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[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
邱军强 杨先乐 李怡 薛晖 谭洪新 罗国芝
从某养殖场患出血性败血症的高体革(鱼刺)(Scortum bacoo)中分离到一株细菌,人工回染健康高体革(鱼刺)证明该菌株为其致病菌,并具较强毒力,LD50为3.48×105 CFU。该菌株在形态、多项重要的生理生化指标与海豚链球菌(Streptococcus iniae)相同,因此可初步鉴定该菌株即为溶血性海豚链球菌。病理学观察表明该菌株主要引起高体革(鱼刺)的肝肾病变,药敏试验表明该菌株对红霉素、复合磺胺、头孢哌酮等多种抗生素敏感。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王玉娟 王秀华 曲宪成 朱岩松 黄倢
从暴发性死亡的革胡子鲶(Clarias gariepinus)中分离出可疑病原菌株2010111403(简称1403),分别采用细菌全细胞脂肪酸鉴定系统、Biolog微生物自动鉴定系统及细菌16 S rDNA序列分析三种方法对其鉴定,结果表明菌株1403为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。分离菌株对健康革胡子鲶致病性测试表明其对革胡子鲶的半数致死剂量(LD50)为6.32×106菌落形成单位(CFU);实验感染革胡子鲶出现与自然发病相似症状,表明菌株1403是引起革胡子鲶发生暴发性死亡的主要致病病原。药敏试验表明,庆大霉素、四环素、阿奇霉素、氟哌酸、先锋霉素等9种抗生素...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
葛继志 张颖 葛盛芳
鳖出血性败血症病原菌研究初报葛继志张颖葛盛芳（安徽大学生物系，合肥２３００３９）１９９０年以来，安徽省许多养鳖场都暴发出血性败血症。病鳖体表、腹甲严重斑状充血，体表有些部位出现溃疡、疤痕，剖检见肝脏肿大，脾及肠粘膜充血。该病易传染，加之目前缺少有效的...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孟彦 肖汉兵 张林 李罗新 曾令兵
从患典型出血性败血症死亡的施氏鲟(Acipenser schrenckiiBrandt)脾脏组织分离到1株致病性病原菌。依Koch法则建立室内感染模型,一次感染试验和回归感染试验的试验组均可复制出与自然发病情况下相同的症状,根据Reed-Muench法计算病原菌半数致死浓度为1.17×107cfu/mL。对从自然发病和一次感染试验的病鱼体内分离的致病菌进行形态和VITEK全自动细菌生理生化表型鉴定以及16S rRNA基因部分序列进化树分析,结果表明导致施氏鲟出血性败血症的病原菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。药物敏感试验结果显示,该病原菌对庆大霉素、环丙沙星、阿米卡...
[期刊] 水产学报
[作者]
王高学 黄增荣
2003年3月和2004年4月,新疆某养殖场和西安灞桥区某养殖场的白斑狗鱼(Esox luciusLinnaeus)相继爆发“败血症”。从具有明显症状的濒死病鱼体表病灶和内脏组织分离得到12株优势菌株,经人工感染试验表明:其中10株分离菌为致病菌。对分离菌株进行形态、培养特征、生理生化试验鉴定,认为该病原菌为杀鲑气单胞菌史氏亚种(Aeromonas salmonidasubsp.smith)。血清学试验表明各分离菌株具有相同的保护性抗原。组织病理学研究表明:患病狗鱼病灶肌纤维明显肿胀断裂,肌纤维束之间出现间隙;肝胰组织严重坏死,细胞核溶解消失,细胞浆崩解;肾小管绝大部分均已坏死,细胞破裂,胞浆...
关键词：
白斑狗鱼 败血症 杀鲑气单胞菌史氏亚种
[期刊] 水产学报
[作者]
王宏华 侯竹美 张全启 于海洋 王志刚 齐洁 王旭波
为制备病毒性出血性败血症病毒（ＶＨＳＶ）单链抗体（Ｓｉｎｇｌｅ ｃＨａｉｎ Ｖａｒｉａｂｌｅ ｆｒａｇｍｅｎｔ ａｎｔｉｂｏｄｙ，ＳｃｆＶ）并鉴定其生物学功能，本研究提取抗ＶＨＳＶ单抗１ｇ５的杂交瘤细胞株总ｒｎａ并反转录获得ｃｄｎａ模板，通过Ｐｃｒ扩增ＶＨＳＶ抗体的轻链可变区（Ｖｌ）和重链可变区（ＶＨ）编码序列，将其拼接成单链抗体Ｓｃ ｆＶ基因后插入载体Ｐｅｔ２８ａ中，构建原核表达重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达。结果表明，单链抗体主要以可溶性形式表达，分子量约２８ ｋｕ，能特异性识别ＶＨＳＶ病毒的ｇ蛋白并对ＶＨＳＶ病毒具有体外中和活性，其对ＶＨＳＶ病毒的ｇ蛋白亲和力（ｋｄ）达到１．４×１０～（．．．
关键词：
鱼 病毒性出血性败血症病毒 单链抗体
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杜娟 兰文升 刘荭 郑晓聪 陈孝煊
通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获得编码病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus,VHSV)核蛋白基因,将其克隆至原核表达载体pET28a,并在E.coli BL21(DE3)中得到表达,用SDS-PAGE与Western-blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 221bp核蛋白基因片段,诱导表达重组质粒pET28a-N,经SDS-PAGE检测,IPTG终浓度为1mmol/L时,诱导5h蛋白表达量最高,获得的目的蛋白大小与N蛋白的预测分子质量一致,约为48ku。诱导后的菌液进行超声波破碎后,将沉淀和上清...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
朱成科 周晓扬 张其中
从天然患病南方鲇(Silurus meridionalisChen)幼鱼的肝脏中分离获得1株优势菌,命名为SCL1。用该菌株人工感染健康南方鲇幼鱼,发现菌株SCL1的感染致死率高,且患病症状与自然发病症状一致。再从人工感染的患病鱼肝脏中分离病原菌,再次感染健康南方鲇幼鱼,其症状与自然发病症状一致,确认分离菌株为南方鲇"败血症"的致病菌。该菌株形态学、生理生化特征和16S rDNA基因序列显示其为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。药敏试验结果表明,该菌对土霉素、链霉素、氧氟沙星、氟哌酸、卡那霉素和庆大霉素高度敏感,而对青霉素钠、麦迪霉素、罗红霉素、甲氧苄啶、乙酰螺旋霉素不...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
方廖琼 陈昌琼 何成明
中华鳖出血性肠炎病病理组织学研究方廖琼陈昌琼何成明（四川畜牧兽医学院水产系，重庆６３２４６０）本文作者对中华鳖出血性肠炎病部分组织器官作病理分析，以期对鳖出血性肠炎症的防治提供理论依据。１材料与方法实验室水族箱饲养稚鳖，体重５０—７５克，共４只，３雄...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
朱若林 沈娇娇 蒋书东 杨彩桥 张晓华 鲍传和 彭开松
为了对鱼类病毒性出血性败血症病毒(viral hemorrhagic septicemia virus, VHSV)基质蛋白(matrix protein, M)进行功能研究,本实验通过PCR扩增了M基因全长序列,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞后进行IPTG诱导表达,将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价,并运用Westernblot和间接免疫荧光检测抗体特异性。结果显示,M基因全长为606bp,IPTG诱导得到的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,大小约为36 kD,比预计略小。间接ELISA检测抗体效价大于1:102400,Westernblot检测显示该抗体可以特异性识别纯化的融合蛋白和VHSV感染的鲤上皮瘤(epithelioma papulosum cyprini, EPC)细胞中的M蛋白。间接免疫荧光结果显示M蛋白多抗能识别感染VHSV的EPC细胞中的M蛋白,且M蛋白主要定位于细胞质和细胞膜。本研究中M蛋白多克隆抗体的制备将有助于开展M蛋白的功能研究及疾病的免疫学诊断。
[期刊] 水产学报
[作者]
马健民 王琦 马福恒 刘明清
１９９２年９月至１９９４年１１月间，在大连沿海发现的致皱纹盘鲍（Ｈａｌｉｏｔｉｓｄｉｓｃｕｓｈａｎｎａｉ）脓毒败血症的一株病原菌，对皱纹盘鲍人工感染有很高的死亡率，并且与自然发病有相同的症状。其特征为：革兰氏染色阴性，短杆状，极生单鞭毛，无芽孢，氧化酶和过氧化氢酶均为阳性，发酵葡萄糖产酸不产气，０／１２９１０μｇ敏感，０％和８％ＮａＣｌ胨水中不能生长，不利用葡萄糖酸盐和蔗糖等，定名为坎氏弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｃａｍｐｂｅｌｌｉｉ）。
关键词：
皱纹盘鲍,坎氏弧菌,脓毒败血症
[期刊] 水产学报
[作者]
祝璟琳 邹芝英 李大宇 肖炜 韩珏 杨弘
为了解尼罗罗非鱼感染无乳链球菌后各组织的病理变化,运用革兰氏染色和电镜负染技术对一株从自然发病的尼罗罗非鱼上分离的无乳链球菌进行形态观察,采用组织切片和超薄切片电镜技术对患病尼罗罗非鱼的肝脏、脾脏、肾脏、脑、心肌、骨骼肌、肠、鳃等8种组织进行病理学研究,探讨该病的致病机理。结果显示,革兰氏染色呈阳性,负染后透射电镜观察多数细菌呈链状排列;组织病理学变化主要是各内脏器官的广泛充血、水肿、变性和炎性细胞浸润,严重的细胞坏死;超微病理显示,大量球菌侵染脾脏等内脏组织,破坏细胞结构和各种细胞器;细胞界限模糊,细胞核畸形,线粒体肿大,嵴断裂,溶解;粗面内质网肿大、核糖体脱落;细胞质空泡化严重;心肌和骨骼...
关键词：
尼罗罗非鱼 无乳链球菌 病理学 超微结构
[期刊] 中国农业科学
[作者]
谢佳 韩春华 林健 段会娟 杨志远 赵际成 潘洁 刘月焕
【目的】阐明鸭出血性卵巢炎病毒(DHOV-HB株)感染鸭后的病毒血症,为深入了解鸭出血性卵巢炎的发病机理、诊断和疫苗研究提供依据。【方法】24只250日龄北京鸭芯片标记后分别经口感染100倍稀释的DHOV-HB株(3×104ELD50),并设空白对照组15只,同等条件下分别在隔离器内饲养,逐日观察10日,各组每日经翅静脉采集10只鸭血液(尽可能采集同一只鸭血液),用于病毒分离和抗体测定。将攻毒后1—10 d的血清样本经卵黄囊途径接种6日龄SPF鸡胚,每份血清以0.1 m L/胚的剂量接种5枚SPF鸡胚,鸡胚接种后置于37℃条件下继续孵化,每日定时照胚2次,及时收获并统计24—168 h之内死亡...
关键词：
鸭 鸭出血性卵巢炎 坦布苏病毒 病毒血症
[期刊] 中国农业科学
[作者]
于学辉 李键 程安春 黄志宏 罗薇 冉丹丹
【目的】为了建立鸭源出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic E.coli,EHEC)O46分离株的实验病理模型并观察其在雏鸭体内的动态分布及组织病理学和超微病理学变化。【方法】本研究以O46分离株通过口服、肌肉和皮下注射3种途径感染10日龄健康雏鸭,感染剂量均为0.5 mL/只(2×108CFU·mL-1),感染后2、4、6、12、24h剖杀、取样,以后每隔12h剖杀、取样并对剖解变化进行详细观察,在每个安排的时间点平行采集2只雏鸭的心、肝、脾、肺、肾、脑、食道、胸腺、十二指肠、空肠、盲肠、直肠、法氏囊、胰腺和气管等组织制备组织切片和超薄切片,通过H.E染色、醋酸铀、柠檬酸铅染色...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福 李静
从患细菌性败血症的翘嘴鳜病鱼中分离到１１个菌株，通过直接荧光抗体法鉴定、菌株致病力测试和生化特性分析，证实了翘嘴鳜细菌性败血症是由嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）引起的。
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