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[期刊] 中国农业科学  [作者] 冯京海  张敏红  郑姗姗  谢鹏  李军乔  
【目的】研究高温和氧化应激对体外培养肉鸡骨骼肌线粒体功能的影响,初步探讨高温影响肉鸡肌肉品质的机制。【方法】从16只2周龄AA肉鸡的左右小腿后侧分离腓骨长肌,使用不锈钢支架维持肌肉束的正常长度,在95%O2、5%CO2混合气体饱和条件下,体外孵育2h。分别测定升高孵育温度或在培养介质中添加邻苯三酚后,肉鸡腓骨长肌线粒体活性氧(ROS)产量、钙泵(Ca2+-ATPase)活性和乳酸含量的变化。【结果】升高培养温度显著提高肉鸡骨骼肌线粒体H2O2的产生量(P<0.0001),并影响肌纤...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李晓庆   李盛   周晓铧   Mohamed Ahmed Fathi   李春梅  
[目的]孵化后期热处理能够在一定程度上提高肉鸡的耐热性,而骨骼肌和肝脏线粒体功能及温敏TRP离子通道与机体耐热性密切相关。因此,本试验旨在研究孵化后期热处理对雏鸡骨骼肌和肝脏温敏TRP离子通道及线粒体功能的影响。[方法] 选取240枚AA肉鸡种蛋随机分为3组 ( 每组8个重复,每个重复10枚种蛋 ) :1 ) CON组:37.5 ℃孵化;2 ) TM1组:在孵化期第16至18天39.5 ℃热处理3 h;3 ) TM2组:在孵化期第16至18天41.5 ℃热处理3 h。出雏后测定一日龄直肠温度,检测胸肌、腿肌和肝脏组织相关基因表达水平。[结果]与CON组相比,孵化后期热处理显著降低了一日龄雏鸡的直肠温度 ( P < 0.001 );TM1组雏鸡腿肌器官指数显著增加 ( P < 0.05 )。与CON组相比,TM2组雏鸡胸肌的avUCP基因表达显著降低 ( P < 0.01 ),COXⅣ ( P < 0.05 )、Tfam ( P < 0.001 )、PGC1α ( P < 0.05 )、ATP5B ( P < 0.001 ) 和IDH3a ( P < 0.01 ) 基因表达均显著增加,TRPV1、TRPV2和TRPV3基因表达均显著降低 ( P < 0.05 ),SERCA1基因表达显著增加 ( P < 0.001 )。与CON组相比,TM2组雏鸡腿肌的avUCP 基因表达显著降低 ( P < 0.01 ),ATP5B基因表达显著增加 ( P < 0.05 );TM2组雏鸡肝脏组织的Tfam和SERCA1基因表达显著增加 ( P < 0.05 )。相关性分析结果显示,温敏TRPs基因表达与线粒体经典产热基因avUCP和avANT表达呈正相关关系,与线粒体氧化磷酸化功能相关基因表达呈负相关关系。[结论]孵化后期热处理可通过降低一日龄雏鸡胸肌的温敏TRPs基因和线粒体产热相关基因表达水平,增加线粒体生物发生及氧化磷酸化功能相关基因表达水平,引起线粒体热适应性变化。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 赵景鹏  姜克杰  董辉  
利用同位素双标法,测定在NO供体硝普钠(SNP)、NO合酶(NOS)抑制剂NG-硝基、L-精氨酸甲酯(L-NAME)和糖皮质激素皮质酮(corticosterone)存在条件下,基础状态或胰岛素诱导的肉鸡离体腓骨长肌的2-脱氧葡萄糖(2-DG)转运速率。结果表明:①SNP引起肌肉基础状态和胰岛素诱导的2-DG转运速率增加,表明NO是调节骨骼肌糖代谢的一个重要细胞因子。②皮质酮引起静态肌肉2-DG转运速率增加,可能与其破坏肌纤维膜的完整性有关。③皮质酮引起肌肉胰岛素诱导的2-DG转运速率下降,加入SNP后,胰岛素机能明显改善,表明应激早期,机体NO浓度的下降,可能与糖皮质激素诱发的胰岛素抵抗有一...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李方华  侯玲玲  马月辉  庞全海  关伟军  
【目的】探讨体外培养条件下北京油鸡骨骼肌卫星细胞分离、培养及鉴定的方法,建立适于北京油鸡骨骼肌卫星细胞体外扩增的培养体系,为今后进一步研究北京油鸡骨骼肌卫星细胞提供技术平台。【方法】以15日龄的鸡胚胸肌为材料,采用联合酶消化法分离骨骼肌卫星细胞,差速贴壁法纯化细胞,使用Pax7、Desmin、Myod等骨骼肌卫星细胞的特异性标志对所得细胞进行免疫荧光鉴定,随后进行成肌诱导分化,并比较了3种培养体系对骨骼肌卫星细胞增殖的影响。【结果】细胞免疫荧光鉴定结果呈阳性,证实所培养的细胞为北京油鸡骨骼肌卫星细胞;成肌诱导后,细胞相互融合形成多核的肌管,成肌特异性标志MHC表达呈阳性;对不同扩增培养体系比较...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 潘家强  李锦春  谭勋  王金勇  孙卫东  王小龙  
采用组织贴块法培养肉鸡肺动脉内皮细胞(PAEC),并依据细胞形态学特点和凝血因子Ⅷ相关抗原免疫组化染色结果对所培养的细胞进行鉴定。以黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶(X/XO)系统作为氧自由基发生系统建立PAEC氧化损伤模型。结果表明:肉鸡PAEC在体外能够存活并传5-6代。形态学观察和Ⅷ因子抗原免疫组化染色检查证明培养的细胞符合肺动脉内皮细胞的特点。氧自由基能够明显损伤PAEC,X/XO系统作用下细胞生长被抑制,甚至导致细胞死亡,并且这种抑制作用对XO有剂量依赖性。与正常对照组相比,损伤组PAEC培养液中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量升高,提示氧自由基促进了PAEC的脂质过氧化。这说明氧自由基对肉鸡...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 刘永祥  呙于明  
为研究镁对肉仔鸡红细胞体外氧化应激的敏感性和红细胞膜流动性的影响,本试验用96只1日龄的AA肉仔鸡随机分配为低镁日粮组(镁含量1.2 g/kg)和对照组(镁含量2.4 g/kg)。在体外氧化应激反应体系中,低镁组肉仔鸡红细胞丙二醛(MDA)的生成量高于对照组(P<0.01),低镁日粮显著提高红细胞膜的各向异性参数(P<0.05);低镁组肉仔鸡红细胞的谷胱甘肽(GSH)含量降低了17%,丙二醛(MDA)的含量升高了19%(P<0.05),红细胞膜的镁含量降低18%(P<0.05);低镁日粮组肉仔鸡红细胞膜胆固醇的含量(P<0.01)均显著提高。结果表明表明低镁日粮...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张夏薇  慕春龙  朱伟云  
[目的]本试验使用硫氢化钠(NaHS,硫化氢供体)处理Caco-2细胞,研究硫化氢(H_2S)对肠上皮细胞炎症、氧化应激和线粒体硫化物代谢功能的影响,探究H_2S影响肠道健康的可能机制。[方法]试验分为4个组,分别为对照组、低(0.1 mmol·L~(-1))、中(1 mmol·L~(-1))、高(2 mmol·L~(-1))浓度的NaHS组,处理24 h后测定各组细胞活力、炎症细胞因子基因表达、硫化物代谢酶基因表达和氧化应激指标。[结果]与对照组相比,NaHS能够增强肠上皮细胞活力,2 mmol·L~(-1) NaHS显著上调肿瘤坏死因子α(TNF-α)的基因表达水平(P<0.05),显著降低超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05)。[结论]低浓度H_2S能增强细胞活力,提高线粒体硫化物代谢能力和氧化应激水平。高浓度H_2S能促进炎症反应,提高氧化应激水平,影响线粒体硫化物代谢能力,可能对肠道健康产生不利影响。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 张佳鑫  陈继发  
选取80只3月龄康乐黄鸡,随机均分为4组,每组5个重复,每个重复4只。对照组(CON组)和应激组(STR组)饲喂基础饲粮,酵母硒组(SY组)和酵母硒+应激组(SY_STR组)饲喂在基础饲粮中添加0.5 mg/kg酵母硒的试验饲粮。预试期7 d,正试期21 d。试验第21天时,给STR组和SY_STR组肉鸡腹腔注射15 mg/kg敌草快,CON组和SY组注射等量生理盐水,24 h后,每个重复选取1只鸡,采集盲肠内容物样品,用于肠道菌群分析,研究酵母硒对氧化应激肉鸡盲肠微生物多样性、菌群结构及物种丰度的影响。结果表明:盲肠菌群α多样性指数在各组间的差异均无统计学意义(P>0.05);β多样性分析显示,与CON组和SY_STR组相比,STR组盲肠菌群结构分布相对零散,物种相似度较低;与CON组相比,STR组厚壁菌门与拟杆菌门相对丰度之比(F/B)、肠球菌属和埃希氏菌属–志贺氏菌属相对丰度显著(P<0.05)升高,毛螺旋菌属和嗜胆菌属相对丰度显著(P<0.05)降低;与STR组相比,SY_STR组和SY组拟杆菌门相对丰度显著(P<0.05)降低;与STR组相比,SY_STR组Muribaculaceae未明确属相对丰度显著(P<0.05)升高,肠球菌属相对丰度显著(P<0.05)降低;LEfSe分析显示,与CON组相比,STR组梭菌目vadinBB60群、Monoglobus、丹毒丝菌科显著富集,与STR组相比,SY_STR组拟杆菌门、普雷沃氏菌科_UCG–001、拟普雷沃氏菌属、帕拉普氏菌属显著富集。可见,氧化应激能引起肉鸡盲肠微生物多样性和菌群结构的改变,添加酵母硒能够缓解氧化应激对肉鸡肠道菌群结构造成的负面影响。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 张佳鑫  陈继发  
选取80只3月龄康乐黄鸡,随机均分为4组,每组5个重复,每个重复4只。对照组(CON组)和应激组(STR组)饲喂基础饲粮,酵母硒组(SY组)和酵母硒+应激组(SY_STR组)饲喂在基础饲粮中添加0.5 mg/kg酵母硒的试验饲粮。预试期7 d,正试期21 d。试验第21天时,给STR组和SY_STR组肉鸡腹腔注射15 mg/kg敌草快,CON组和SY组注射等量生理盐水,24 h后,每个重复选取1只鸡,采集盲肠内容物样品,用于肠道菌群分析,研究酵母硒对氧化应激肉鸡盲肠微生物多样性、菌群结构及物种丰度的影响。结果表明:盲肠菌群α多样性指数在各组间的差异均无统计学意义(P>0.05);β多样性分析显示,与CON组和SY_STR组相比,STR组盲肠菌群结构分布相对零散,物种相似度较低;与CON组相比,STR组厚壁菌门与拟杆菌门相对丰度之比(F/B)、肠球菌属和埃希氏菌属–志贺氏菌属相对丰度显著(P<0.05)升高,毛螺旋菌属和嗜胆菌属相对丰度显著(P<0.05)降低;与STR组相比,SY_STR组和SY组拟杆菌门相对丰度显著(P<0.05)降低;与STR组相比,SY_STR组Muribaculaceae未明确属相对丰度显著(P<0.05)升高,肠球菌属相对丰度显著(P<0.05)降低;LEfSe分析显示,与CON组相比,STR组梭菌目vadinBB60群、Monoglobus、丹毒丝菌科显著富集,与STR组相比,SY_STR组拟杆菌门、普雷沃氏菌科_UCG–001、拟普雷沃氏菌属、帕拉普氏菌属显著富集。可见,氧化应激能引起肉鸡盲肠微生物多样性和菌群结构的改变,添加酵母硒能够缓解氧化应激对肉鸡肠道菌群结构造成的负面影响。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 萨仁娜  佟建明  何春年  高微微  张琪  
【目的】通过研究海带岩藻聚糖及其级分对肉鸡巨噬细胞免疫功能的影响,寻找海带提取物调节肉鸡免疫功能的有效级分,为饲料工业科学使用海带资源提供理论依据。【方法】采用水提醇沉的方法,从海带中提取岩藻聚糖,通过纤维柱和凝胶柱层析,对岩藻聚糖进行分级纯化。体外培养肉鸡腹腔巨噬细胞,在培养液中分别加入岩藻聚糖(200μg·ml-1)和岩藻聚糖5种级分(100μg·ml-1),采用MTT方法检测细胞存活率,采用ELISA检测细胞因子IL-1和TNF-α,同时测定巨噬细胞的吞噬活性等其它免疫指标。【结果】海带岩藻聚糖及其级分显著提高肉鸡腹腔巨噬细胞的吞噬活性,促进巨噬细胞呼吸爆发、NO的产生量和iNOS活性,...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 萨仁娜  佟建明  何春年  高微微  张琪  
【目的】在氧化应激条件下,研究海带岩藻聚糖及其级分对肉鸡巨噬细胞免疫功能的影响,初步探讨海带岩藻聚糖及其级分的免疫调节功能与抗氧化作用的关系。【方法】以叔丁基过氧化氢(tBOOH)为活性氧诱导剂,加入肉鸡腹腔巨噬细胞培养液中,测定细胞培养液中抗氧化酶的变化,巨噬细胞分泌一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、以及细胞因子IL-1和TFN-α等免疫指标的变化。【结果】用tBOOH处理后的巨噬细胞,细胞存活率显著下降(P<0.05),乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)显著升高(P<0.05),SOD和GSH-Px酶活性显著降低(P<0.05)。巨噬细胞的吞噬活性显著降低(P<0.0...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 高颖晖  周万红  马贺  戚一曼  王敦  
【目的】探讨补充地鳖虫提取物对大鼠运动能力、骨骼肌抗氧化酶表达水平及活性的影响,以明确其作为运动补剂的可能性。【方法】对大负荷游泳训练大鼠按各组平均体质量的0.5,1.0和1.5g/kg剂量分别补充地鳖虫提取物,在8周大负荷训练结束后测定大鼠力竭游泳时间、骨骼肌抗氧化酶活性及其原因表达水平。【结果】8周大负荷训练后,与单纯大负荷运动组相比,补充地鳖虫提取物组大鼠运动能力显著提高,其骨骼肌SOD、CAT、GST3种抗氧化酶活性均显著增加,同时3种抗氧化酶编码基因的表达水平也显著上调。【结论】补充地鳖虫提取物能够显著提高大鼠运动能力和骨骼肌抗氧化酶活性,其可能的机理是地鳖虫提取物上调了抗氧化酶编码...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张兰霞  施正香  王新颖  耿爱莲  李保明  
【目的】研究紫外线对肉仔鸡骨骼生长的影响。【方法】将720只1日龄AA肉用仔鸡随机分成两组(公母各半),分别放到除光照制度外其它完全相同的两栋密闭鸡舍,第一舍采用国产普通白炽灯照射;第二舍从第2周开始增加使用紫外线保健灯。两舍内的温度、湿度及免疫接种程序均按常规要求进行。日常管理采用垫料平养,自由采食和饮水。【结果】用紫外保健灯照射肉仔鸡,可促进骨骼生长速度(前3周胫长增加,差异显著,P<0.05;第6周腿肌重增加了3.87%,差异显著,P<0.05);改善骨骼质量[胫骨矿密度增加了6.11%,差异极显著,P<0.01;血清钙、血清磷,碱性磷酸酶(AKP)活性都得到改善];提高了生产性能(体重...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 付佳  梁金逢  阴银燕  杨倩  
为建立鸡骨髓源树突状细胞(DC,dendritic cells)体外培养方法,用重组鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rGM-CSF)和重组鸡白细胞介素4(rIL-4)体外诱导鸡骨髓细胞分化为DC,然后通过形态观察、表型鉴定及功能分析来初步鉴定所培养的DC。试验结果表明:培养7 d后,光学显微镜下观察到细胞表面不规则,有显著的树突状突起,呈典型的DC形态,流式细胞仪测得细胞表面CD11c和MHCⅡ分子的表达量分别为69.3%和63.0%。经脂多糖或CpG-ODN刺激24 h后的DC,其表面成熟分子标志CD40和CD86上调表达,同时其刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强(P<0.01)。结论:本...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王庆云  杨维仁  杨在宾  宋修春  
【目的】研究不同无机磷水平日粮中添加植酸酶对肉鸡生长性能及骨骼的影响,以确定适宜的无机磷和植酸酶用量。【方法】选取1日龄肉鸡1 500只,随机分为5个处理,对照组日粮中添加16.3 g/kg磷酸氢钙,其余4组分别添加12.3,8.2,4.1和0 g/kg磷酸氢钙后再添加500 FTU/kg植酸酶,各组钙磷比为1.2~1.4,测定各组鸡的生长性能、胫骨鲜重、胫骨脱脂重、胫骨灰分和矿物质元素含量以及胫骨折断强度。【结果】未添加磷酸氢钙组肉鸡的日平均采食量、日增重均显著低于对照组(P...
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