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[期刊] 中国农业科学
[作者]
李丽 何美敬 崔顺立 侯名语 陈焕英 杨鑫雷 王鹏超 刘立峰 穆国俊
【目的】种质资源是作物育种的基础,创制具有多种表型特征的高油酸花生新材料,对高油酸花生育种具有重要意义。【方法】以常规品种白沙1016和高油酸花生品系CTWE为材料,通过对2个亲本ahFAD2A和ahFAD2B ORF的扩增与序列分析,确定其突变类型;利用等位基因特异性PCR(allele-specific PCR,AS-PCR)对两亲本油酸性状基因型进行确认;采用单粒近红外光谱技术(near infrared reflectance spectroscopy,NIRS)结合气相色谱(gas chromatographic,GC)分析对各世代单株的油酸及亚油酸含量进行测定;利用产量性状及油酸含...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈晓军 吴凯伸 惠建 白海波 马斯霜 李靖宇
【目的】亚油酸是一种人体必需的脂肪酸,能加快体内脂肪代谢与分解、减少胆固醇在血管壁上形成积存、有效预防动脉硬化的发生、提高人体免疫力、促进骨骼发育、提高记忆力、预防脑部功能退化等功能。利用基因编辑技术对控制脂肪酸合成途径的关键酶ω-3脂肪酸去饱和酶基因进行精准编辑,关闭下游产物的合成途径,以便提高水稻上游亚油酸的含量,为创制富集亚油酸水稻材料提供依据。【方法】水稻脂肪酸合成途径中的关键酶ω-3脂肪酸去饱和酶基因(OsFAD3)存在2个拷贝,分别分布在第11和第12染色体,且两者cDNA同源性达97.32%。根据基因编辑原理(编辑的特异性取决于引导RNA(gRNA)的特性),在2个同源基因序列高度一致的外显子区域,分别设计合成2个gRNA,并分别构建植物基因编辑载体,利用农杆菌介导法转化本地受体材料(富源4号)。通过对基因编辑植株进行靶位点测序鉴定,分析2个位点的编辑效率和基因型。同时,对OsFAD3双突变体进行粒宽、粒长等主要籽粒农艺性状分析。采用气质联用检测法测量OsFAD3双突变体籽粒的37种脂肪酸含量。【结果】获得2个位点的纯合编辑材料,同时也获得了其他不同基因型组合的编辑材料;与对照材料相比,OsFAD3双突变体的粒宽、粒长等主要籽粒农艺性状均没有发生显著变化,但稻谷中亚油酸的相对含量提高了3.36个百分点。【结论】在不改变籽粒主要农艺性状的前提下,实现了利用基因编辑技术通过转化一个载体同时精准敲除2个ω-3脂肪酸去饱和酶基因,提高了籽粒中亚油酸的相对含量。
关键词：
水稻 基因编辑 高亚油酸 米糠油
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
荆禹铭 嵇乐乐 肖栋 胡春梅 侯喜林 李英 胡君 刘同坤
[目的] 本文旨在创制优质的菜薹四倍体新材料。[方法] 采用2 g·L~(-1)的秋水仙素溶液点滴二倍体LCX019幼苗的子叶生长点，通过形态学、解剖学、细胞学与流式细胞仪的方式筛选鉴定出同源四倍体植株，并对二、四倍体植株的农艺性状以及品质特性进行分析比较。[结果] 形态学与解剖学结果显示，同源四倍体菜薹在株型、叶片、花、种荚、菜薹等方面表现出“巨大性”的特点；气孔孔径变大，气孔密度下降；花粉粒体积相比二倍体增大，形状呈橄榄球形或不规则形状。细胞学结果显示，四倍体菜薹根尖染色体数目为二倍体的2倍；流式细胞仪的结果分析表明，四倍体的DNA荧光强度约为二倍体的2倍。营养品质方面，四倍体菜薹的可溶性糖含量、有机酸含量及纤维素含量显著上升76.17%、13.71%以及80.34%，叶绿素含量、硝态氮含量显著下降25.01%、45.10%，可溶性蛋白含量无显著变化。通过分析二、四倍体的光响应曲线与光合特性，发现四倍体菜薹LCX019对弱光的利用能力强于二倍体植株。[结论]获得了具有优良品质的菜薹同源四倍体新材料，为菜薹的育种工作提供新的种质资源。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
汤伟华 刘叶琼 张子楠 王金鸽 刘同坤
[目的] 不结球白菜地方品种具有品质优但产量低的特点，利用秋水仙素加倍的方法可以获得高产优质的同源四倍体不结球白菜新种质。[方法] 以浓度0.2%的秋水仙素诱变剂滴定处理二倍体不结球白菜子叶生长点，经过形态学、解剖学、细胞学鉴定及流式细胞仪倍性分析，筛选诱变植株，成功获得同源四倍体不结球白菜新材料，并比较分析二、四倍体农艺性状指标、营养品质、光合特性、光合作用相关基因表达量差异。[结果] 结果表明，四倍体株型呈现出聚拢型，叶片趋于近圆形，花器官明显变大；叶表皮气孔变大，相同面积下气孔密度减小；花粉粒不同于二倍体规则的椭圆形，呈现出明显不规则形；根尖细胞内染色体数目为二倍体的两倍；细胞内相对DNA含量为二倍体的两倍；植株的可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、纤维素含量及叶绿素含量比二倍体显著增加，可溶性糖含量达到极显著水平，维生素C含量和硝态氮含量分别比二倍体显著降低；最大光合速率（P_(max)）、光饱和点（LSP）和表观量子效率（AQY）与二倍体相比增长了60.46%、54.10%和8.33%，光合能力更强；调控光合作用多种基因相对表达量显著高于二倍体。[结论] 本研究成功获得了具有高产、优质潜力的同源四倍体不结球白菜新材料。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张咪 宋莹 王夏 刘金平 张昌伟 李英 侯喜林 柳李旺 刘同坤
[目的]本文旨在创制高产抗病的四倍体不结球白菜‘五月慢’新材料。[方法]利用2 g·L~(-1)秋水仙素溶液处理不结球白菜‘五月慢’二倍体幼苗子叶生长点，通过形态学、细胞学、解剖学、流式细胞仪分析等方法鉴定筛选出同源四倍体植株，并对二、四倍体植株的形态学指标、农艺性状、营养品质、光合特性、抗病能力等方面进行比较分析。[结果]与二倍体相比，四倍体植株开展度降低，叶片的长宽比明显变小，叶型扁圆形，叶柄显著增厚，种子、花器官、种荚等明显增大；叶片气孔变大，气孔密度减小；花粉粒呈现矩形、菱形等不规则形状；细胞染色体数目和DNA荧光强度为二倍体的2倍；可溶性糖、纤维素含量显著性提高，硝态氮、叶绿素含量显著减少，可溶性蛋白、有机酸含量无显著变化；光饱和点、光补偿点、暗呼吸速率分别增加了13.47%、24.02%、12.12%,光合能力更强；相同培养条件下灰霉菌表达量更低，抗病性更强。[结论]获得了具有高产、抗病潜力的同源四倍体不结球白菜‘五月慢’新材料。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
管苇 张云霞 杨树琼 陈劲枫 娄群峰
【目的】黄瓜(Cucumis sativus L.)遗传基础狭窄,种质资源多样性较为有限,遗传育种研究相对落后。本试验旨在创制整倍体和非整倍体黄瓜种质材料,建立其准确的染色体组成鉴定方法,为进一步选育黄瓜各种染色体系、目标性状的染色体定位及遗传育种研究奠定基础。【方法】以华北生态型黄瓜‘长春密刺’的高代自交系为材料,0.4%秋水仙素溶液处理萌动种子,诱导染色体数目加倍。为获得同源三倍体材料,以诱导获得的同源四倍体为母本,二倍体为父本进行杂交,授粉35—45 d后采收成熟果实进行胚拯救。采用染色体计数,结合形态学、叶片气孔电镜观察,对诱导株及杂交后代的倍性进行鉴定。利用染色体特异的探针进行荧光原...
[期刊] 中国科技论坛
[作者]
裴黎
新材料是发展新技术的基础,新材料又是新技术的组成部分。材料的进步和新材料的研制、使用,会给技术进步、经济增长和社会发展带来重大的影响,对我国国民经济建设和国防现代化具有重要意义。材料工业还承担着传统产业技术改造和新兴产业发展的重任。20多年来,我国材料工业从无到有、从小到大,已经发展成为具有相当研究、试验
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨漫宇 王琴 唐宗祥 杨恩年
【目的】探索5BS·7BS/5BL·7BL易位染色体在来自简单杂交川麦42×川麦55的高代重组自交系(RILs)中对染色体及农艺性状的影响,以期为这对相互易位染色体在育种和生产中的应用提供指导。【方法】利用基于寡核苷酸探针Oligo-pSc119.2-1、Oligo-pTa535-1和Oligo-(GAA)_7的ND-FISH技术,对200份F_6RILs进行分析,以探明染色体变异情况。【结果】细胞学鉴定的142个纯合株系包括4种类型:1B和5B/7B(43份)、1RS·1BL和5B/7B(30份)、1B和5BS·7BS/5BL·7BL(35份)、1RS·1BL和5BS·7BS/5BL·7BL(32份),且它们在株高、分蘖、小穗和千粒重上没有差异。17y456和17y588两份自交系是含染色体结构变异且高抗条锈病的新材料,其中17y456聚合了1RS·1BL、5BS·7BS/5BL·7BL、3BS·5AS/3BL·5AL,17y588含有5BS·7BS/5BL·7BL和4D~(Changed)染色体。【结论】5BS·7BS/5BL·7BL易位染色体对株高、分蘖、小穗和千粒重无负作用,这为育种家在应用易位系进行品种改良提供了指导意义。利用5BS·7BS/5BL·7BL易位染色体进行简单有性杂交能够容易获得染色体结构变异新材料,为今后小麦育种及种质创新提供了新的方向。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张锦芳 郑本川 李浩杰 蒲晓斌 崔成 柴靓 蒋俊 蒋梁材
利用自主选育的双低甘蓝型油菜品系ＣＷＨ－２（Ｐ１）和白菜型菜用种千筋京水菜（Ｐ２）进行甘白远缘杂交并用Ｐ１回交再连续自交获得１３４个ＢＣ１Ｆ４株系。对甘白杂交１３４个ＢＣ１Ｆ４株系进行农艺性状和品质性状统计及频次分布分析。结果表明，鉴定出芥酸含量１．５％以下、硫苷含量３０μｍｏｌ／ｇ以下、含油率４３％以上、产量２９０ ｋｇ／６６７ｍ２以上，可以直接用于育种的优良株系６个；同时，鉴定出一批具农艺性状和品质性状极端值的特殊材料。本研究鉴定出的优良株系为甘蓝型油菜育种储备了优良材料，具极端值的特殊材料为开展相关农艺性状和品质性状的分子生物学研究储备了基础材料。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张宏军 肖钢 谭太龙 李栒 官春云
【目的】对EMS诱变甘蓝型油菜后代主要脂肪酸含量进行检测,并对M2代中获得的高油酸材料在分子水平进行分析。【方法】利用0.5%、1.0%和1.5%共3个EMS浓度处理甘蓝型油菜(湘油15号),分析检测M1和M2代的主要脂肪酸含量;分别克隆高油酸突变体05-4和对照材料FAD2基因,对其进行核苷酸和氨基酸序列分析。【结果】浓度为1.5%时处理M2代发现了一株高油酸植株(油酸含量71%);序列分析表明,高油酸材料FAD2A基因第614位碱基A突变成G导致天冬氨酸变成甘氨酸,FAD2B基因第59位碱基A突变成C导致天冬酰胺变成苏氨酸,在第722位碱基A突变成T导致酪氨酸变成苯丙氨酸。【结论】采用浓度...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈卫江 李莓 王同华 惠荣奎 涂金星 傅廷栋
【目的】探讨外源萝卜恢复基因的导入途径与筛选方法,转育甘蓝型油菜萝卜细胞质雄性不育(Ogu CMS)恢复材料,为甘蓝型油菜Ogu CMS育种应用创造条件。【方法】以萝-蓝(Raphanobrassica,2n=58)为供体材料,利用嫁接克服远缘杂交生殖障碍导入外源恢复基因,对获得的属间杂种依次进行甘蓝型油菜性状、自(异)交结实性状以及恢复率稳定性状等特征特性强化筛选。【结果】育成一份甘蓝型油菜Ogu CMS纯合恢复材料CLR650,体细胞染色体数目为38—40条,减数分裂过程中部分细胞存在染色体落后及形成染色体桥等异常现象,但细胞异常对花粉正常形成没有明显影响,恢复株自交、测交均为100%可育...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
安然 张彦锋 陈娜娜 韦世豪 朱彦涛 穆建新
[目的]创制可以稳定遗传的黄籽甘蓝型油菜种质,为黄籽油菜材料的创制与利用奠定理论与实践基础。[方法]以甘蓝型油菜BnaTT2基因为研究对象,以甘蓝型油菜K407为受体材料,构建相应单靶点的CRISPR/Cas9基因编辑载体,利用农杆菌介导法将载体转化入油菜植株,测定获得的黄籽油菜基因编辑材料TT2-Mutant的籽粒色度和千粒质量,并用红外分析仪测定其脂肪酸组分相对含量和含油量。[结果]对甘蓝型油菜T_1代转基因株系靶位点的序列检测和突变类型分析结果表明,BnaTT2基因靶位点被成功编辑,编辑类型为单碱基的插入或缺失。获得的T_2代BnaTT2基因缺失油菜材料籽粒千粒质量(4.74 g)相比对照材料K407(3.62 g)增大;种子颜色变黄,黄色度等级为4.8;籽粒中的含油量极显著升高6.10%,亚油酸和亚麻酸相对含量分别极显著提升3.13%和4.99%,芥酸相对含量则极显著降低1.53%。[结论]BnaTT2基因敲除后可导致相应功能缺失,从而改变油菜籽的种皮颜色,并对其脂肪酸组成产生影响。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘玉汇 王丽 杨宏羽 余斌 李元铭 张俊莲 王蒂
【目的】创造块茎高支链淀粉或纯支链淀粉含量的转基因马铃薯材料。【方法】以构建的由Patatin启动子驱动的pBI121g-PgABI为干扰表达载体,采用农杆菌介导法转化马铃薯优良品种甘农薯2号。用PCR、Southern blotting、半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测转基因植株,并对转基因植株的微型薯进行淀粉含量的测定。【结果】通过农杆菌介导法获得10个转基因株系。PCR和Southern杂交结果证明,目的基因已被整合到基因组中,通过半定量RT-PCR分析表明,转基因株系中GBSSI的表达均受到明显抑制,且在6个转基因株系中检测不到mRNA的表达。进一步通过real-time...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
蒋梁材 张启行 蒲晓斌 马孝玲 董云麟 张德发
甘、白杂交是创建聚生角果油菜的主要途径。聚生角果油菜每果柄的果皮面积和籽粒产量较单生角果高１倍左右。甘蓝型聚生角果油菜的染色体数与甘蓝型油菜没有差异，聚生角果性状受３对以上核隐性基因控制。聚生角果果皮对籽粒的贡献较单生角果高７％～２０％。聚生角果油菜对氮、磷的吸收、利用与甘蓝型油菜差异显著。
关键词：
油菜,聚生角果,形态特征,遗传,生理
[期刊] 情报理论与实践
[作者]
孟晓雄 支林 孙彦平
介绍一种科研计算机辅助管理系统ＳＲＣＡＭＳ－Ｉ的系统功能、系统环境、系统结构和分系统功能及实现方法。并对这种初级的ＤＳＳ系统在国家８６３高技术研究计划中的新材料研究领域中应用的可能性进行了探讨。
关键词：
计算机辅助管理,科研管理,新材料
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