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[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 韩静  余舜武  罗利军  
简单、高效的抽提DNA是进行分子生物学研究的基础。选取三种不同海藻纲中的条斑紫菜、条浒苔、钝顶螺旋藻为材料,通过采用改良的CTAB法、LiCl法及试剂盒法抽提基因组DNA并进行比较,以找出适用于各种藻类DNA提取的快速有效方法。结果表明适当提高裂解液与样品比能有效降低材料中多糖与蛋白质、酚类等杂质,提高DNA纯度和得率。经过修改后,三种方法都能有效抽提DNA,其中试剂盒法省时,所得到的DNA纯度最高,但得率较低且成本高。CTAB法与LiCl法也均能得到高质量的DNA,但LiCl法相对而言更简捷有效。此外,抽提前的材料预处理对DNA质量有明显影响。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 宣朴  徐利远  余桂容  尹春蓉  
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 黄建安  黄意欢  罗军武  王坤波  周李华  
为了从富含多酚和多糖等多种次生代谢物质的茶树叶片中分离出高质量的基因组 DNA,对 4种植物 DNA提取方法进行改良后 ,以茶树春梢为材料 ,对提取效果进行了比较 ,并首次采用 CTAB区室法提取茶树基因组DNA.结果表明 ,用该 4种方法提取的 DNA,其 OD2 6 0 / OD2 80 都在 1.8以上 ,相对分子质量均大于 2 1kb,能完全被Eco R 酶切消化 ,也能获得清晰的 PCR扩增图谱 .因此 ,只要操作合理 ,4种方法均能提取出高质量的 DNA.
[期刊] 华北农学报  [作者] 张鲁杰  夏秀英  徐娜  贺建华  徐品三  
为从越橘成熟组织中提取高质量DNA,对CTAB法进行改良,并与常规CTAB法及快速CTAB法的提取效果进行比较。结果表明:改良方法提取获得的DNA产量大、纯度高,DNA产量平均为192μg/g,OD260/OD280在1.75~1.85之间,所得DNA能被限制性内切酶完全消化,以其为模板进行SRAP-PCR扩增,能得到清晰、稳定的条带,证明改良方法适于越橘成熟组织DNA的提取。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 郭晓冬  孙锦  韩丽君  马书智  于庆文  
探讨了海藻提取物对番茄CMV病毒的防治作用,结果表明:海藻提取物对CMV有很好的体外钝化效果和预防CMV侵染的作用,其中以3.0g.L-1的浓度较为合理;番茄接种CMV病毒后施用海藻提取物,病株的SOD、POD酶活性明显升高,并明显降低了病株的病毒含量,降低了病毒对叶绿体的破坏。
[期刊] 海洋水产研究  [作者] 翟毓秀  辛福言  
海带及海藻中含有大量的碘 ,其中碘的测定 ,目前主要以溴水氧化法为主 ,样品前处理是制约测定效率的主要因素。本文以海带为研究对象 ,对测定中样品前处理的方法进行了研究 ,简化了操作步骤 ,缩短检测时间 3h以上 ,大大提高了检测效率。经试验验证 ,测定精密度 (RSD)小于 2 % ,与经典方法比较 ,相对偏差≤1 .5%。方法具有简单、快速、准确、适用的特点
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 胡小平  杨家荣  商文静  杨之为  
 采用CTAB法、SDS法、Parker法及改进的SDS法提取苹果黑星病菌的DNA,经紫外分光光度计测定,改进SDS法提取的DNA得率较其他3种方法高,约为Parker法的2倍。改进SDS法提取的DNAA260nm/A280nm值为1.700~1.900,DNA纯度较高,而其他3种方法提取的DNAA260nm/A280nm值均高于1.900,DNA中所含RNA的量较高。4种方法提取的DNA在230nm波长处的吸收值分别为0.658,0.257,0.926和0.208,说明DNA不同程度地被酚类物质所污染,但改进的SDS法提取的DNA受污染程度最小。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 王玲玲  叶青雷  王学英  石生林  李群  尹迎礼  
为了获取高质量的栎属植物基因组DNA,采用经过改良的SDS法和CTAB法对几种常见栎属植物进行基因组DNA的提取。结果表明:改进的SDS法和CTAB法都较常规的方法好,所提出的DNA较纯净。改进的CTAB法与改进的SDS法比较,改进的CTAB效果较好,所获得的DNA经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测,纯度较高,OD260/OD280为1.75~1.80,运用SSR和RAPD进行分析时,可以获得较好的扩增片段,说明蛋白质、多糖、RNA等去除较干净。
[期刊] 华北农学报  [作者] 容万韬  王金成  刘鹏  林宇  郭京泽  黄国明  孙建华  
为探寻一种高效、稳定、廉价的单条线虫DNA提取方法,以6种植物寄生线虫作为试验材料,比较了4种方法,即直接裂解法、冻融裂解法、切割裂解法、切割冻融裂解法对单条线虫DNA的提取效果。结果表明,对线虫进行管内切割的切割冻融裂解法与切割裂解法高效、稳定,冻融裂解法效果较差,直接裂解法效果最差。对线虫进行管内切割的切割冻融裂解法和切割裂解法可高效、稳定地获得高质量的单条线虫总DNA,满足下一步的PCR扩增需求。
[期刊] 华北农学报  [作者] 刘遵春  包东娥  廖明安  
通过添加Vc对传统的CTAB法进行改进,结果表明:在磨样时,1 g鲜样中添加0.10 g的Vc提取的DNA质量最高;最佳提取材料是嫩芽,其次是新梢和成熟叶片。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 寇姝燕  邹茜  朱振华  刘慰华  苏振喜  赵国珍  蒋聪  袁平荣  
【目的】文章研究了利用磁珠法高效率提取单粒精米DNA的技术方法。【方法】以4份市售大米为材料,利用磁珠吸附法从单粒精米样品中提取基因组DNA并进行PCR扩增,进行提取效率的检测。【结果】提取的20份基因组DNA条带整齐、无弥散、质量高,浓度均在1 ng/μl以上;进一步,以提取液为模板,利用SSR引物RM247和RM282进行PCR扩增,电泳检测后分别得到180和120 bp的目标条带。【结论】利用磁珠法提取的单粒精米DNA可以直接用于PCR反应;结果为特殊目的或稀缺材料的微量DNA提取检测提供技术支持。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 刘昔辉  宋焕忠  张革民  张荣华  方位宽  区惠平  陆建勋  梁强  唐红琴  
利用珠磨器和不锈钢珠,以甘蔗及其近缘属割手密、斑茅和河八王为材料提取基因组DNA,并对得到的DNA进行电泳检测、含量测定和SSR分析。结果表明,该方法能高效快速提取基因组DNA,所提取DNA中蛋白质、多糖类物质等去除较彻底,DNA纯度较高,完整性好;SSR分析条带清晰,多态性较丰富,能扩增出特异性谱带。该方法无需液氮研磨,简单、快速、高效,经济成本低、PCR扩增效果好,适用于大规模的样品检测,可用于甘蔗育种遗传多样性分析、种质鉴定及指纹图谱构建等。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 尤勇  洪菊生  
杉木DNA的简便提取方法*尤勇洪菊生关键词杉木针叶DNA巯基乙醇次生物质杉木(Cunninghamialanceolata(Lamb)Hook.)是我国的特有树种,其分子生物学研究目前在国内外开展的较少,其近缘种的研究也较少。为了开展杉木分子生物学的...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 何培民  刘媛媛  张建伟  吴海龙  于克锋  霍元子  张建恒  
大型海藻光合作用是海域初级生产力的来源之一,是海洋碳循环中关键的一环。大型海藻可通过光合作用有效地吸收海水中溶解的无机碳以及大气中的CO2,将其转化为有机碳并释放O2,光合作用的产物除支持生态系统外,还以有机物的形式埋藏在沉积物中,进而形成碳的汇。大型海藻的养殖和增殖对CO2的减排、减缓海洋酸化、扩增海洋碳汇效应以及缓解气候变化都有重要意义。本文就大型海藻碳汇机理、潜力以及大型海藻碳汇能力的扩增途径进行了综述,为大型海藻碳汇效应研究的发展提供了依据。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 方金  王斌  郭世荣  孙锦  刘涛  束胜  李鹤  杜南山  
以经堆制发酵的海藻工业下脚料海藻渣和草炭、蛭石为原料,按照不同的配比进行混配,通过测定混配基质的理化性状和黄瓜幼苗的生长指标,以期筛选出适宜黄瓜育苗的海藻渣基质配方。研究结果表明:随着海藻渣含量的增加,混配基质的总孔隙度变化不大,但持水孔隙提高,通气孔隙度降低。混配基质的化学性状分析表明,随着海藻渣含量的增加,混配基质中N、K、Ca、Zn含量逐渐增加,pH和EC值呈上升趋势。黄瓜育苗效果表明,黄瓜幼苗的N、P、K和Ca的含量随海藻渣含量的增加而增加,并且海藻渣含量在18%时,黄瓜幼苗生长状况最好。上述结果表明,适量的海藻渣在一定程度上协调了混配基质的通气孔隙和持水孔隙比例,增加了混配基质中的营...
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