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[期刊] 实验技术与管理
[作者]
汪会玲 孟祥高 肖凤萍 许文涵 吴彦东 陈黎艳 孟思璇 鲁馨 刘长林
蛋白质是生命活动的主要执行者，其对生命过程的调控通过种类复杂、时空分辨的蛋白质修饰实现，如蛋白质翻译后修饰等。设计对蛋白质侧链响应性的化学修饰策略可在分子水平上揭示蛋白质调控生命过程的本质，将其发展为疾病诊断和治疗的分子工具。高校分析测试中心的高分辨液相色谱质谱联用仪在检测蛋白质化学修饰方面发挥重要的作用，结合质谱分析软件p Find等可以直观地分析小分子标记试剂与蛋白质修饰的位点、产物及可能的反应机理，为揭示蛋白质的结构、功能与调控机制，蛋白质药物的定点释放和精准治疗，研究蛋白-蛋白及蛋白-核酸相互作用，建立相互作用网络提供研究基础和技术支持。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
宋小飞 施召才 马伟文 银玉容 史伟
研究了加速溶剂萃取(ASE)/液相色谱-质谱联用技术测定血液中邻苯二甲酸单酯。血液样品经过冷冻干燥,利用加速溶剂萃取的方法,最后使用液相色谱-质谱仪分析检测PAEs成分。该方法的回收率为72.1%～136%;检出限为1.47～12.3 ng/L。通过对珠三角地区的成年男性采集的血液分析,发现除MBzP外,血液中其他m-PAEs的均有检出。血液中?8m-PAEs的质量浓度为(26.1±57.3 ng/g)。血液中以MBP、MiBP、MEHP和MnOP为主,分别占血液中m-PAEs浓度的36.7%、23.2%、15.1%和13.2%。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
赵艳 宋军 杨发树 张艳红 张凤枰 刘耀敏 范秀丽
为测定罗非鱼（ＯｒｅＯｃｈｒＯｍｉｓ ｎｉｌＯｔｉｃｕｓ）皮中羟脯氨酸含量，建立了微波辅助蛋白质水解－反相高效液相色谱法。实验采用９－芴基甲氧基羰酰氯（ＦｍＯｃ－ｃｌ）为衍生试剂，应用ＺＯｒＢＡＸ ｓＢ－ｃ１８色谱柱，以０．０５ ｍＯｌ／ｌ的醋酸钠溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱，ＤＡＤ检测器在２６２ ｎｍ处进行检测，外标法定量。结果显示，羟脯氨酸线性关系良好，相关系数为０．９９９ ９，回收率９２．００％～１０３．２５％，相对标准偏差２．５３％～３．６１％，检出限为０．２ｍｇ／ｇ。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
张桂清 杨宇森 许艺敏 罗海凌 姚俊新 林占熺
采用高分辨离子淌度液质联用技术,分析鉴定中药紫苏茎叶中的主要化学成分,为紫苏资源的开发及临床应用提供依据.采用色谱柱为HSS T3 (2.1×100 mm,1.8μm),运用色谱梯度洗脱溶剂A:水(0.1%甲酸)和B:乙腈(0.1%甲酸),操作条件为:流速0.45 mL·min~(-1),柱温30℃,进样体积1μL;通过质谱仪(SYNAPT G2-Si HD英国,沃特世)的高能量质谱碎片信息,参照数据库和文献资料从紫苏茎叶中鉴定10种化合物,包括6种黄酮及其苷类成分(芹菜素6,8-二葡萄糖苷、木樨草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷、山奈酚3-葡萄糖醛酸-7-葡萄糖苷、芹菜素-7-氧-二葡萄糖醛酸、山奈酚-3-O-D-吡喃葡萄糖醛酸糖苷、芹菜素-7-氧-葡萄糖醛酸苷),以及4种有机酸类(咖啡酸、咖啡酸四聚体、迷迭香酸、葵二酸).
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
李兆新 耿霞 刘莹 王慧 王红艳 李平 王志明
采用高压液相色谱-电喷雾离子阱质谱法(HPLC-MS-Ion Trap)对牙鲆中氯霉素残留量进行了研究。用乙酸乙酯作为提取溶剂,采用液-液萃取法提取样品中氯霉素,经浓缩净化处理后直接进样分析。质谱条件为,碎裂电压115V,锥孔电压25V,二级质谱电压0.9V,智能碎裂模式(SPS)。对氯霉素标准液进行了定性分析,得到氯霉素的一级分子离子峰m/z321和m/z323及二级质谱特征离子峰m/z194、m/z257和m/z176。以m/z257和m/z194的峰面积之和代表氯霉素的质谱峰面积,以此峰面积进行定量计算。在0.1～10μg/kg浓度范围内得到线性方程Y=13180.1X+5048.2,相...
关键词：
氯霉素 牙鲆 残留 高压液相色谱 质谱
[期刊] 林业科学研究
[作者]
罗凡 费学谦 汤富彬 李辛雷
1963年美国化学家M.C.Wani和M.E.Wall首次从一种生长在美国西部森林中称为太平洋紫杉(Pacific yew)的树皮和木材中分离到了紫杉醇粗提物。筛选实验发现,紫杉醇粗提物对离体培养的鼠肿瘤细胞有很高的活性。1971年,他们同其他科学家合作,通过X-射线分析确定了该活性成分的
关键词：
高效液相色谱-质谱 紫杉醇 毛榛
[期刊] 华北农学报
[作者]
王俊斌 王海凤 王海英 任健 张少英
以烟草叶片为材料,研究利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)测定植物激素茉莉酸(JA)含量的方法。利用甲醇和乙酸乙酯提取JA,提取物进一步用C18小柱纯化,然后用过量重氮甲烷甲酯化,最后用GC-MS对其进行定量分析。结果表明,JA和内标的标准品均可用该方法进行分析。通过对烟草叶片中不同浓度C18小柱洗脱物进行分析表明,40%和60%甲醇洗脱液中含有JA。GC-MS定量分析结果表明,烟草响应机械伤害后,内源JA含量呈现先升高后降低的规律。说明应用GC-MS可以比较准确地测定烟草内源JA的含量,重复性较好。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
唐波 杜娟 杨力侠 王小海 吴海波 吴勇延 郭泽坤
【目的】构建一种可获得Sumo修饰蛋白的原核表达系统,为Sumo化修饰蛋白的批量制备奠定基础。【方法】用Trizol裂解法提取小鼠畸胎瘤细胞F9的总RNA,反转录成cDNA后PCR扩增获得Sumo1、Ubc9、Sae2和Sae1基因。将上述基因及相应载体酶切、连接后构建出重组质粒pACYC-Ubc9-Sumo1、pCDF-Sae2-Sae1。采用质粒转化-制备阳性克隆感受态细胞-质粒转化的方法获得pACYC-Ubc9-Sumo1和pCDF-Sae2-Sae1共表达的Su-mo化修饰的原核表达系统。以pGEX-GST-Sox2和pGEX-GST-Sox2K247R重组质粒为例,采用Western...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘冬娴
报道了尿液中丁丙诺啡液相色谱-质谱(LC-MS)分析方法.在含丁丙诺啡的尿液中,加入β-葡萄糖醛酸酶溶液,50℃水解2 h,加入内标奋乃静和pH7缓冲溶液,用三氯甲烷提取,提取液于50℃水浴中氮气流下挥干,残余物用流动相溶解后进行LC-MS分析.结果表明:该方法的线性范围为0.2～100.0μg/L,检出限为0.1μg/L;在2,10,50μg/L 3种添加质量浓度时,平均回收率分别为83.21%,93.81%,91.36%,RSD分别为12.29%,6.24%,10.55%.
关键词：
色谱-质谱分析 尿液 丁丙诺啡
[期刊] 中国农业科学
[作者]
饶勇 曾振灵 杨桂香 陈杖榴
【目的】建立牛奶中诺氟沙星、氧氟沙星、麻保沙星、培氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星等10种氟喹诺酮类药物残留检测的液相色谱-大气压化学电离-离子阱质谱确证方法。【方法】牛奶经三氯乙酸和乙腈沉淀蛋白、聚合物反相Strata-X固相萃取柱净化、ODS2分离后,用大气压化学电离-离子阱质谱测定。【结果】对诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星等5种药物进行了定量方法学验证:在1.0～100.0ng·ml-1范围内线性良好(r>0.99);以1.0、10.0、100.0ng·ml-1浓度水平的添加回收率为60.6%～101.0%,日内变异系数≤17.5%,日...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
赖呈纯 赖钟雄 何园 方智振 欧阳建树
试验以龙眼胚性培养物为材料,通过对小型垂直板双向电泳和固相pH梯度凝胶双向电泳比较分析,进行龙眼胚性培养物高分辨率蛋白质双向电泳技术方法的研究.结果表明,采用固相pH梯度凝胶双向电泳可以极大地提高分辨率,相同龙眼胚性培养物的蛋白样品染色后所得的蛋白质谱点数从334左右增加到810左右;由于龙眼胚性培养物的蛋白等电点集中在3.5-7.0之间,采用13 cm的IPG胶条时,以pH 4-7的IPG胶条分离蛋白的效果佳.
[期刊] 水产学报
[作者]
胡秀彩 沈晓静 吕爱军 孙敬锋 YEONG Yiksung 宋亚娇 李莉 孔祥会
为了建立鱼类皮肤蛋白质组双向电泳图谱及质谱鉴定，以鲫为实验动物，采用蛋白双向电泳（２－ＤＥ）结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ／ＴＯＦ－ＭＳ）技术，进行鲫皮肤的蛋白质组学研究。结果表明，当上样量为８００μｇ，采用１８ ｃＭ、ｐ Ｈ３～１０ Ｉｐｇ胶条，等电聚焦８０ ０００ ＶＨ，２－ＤＥ图谱检测为２１４个皮肤蛋白点，匹配率达８８％；对其中３１个蛋白点进行ＭＳ／ＭＳ鉴定为２２种蛋白，包括肌球蛋白、肌动蛋白、角蛋白、锌指蛋白５８５Ｂ、效应蛋白ＲＡＢ１５、卷曲螺旋结构域蛋白１６８、ＮｃＫ１相关蛋白，肌酸激酶、烯醇化酶、丙酮酸脱氢酶、腺苷酸激酶同工酶等；进行蛋白功能聚类（ｇＯ）分．．．
关键词：
鲫 皮肤 蛋白质组 双向电泳 质谱
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
朱宏 邢志恩 戴蕴青 陈敏
建立一种快速、简便鉴定和定量检测乳清蛋白中牛乳铁蛋白(bLf)、转基因人乳铁蛋白(rLf)、α-乳白蛋白(α-La)和β-乳球蛋白(β-Lg)的方法。对样品进行离心脱脂和酸法去除酪蛋白,水洗乳脂和酪蛋白以提高α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白(Lf)的回收率。乳清通过高效液相色谱检测,采用Proteonavi反相C4色谱柱,以体积分数为0.1%的三氟乙酸水溶液和乙腈水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.5mL/min,柱温35℃,检测波长280nm。结果显示:此方法可以有效分离牛α-乳白蛋白、牛β-乳球蛋白、牛乳铁蛋白和转基因人乳铁蛋白。标准品线性关系良好,平均回收率在正常范围内。
[期刊] 水产学报
[作者]
徐继林 严小军 徐年军 沈佳 沈丽君
建立了海产品中的溴酚类海洋风味素的毛细管气相色谱-质谱联用检测法。样品中溴酚类化合物在挥发油测定器中用乙酸乙酯通过循环蒸馏萃取,浓缩后用电子轰击源在特征离子碎片扫描检测模式下进行检测。结果表明,5种溴酚类化合物在SBP-50柱上得到良好的分离,色谱出峰尖锐,没有杂峰干扰。本方法在2.5～40 mg·L~(-1)浓度范围内线性关系良好,最低检测限低于1ng·mL~(-1)。当向25.00g样品中添加溴苯酚各2.0μg时,平均回收率分别达到90.45％(2-BP)、60.49％(4-BP)、85.79％(2,4-DBP)、84.98％(2,6-DBP)、90.80％(2,4,6-TBP),标准相对...
关键词：
海产品 溴酚 风味素 气相色谱质谱联用
[期刊] 林业科学
[作者]
熊福全 韩雁明 李改云 秦特夫 王思群 储富祥
化学修饰可改善木质纤维素和聚合物基质的相容性且使其具有特定功能。点击化学作为化学修饰的一种重要方法，是由２００１年诺贝尔化学奖获得者ＳｈａｒｐｌｅＳＳ首次提出的，主要包括铜催化叠氮－炔基环加成反应（ＣｕａａＣ）、环张力催化叠氮－炔基环加成反应（ＳｐａａＣ）、巯基－烯／炔点击反应（Ｔｈｉｏｌ－ｅｎｅ／Ｙｎｅ）和狄尔斯－阿尔德尔环加成反应（ＤｉｅｌＳ－ａｌＤｅｒ）等反应类型。相比传统接枝修饰方法，点击化学具有反应条件温和、环境污染小、副反应少、分离提纯简单、产量和效率高等优点，在木质纤维素的化学修饰方面已有相关应用。在点击反应方法方面，ＣｕａａＣ反应是一种最普遍的点击反应类型，也是对木质纤维素化学．．．
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点击化学 纤维素 半纤维素 木质素
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