研究对象,通过海洋碱性蛋白酶水解获得抗氧化肽。研究酶解温度、pH值、固液比、加酶量、酶解时间对酶解效果的影响。在单因素实验的基础上选取实验因素和水平,采用L16(45)正交试验,根据Box-Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,对酶解条件进行优化研究。结果表明,最佳酶解条件为:固液比1:3.26(m/V),加酶量0.44%(W/V),温度31.20℃,pH值为9.0,酶解时间为1 h,羟自由基清除率为83.78%,与预测值的相对误差为0.29%,理论值与预测值基本一致,预测模型能较好地反映实际情况。本研究旨在为今后扇贝裙边蛋白的开发...
关键词：
扇贝裙边 抗氧化肽 酶解 响应面分析
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
胡晓丹 张德权 孙爱东 王建中 刘玉军
紫苏酮是一种对试验动物肺部具有潜在毒性的物质.该文采用高速逆流色谱分离法从紫苏叶中分离出了紫苏酮.结果表明,以V(正己烷)∶V(乙醇)∶V(水)=6∶5∶1为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,转速为800 r/min,流动相流速为1.2 mL/min,进样1 g粗提物,6 h后分离出28.0 mg紫苏酮,经气相色谱测定,组分纯度达到98.8%,并用核磁共振等方法进行了结构鉴定.
关键词：
高速逆流色谱 紫苏 紫苏酮 分离
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