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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李英奇 梁雅旭 高霄霄 万珍 张国敏 王锋
[目的]本试验旨在探讨高能饲粮对湖羊肝脏组织细胞增殖、能量代谢和脂代谢相关基因表达的影响。[方法]选取36只体况良好、体质量相近的3月龄湖羊公羔，随机分为正常日粮组(CON)和高能日粮组(HE),每组3个重复，每个重复6只。CON组和HE组个体饲喂日粮的能量水平分别为10和11 MJ·kg~(-1)。预饲14 d后正式饲喂60 d,试验结束后屠宰并采集肝脏组织，用于H&E染色、免疫组化检测和荧光定量PCR(qPCR)、Western blot检测。[结果]H&E染色显示HE组湖羊肝脏组织中出现轻度空泡样变性；免疫组化发现PCNA蛋白主要表达于肝细胞核中，mTOR和LXRα蛋白主要定位在肝细胞质中。高能饲粮饲喂显著提高肝脏组织PCNA和SREBP-1c的mRNA与蛋白表达水平(P<0.05),显著降低肝脏组织LKB1和AMPK的mRNA与蛋白的表达水平(P<0.05),显著降低肝脏组织PGC-1α和SIRT1的蛋白表达水平(P0.05)。[结论]提高湖羊的日粮能量水平能增强湖羊肝脏组织的细胞增殖及脂肪合成能力。
关键词：
湖羊 肝脏 能量代谢 脂代谢
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
梁雅旭 邓凯平 张真 高霄霄 王智博 王锋 樊懿萱
[目的]本试验旨在探究日粮中添加富含多不饱和脂肪酸的15%紫苏籽(PFS)对湖羊肝脏自噬和凋亡的影响。[方法]选取30只体重相近且健康状况良好的2月龄湖羊公羔，随机分为2组，分别饲喂含0%(对照)和15%PFS的日粮。饲养84 d后，每组随机选择5只羊屠宰，采集肝脏组织。通过qPCR和Western blot等技术检测肝脏中自噬、凋亡及LKB1-AMPK-MTOR信号通路相关基因与蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比，15%PFS显著上调PPARGC1A、BECN1、ATG5、ATG7基因和PPARGC1A、BECN1蛋白表达水平(P0.05);15%PFS组肝脏组织中LKB1-AMPK-MTOR通路关键基因LKB1、AMPK和MTOR mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05)。[结论]紫苏籽可能通过调控LKB1-AMPK-MTOR信号通路和自噬相关基因与蛋白的表达水平，进而调控湖羊肝脏自噬进程。
关键词：
湖羊 紫苏籽 自噬 凋亡
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
梁雅旭 邓凯平 张真 高霄霄 王智博 王锋 樊懿萱
[目的]本试验旨在探究日粮中添加富含多不饱和脂肪酸（polyunsaturatedfatty acids， PUFA）的15%紫苏籽（perilla frutescens seed， PFS）对湖羊肝脏自噬和凋亡的影响。[方法]选取30只体重相近且健康状况良好的2月龄湖羊公羔，随机分为两组，分别饲喂含0%和15% PFS的日粮。饲养84 d后，每组随机选择5只羊屠宰，采集肝脏组织。通过qPCR和Western blot等技术检测肝脏中自噬、凋亡及LKB1-AMPK-MTOR信号通路相关基因与蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比，15% PFS显著上调PPARGC1A、BECN1、ATG5、ATG7基因和PPARGC1A、BECN1蛋白表达水平（P < 0.05），对凋亡相关基因的表达水平无显著影响（P > 0.05）；15% PFS组肝脏组织中LKB1-AMPK-MTOR通路关键基因LKB1、AMPK和MTOR mRNA表达水平显著高于对照组（P < 0.05）。[结论]紫苏籽可能通过调控LKB1-AMPK-MTOR信号通路和自噬相关基因与蛋白的表达水平，进而调控湖羊肝脏自噬进程。
关键词：
湖羊 紫苏籽 自噬 凋亡
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张国敏 程春雨 刘建玲 安世钰 张婷婷 王子玉 孟繁星 樊懿萱 雷治海 王锋
[目的]本试验旨在探究早期能量限饲与后期能量补偿对湖羊生长性能、肝脏组织中Hippo信号通路核心基因和AMPK蛋白表达的影响。[方法]选择32只系谱背景清楚、体质量相近的3月龄雄性湖羊羔羊,随机均分为对照组和补偿生长组。试验分为能量限饲(60 d)和补偿(90 d)2个阶段,能量限饲阶段对照组和试验组饲喂日粮的代谢能分别为11.64和6.84 MJ·kg~(-1),在能量补偿阶段日粮的代谢能均为12.86 MJ·kg~(-1)。饲养结束后屠宰,测定,再通过RT-qPCR和Western blot检测肝脏组织中Hippo通路核心基因和AMPK蛋白的表达变化。[结果]在能量限饲阶段,与对照组相比,能量限饲显著降低了补偿组湖羊的肝脏质量和体质量(P<0.05),湖羊肝脏组织中Hippo通路核心基因和YAP1蛋白的表达量显著降低(P<0.05),而AMPK的mRNA和蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05)。在能量补偿阶段,补偿组湖羊的肝脏质量和体质量、湖羊肝脏组织中Hippo通路核心基因(除YAP1外)的表达量和AMPK蛋白的磷酸化水平均与对照组差异不显著。[结论]湖羊在适当水平的能量限饲后进行补偿处理具有补偿生长现象,Hippo通路和AMPK蛋白可能共同参与不同营养水平下对湖羊肝脏发育的调节。
关键词：
湖羊 补偿生长 肝脏 Hippo通路
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
姜雪元 张树坤 张源淑
采用双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)结合MAIDI-TOF/TOF质谱方法分析不同精粗比日粮条件下肝脏蛋白/酶表达谱的差异,探讨不同精粗比日粮条件下肝脏糖脂代谢与乳脂肪合成的关系及可能机制。8只健康的泌乳中期山羊随机分为2组,日粮精粗比分别为4∶6(低精料)和6∶4(高精料),采用2×2拉丁方设计,2次重复。取乳样,测定产奶量和乳中甘油三酯(TG)的含量,并进行活体肝脏穿刺取样,应用双向电泳技术对肝脏样品进行蛋白表达谱分析。试验结果表明:与低精料组相比,高精料组山羊日平均产奶量显著增高(P<0.05),而乳中TG含量显著降低(P<0.05)。...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王林枫 贾少丹 杨改青 朱河水 柳如意 严平 李明 杨国宇
【目的】探寻脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)影响奶山羊肝脏营养代谢的特征代谢物(生物标记物),阐明LPS引起肝脏代谢障碍的机制。【方法】选择12—18月龄,体重24—28 kg的关中奶山羊15只,平均分为3组(每组5只),分别为对照组(CTL)、低剂量LPS处理组(LPS-L)和高剂量LPS处理组(LPS-H)。LPS-L和LPS-H分别腹腔注射20、40μg·kg-1 BW的LPS溶液,CTL注射等容量生理盐水。24 h后,LPS-L和LPS-H追加LPS溶液。48 h后,静脉采血,分离血浆和血清,检测血液相关生化指标;然后活体采集肝脏组织,液氮保存。肝脏组织冻干后,用...
关键词：
代谢组学 脂多糖 肝脏 代谢物 奶山羊
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张文旭 王宝维 葛文华 张名爱 李文立
【目的】探讨胆碱对青农灰鹅体内脂质转运、代谢的作用及脂肪酸合成酶FAS(fatty acid synthase)基因表达的影响,确定鹅日粮中胆碱的最适添加量。【方法】将180只1日龄青农灰鹅随机分为6个处理组,每处理组3个重复,每个重复10只。试验在玉米-豆粕型饲粮的基础上各组的胆碱添加量分别为0、600、1 200、1 800、2 400和3 000 mg.kg-1,试验期15周。屠宰后测定肝脏和血清总胆固醇、甘油三酯,血清低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖、胰岛素、胰高血糖素水平,肝脏脂蛋白酯酶、肝脂酶及血清胆碱酯酶活性和肝脏脂肪酸合成酶(FAS)基因表达量。【结果】①4周龄时...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
苏胜彦 李齐发 陈睿 曾怡 祝红生 张翔 王艳平 谢庄 吴松青 刘玉弟
【目的】筛选影响朗德鹅肥肝性状的候选基因,为朗德鹅肥肝性状的早期选择提供依据。【方法】气相色谱测定朗德鹅肝脏脂肪酸组分,H.E染色观察肝细胞形态,CT测定活体朗德鹅肝脏脂肪沉积状况,荧光实时定量PCR检测填饲对脂生成相关基因mRNA表达的影响。【结果】填饲朗德鹅的肝重、肝重指数显著增加(P<0.01),血清谷丙转氨酶、胆碱脂酶、甘油三酯和H-胆固醇显著提高(P<0.05),肝脏组织中A...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
贾慧娜 罗海玲 刘昆 左兆云 张玉伟 王朕朕
为克隆滩羊肝脏α-生育酚转移蛋白(α-TTP)CDS区基因并构建其原核表达载体,通过Trizol法提取滩羊肝脏组织总RNA,将其反转录为cDNA后利用人工合成和PCR扩增相结合的方法得到α-TTP CDS区基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a,命名为pET28a-TTPA。结果表明:扩增了滩羊肝脏α-TTP CDS区基因,同已公布的绵羊α-TTP序列同源性达99.76%,并且将其成功克隆至原核表达载体pET28a。结果为后续α-TTP基因原核表达及其抗体的制备奠定了基础。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘国庆 黄治国 刘振山 王新华 刘守仁 杨利国
目的通过对羔羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因表达的发育性变化的研究,为羔羊生长发育规律提供理论依据。方法选择2、30、60、90和120日龄的雄性哈萨克羊和新疆细毛羊各6只(共54只,120日龄只有新疆细毛羊),测体重后屠宰,采取肝脏,用荧光实时定量PCR法,以GAPDH基因为内标,检测IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因的发育性变化,并进行品种之间比较。结果(1)肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量都呈先升后降的趋势,其中雄性哈萨克羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量从2日龄到60日龄持续上升,60日龄后开始下降,90日龄的表达量显著低于前三个时期(P<0.05);雄性新疆细毛羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量从2日龄到90...
[期刊] 水产学报
[作者]
陈书健 吴成龙 叶金云 李荣华
为研究饲料中维生素A(VA)对青鱼幼鱼生长、血清生化指标和肝脏糖脂代谢相关酶活性及基因表达的影响,实验选取360尾初始体质量为(6.10±0.10) g的青鱼幼鱼,随机分配至3个实验组中,每个实验组设置3个平行。采用单因素实验设计,以无维酪蛋白和明胶为蛋白源、菜籽油为脂肪源、糊精为糖源,同时添加矿物质混合物和维生素混合物(无VA添加)配制成3组实验饲料,分别以饲料1 (Diet1)、饲料2 (Diet2)和饲料3 (Diet3)表示。在饲料1、饲料2和饲料3中分别添加0、2 200和20 000 IU/kg VA醋酸酯(500 000IU/g),经高效液相色谱法(Agilent-1100, Agilent,美国)检测后实验饲料中VA的实际含量分别为178.2、2 058.9和18 436.2 IU/kg,养殖周期为8周。结果显示:饲料中VA缺乏会显著降低青鱼幼鱼的增重率(WGR)和特定生长率(SGR);VA缺乏会显著降低血清血糖(GLU)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL)浓度,增加总胆固醇(TCH)浓度。饲料中添加2 058.9IU/kg VA能显著提高肝脏己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶(PFK)、丙酮酸激酶(PK)活性,促进葡萄糖转运蛋白-2 (GLUT-2)、HK、葡萄糖激酶(GK)、PFK和葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)基因表达。当饲料中VA含量为2 058.9 IU/kg时,对肝脏脂肪酸转运蛋白-1(FATP-1)基因表达无显著影响,但显著影响肉碱棕榈酰转移酶-1 (CPT-1)和肉碱棕榈酰转移酶-2 (CPT-2)基因表达。当饲料中VA缺乏时,CPT-1和CPT-2基因表达受到显著性抑制;当饲料中添加过量VA时,乙酰辅酶A羧化酶-2 (ACC-2)和脂蛋白酯酶(LPL)基因表达受到抑制;同时,VA过量组中肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)基因表达显著下降。研究表明,在饲料中添加2 058.9 IU/kg VA可以促进青鱼幼鱼生长,提高肝脏对葡萄糖的转运能力,促进糖酵解和糖异生代谢平衡,同时促进脂肪酸合成和转运。
[期刊] 水产学报
[作者]
杨丽萍 郑文佳 秦超彬 高风英 谢帝芝 闫潇 朱华平 卢迈新 聂国兴
为探讨糖脂比对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、血液生化指标和肝脏糖代谢关键酶的影响，本实验设计了５种不同糖脂比（１．５、２．３、３．９、７．０、１６．５）的等氮等能饲料，以吉富罗非鱼幼鱼为实验对象，进行了为期８周的饲养实验。结果显示，随饲料中糖脂比升高，吉富罗非鱼特定生长率（ＳＧＲ）、增重率（ＷＧＲ）和蛋白质效率（ＰＥＲ）先升高后降低，糖脂比为３．９和７．０时，ＷＧＲ、ＳＧＲ和ＰＥＲ最高。饵料系数（ＦＣＲ）的变化趋势与此相反，在糖脂比为３．９和７．０组显著低于其他组。随着饲料糖脂比的增加，吉富罗非鱼全鱼粗脂肪含量逐渐下降，在糖脂比为１６．５时达到最低水平，但仅与１．５组存在显著差异。血浆甘油三酯在糖脂．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
宋洪新 任战军 杨雪娇 贺国瑞 韩营 常万波 颉宏兵
【目的】研究日粮能量水平对断奶至3月龄獭兔血液生化指标以及肝脏过氧化物酶体增殖剂激活受体γ基因(PPARγ)、胰岛素诱导基因2(INSIG-2)表达的影响。【方法】选用断奶的健康獭兔160只,随机分为4组,每组40只,4组试验兔的日粮能量水平分别为9.7,10.5,11.3和12.1MJ/kg,试验分断奶~2月龄、2~3月龄2个阶段。分别于试验开始的第30,60天早晨采血,测定血液中的葡萄糖、甘油三酯、总蛋白、总胆固醇、高密度胆固醇、低密度胆固醇含量及谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶活性;并取肝脏样品,采用实时荧光定量法测定PPARγ和INSIG-2基因的表达情况。【结果】在2月...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴凡 陆星 文华 田娟 刘伟 蒋明 杨长庚 喻丽娟 梁宏伟
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
郑元林 韩正康 陈杰 艾晓杰
利用多种慢性血管导管技术研究了 β 肾上腺素能受体激动剂克伦特罗 (CL ,0 8mg·kg-1,肠系膜静脉给药 ,每天2次 ,连续 5d)对绵羊肝脏物质代谢的影响。结果表明 ,在CL作用下 ,绵羊肝静脉和门静脉血液中尿素氮浓度分别减少 2 7 4 8% (P
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