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[期刊] 中国农业科学  [作者] 范培虎  危艳武  郭龙军  吴洪丽  黄立平  刘长明  
【目的】为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用,澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。【方法】选取35日龄阴性健康猪30头,随机分6组,PCV2/HP-PRRSV顺序共感染组、HP-PRRSV/PCV2顺序共感染组、HP-PRRSV+PCV2同时共感染组、HP-PRRSV感染组、PCV2感染组、未接种对照组。感染后每天测量体温、观察临床症状,每周称量体重、采血。用流式细胞仪检测血液中的CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、γδT、NK细胞及粒细胞和单核细胞变化;免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王凤雪  冷雪  李真光  温永俊  刘准  武华  
根据GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJ株F3代全基因序列(GenBank登录号为EU860248),结合多个PRRSV亚洲株Nsp2基因比对结果,设计合成引物,选择高致病性PRRSV TJ株噬斑克隆纯化前后14个不同代次,利用合成的引物扩增各代次Nsp2基因的高变区片段及F3代和F92代Nsp2全基因,并进行产物克隆和氨基酸序列分析及结构预测。测序结果表明:PRRSV TJ株在克隆传代过程中出现了序列整段缺失,共缺失120个氨基酸,并且从F18代噬斑克隆开始一直稳定存在。缺失高变区及Nsp2蛋白二级结构预测结果表明:缺失的氨基酸使Nsp2蛋白在空间结构上发生了较大的...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 黄泽彬  李润成  尹德明  颜运秋  刘忠华  丁建  汪镇南  余兴龙  
从湖南省内多个出现疑似猪"高热病"症状的猪场采集病料70份,采用RT-PCR方法进行分子流行病学调查.结果检出PRRSV阳性病料54份,阳性率高达77.14%(54/70).对其中8份分别来自娄底、浏阳、永州、双峰、益阳、株洲、宁乡和溆浦的病料中的PRRSV基因组Nsp2高变区部分基因片段进行RT-PCR扩增、克隆和序列测定分析.与国内外美洲型PRRSV分离株比较,序列相似性为72.2%~100%,其中,与公布的高致病性PRRSV缺失变异毒株的同源性最高,序列相似性为98.2%~100%.序列分析表明,这些毒株均是天然存在缺失的变异毒株,其Nsp2均有2个部位出现了缺失,分别为编码1个氨基酸的...
[期刊] 水产学报  [作者] 贺扬  华丽  汪开毓  陈德芳  王均  王二龙  王兴丽  杨倩  吴学婧  何洁  赖为民  
为了研究维氏气单胞菌及其胞外产物的致病机制对预防和治疗斑点鲖维氏气单胞菌病的作用。通过对一株高致病性斑点鲖源维氏气单胞菌胞外产物(extracellular product,ecp)的提取并结合体内外实验研究其酶活性与致病性,以期为维氏气单胞菌的致病机制研究提供新思路。采用饱和硫酸铵沉淀法,对一株高致病性的斑点鲖源维氏气单胞菌的ecp进行了提取,将其进行浓度检测、SdS-paGe分析和酶活测定;并将提取的ecp攻毒斑点鲖,通过病理学分析研究其致病机制。提取的ecp经考马斯亮蓝试剂盒确定其浓度为0.743 mG/m l;SdS-paGe分析发现该ecp类型丰富,分子大小主要集中在20.0~33....
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王凤雪  郭利  温永俊  宋妮  杨艳玲  张淑琴  谭斌  武华  
【目的】确定吉林省某疑似高致病性PRRS猪场的病原,研究其基因特性。【方法】采集疑似感染高致病性PRRSV病猪的脏器组织,处理后接种MARC-145细胞,观察细胞病变,分离PRRSV;应用RT-PCR方法检测和确定分离毒株的基因型,采用间接免疫荧光、电镜观察和全基因组测序检测分离的病毒。【结果】分离毒株为北美洲型PRRSV,命名为JL-04/12,其基因组全长为15 320bp(不包括PolyA),可使MARC-145细胞产生典型的细胞病变。序列比对结果表明:JL-04/12株与经典毒株VR-2332和CH-1a的核苷酸同源性分别为89.5%和94.9%;与高致病性毒株JXA1、HUN4的核苷...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 欧阳康  马玲  吴健敏  白安斌  邓世杰  谢彬  袁书智  
收集2006~2010年来自广西12个地市的21份高致病性猪繁殖与呼吸综合征(H-PRRSV)阳性病料,克隆包含缺失区的Nsp2基因片段并登陆Genbank(登录号为HQ015350-HQ015370),经序列比较发现,该21株Nsp2序列具有与我国2006年爆发的H-PRRSV完全一致的缺失特征,广西H-PRRSV流行毒株Nsp2基因随着流行时间的推移朝着偏离猪高致病性蓝耳病代表毒株JXA1株的方向发展,在遗传进化树上呈地域性分布。此外,广西H-PRRSV毒株氨基酸逐渐发生变异,特别是2010年来源于3个不同地方的3个毒株5个位点均发生突变,即P19L、R33Q、R34F、S43I、E107...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 唐晓纯  裴威威  李笑曼  
为研究我国高致病性禽流感疫情的蔓延特点、变化趋势和应对策略,预防禽流感疫情的大爆发,利用世界卫生组织公布的2003—2013年有关禽流感疫情数据,以及国家卫生部发布的有关疫情公告,进行统计与分析。结果表明:在WHO报告的15个发生H5N1禽流感疫情的国家中,我国发生确诊病例42人、死亡28人,总感染人数和死亡人数均位于第四,具有发生时间长、死亡率高的特点。H7N9疫情发生突然,爆发期约1个月,截至2013年底,共发生感染病例141人,死亡45人,疫情波及12个省(市)的42个地市。我国在完善应急预案制度基础上,建立了公开、及时、透明的禽流感疫情信息通报机制,同时将H7N9禽流感纳入国家乙级传染...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 曹剑波  李彬  陈焕春  肖少波  
对高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(HP-PRRSV)人工感染的成年猪脏器进行透射电子显微镜观察,结果发现,肺部组织细胞病变最严重,部分毛细血管破裂,毛细血管内皮细胞裂解,肺泡巨噬细胞线粒体嵴肿胀严重;脑部组织神经元细胞凋亡和胶质细胞坏死;肾脏和淋巴结组织中均出现病毒的复制和线粒体嵴的肿胀。该结果为阐明HP-PRRSV的致病机理提供了实验依据。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王小敏  李燕华  蔺涛  刘闰夏  何孔旺  童光志  袁世山  
旨为建立高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)野毒株持续性感染细胞模型。通过将HP-PRRSV野毒株JX143感染Marc-145细胞,感染的细胞经连续传代35代,建立了稳定的PRRSV持续感染的细胞模型,获得了JX143-Marc-145-P35细胞株。应用RT-PCR、免疫荧光、空斑形态分析等技术跟踪观察了JX143-Marc145细胞株连续传代过程中病毒在细胞内的存在和生物学特性的变化。为了进一步分析病毒持续性感染过程中基因的特征性变化,通过RT-PCR扩增出JX143-Marc145-P35的全基因,并进行测序和序列分析。结果表明,在细胞模型建立的过程中,细胞病变(Cyto...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 周伦江  王隆柏  方勤美  吴学敏  车勇良  陈如敬  魏宏  庄向生  
【目的】研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染MARC-145细胞生长相关蛋白表达量的变化,明确差异蛋白的功能信息,为深入研究PRRSV病毒复制和致病机理奠定基础。【方法】采用差异蛋白质组学和Western blotting技术,通过建立双向凝胶电泳,对高致病性PRRSV感染MARC-145细胞后表达量差异蛋白质进行了胶内酶解、质谱分析鉴定及数据库检索,明确差异蛋白质的相关信息。【结果】得到7个表达稳定、重复性好的蛋白点,其中有5个蛋白点找到匹配蛋白,分别为热休克蛋白70、硫氧还蛋白、S100钙结合蛋白A6、3-磷酸甘油脱氢酶和内参肌动蛋白,其余2个蛋白点为未知蛋白。在MARC-...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 刘金玲  魏澍  支海兵  
从辽宁的本溪、沈阳、抚顺、鞍山等地采集疑似高致病性蓝耳病病料,将采集的肺和淋巴结分别研磨,离心并制备成病毒悬液,用试剂提取RNA,将提取出的RNA反转录成cDNA,然后用特异性引物对目的片段进行克隆扩增,最后将所得目的片段测序并与国内其他分离株进行序列分析。结果获得480bp特异性高致病性蓝耳病病毒N基因片段,与国内其他地区高致病性蓝耳病病毒分离株的N基因相比较,核苷酸序列同源性在91.1%以上,氨基酸序列同源性在98.6%以上,表明高致病性蓝耳病病毒辽宁地区分离株与国内其它分离株亲源关系较近,属于同一分支。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李静  王靖飞  吴春艳  杨彦涛  吉增涛  王洪斌  
【目的】为实现对高致病性禽流感发生的风险评估,以在该病的控制中为制定科学有效的控制策略提供理论依据。【方法】通过对已发生的高致病性禽流感相关数据的统计分析,结合头脑风暴法,确定了高致病性禽流感发生的风险因素;利用层次分析法确定各风险因素的权重;应用多指标综合评价法计算评估结果。【结果】建立了由评估指标体系、风险因素量化评价标准、指标权重、综合评分方法组成的高致病性禽流感发生风险评估框架。【结论】利用该风险评估框架可进行风险因素的综合分析,实现对中国高致病性禽流感疫情发生风险的定量评估。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张建武  庄金山  袁世山  
【目的】对来自2006年猪病流行爆发地的组织样品进行多种病毒的检测,确定引起本次流行的致病病原及PRRSV的分子流行病学特征。【方法】利用(RT-)PCR对采集的样品进行PRRSV北美型和欧洲型、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)以及瘟病毒的检测,对PRRSV阳性的进行ORF5的序列测定并分析。【结果】检测到16份PRRSV北美型阳性样品,PCV2阳性样品2份,其它病毒均未检到。PRRSV ORF5序列分析表明笔者分离到的PRRSV株可分为2个群。【结论】(1)PRRSV与2006年肆虐中国养猪业的猪病流行有直接关系;(2)2006年PRR...
[期刊] 中国农业资源与区划  [作者] 刘婷婷  周力  应瑞瑶  
[目的]基于中国省际面板数据,采用相对价格法测算2001年1月至2017年12月中国家禽市场分割指数,在此基础上使用阿尔蒙分布滞后模型检验了高致病性禽流感对中国家禽市场分割程度的冲击及滞后性影响。[方法]文章运用相对价格法测算家禽分割指数,同时使用阿尔蒙分布滞后模型进行计量回归。[结果]研究发现,高致病性禽流感对家禽市场造成严重负向冲击:不仅在短时间内阻碍省际间家禽市场流通,更是长期加剧省际家禽市场的分割。疫情发生的当月禽类感染型禽流感对家禽市场分割程度的影响小于人感染型禽流感;随着滞后期的推移,禽类感染型禽流感对家禽市场分割程度造成的即期滞后影响和累积滞后影响均大于人感染型禽流感。[结论]中国政府不仅要关注高致病性禽流感发生时疫情的防控和家禽养殖户的补偿,也要充分考虑疫情结束后停养、休市、限运等政策对家禽市场带来的滞后性影响,完善补偿和市场价格机制,正确引导家禽养殖户以及其他利益相关者恢复信心,确保家禽市场稳定。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 张子卉  贾琪  连朋敬  李静云  徐彤  白玉  李鸿儒  乔健  
旨在分析环境低温对H9N2亚型禽流感病毒感染小鼠致病性的影响。选用120只6~8周龄,雄性SPF BALB/c小鼠,随机分为4组:无感染常温组(PBS处理,(20±2)℃)、无感染低温组(PBS处理,(10±2)℃)、H9N2病毒感染常温组(H9N2处理,(20±2)℃)、H9N2病毒感染低温组(H9N2处理,(10±2)℃)。在感染后观察感染小鼠发病14d内的临床症状、存活率,肺脏病变程度、肺部细胞因子含量的动态变化以及肺脏病毒载量。结果表明:1)与H9N2病毒感染常温组小鼠相比,环境低温处理的H9N2病毒感染小鼠临床症状明显加重,其中体重明显降低,但差异不显著(P>0.05),存活率由95%降为67%,肺水肿程度和肺组织病变程度更加严重;2)H9N2病毒感染低温组与H9N2病毒感染常温组相比,肺脏TNF-a和IL-1β含量无显著差异,但均显著高于2个无感染组(P<0.01);3)H9N2病毒感染低温组与H9N2病毒感染常温组相比,肺组织病毒载量显著增加(P<0.01)。综上,环境低温明显增加了H9N2亚型流感病毒对小鼠的致病性,为进一步揭示环境低温与流感病毒感染之间的关系,以及采取有效的预防措施提供数据基础。
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