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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 高雅新  王甲果  张翔凯  李驰  马磊  刘东阳  沈其荣  
[目的]本文通过高能射线照射筛选获得哈茨木霉(Trichoderma harzianum)高产生长素(IAA)突变株M95,并研究其对植物的促生效应。[方法]利用X射线照射获得哈茨木霉突变体库,结合Salkowski比色法和高效液相色谱(HPLC)法筛选出IAA产量最高的突变株M95;利用Biolog FF微孔板法研究IAA高产突变株的碳源利用特性;利用荧光定量PCR法测定M95生长素生物合成相关基因的表达水平,并通过水培和盆栽试验探究M95对黄瓜的促生效果。[结果]从突变体库中筛选到38株优势菌株,其中M95的IAA产量较野生株NJAU 4742(WT)提高了20.51%;Biolog FF微孔板试验结果表明,M95在以D-果糖为唯一碳源的条件下生长速度最快并显著高于WT;荧光定量结果表明,M95中吲哚乙酰胺水解酶基因(iaaH2)和腈水解酶基因(nit2)的转录水平比WT分别提高了32.68和14.58倍。M95处理对黄瓜幼苗的促生作用显著优于WT处理,相对于WT处理,M95处理黄瓜株高、叶面积、地下部鲜重和干重,在水培条件下分别增加了14.79%、16.84%、31.41%和47.96%,在第1季盆栽试验中分别增加了20.99%、13.92%、17.92%和34.02%,在第2季盆栽试验中分别增加了12.23%、15.15%、23.29%和30.02%。在盆栽试验中,M95处理根际细菌、真菌和木霉数量较WT处理分别增加1.91%、5.80%和5.08%。[结论]筛选获得了高产IAA菌株哈茨木霉M95,其对黄瓜幼苗生长具有显著的促进作用;M95中吲哚乙酰胺水解酶和腈水解酶转录水平的提高是其产IAA能力提升的主要原因。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 尹丹韩  高观朋  夏飞  王伟  
【目的】评价生防菌哈茨木霉(Trichoderma harzianum)T4对根围土壤细菌群落的影响,为生防菌田间应用的生态安全提供依据。【方法】结合DGGE技术与T-RFLP方法,综合考察引入生防菌哈茨木霉T4后黄瓜根围土壤细菌群落变化。【结果】在引入生防菌的14—56 d内(黄瓜整个生育期),木霉对根围土壤细菌群落可产生显著影响,并持续一段的时间,随后逐渐减弱。表现为对蓝细菌、β-变形细菌、葡萄球菌、伯克霍尔德菌、沙雷氏菌、酸杆菌和一些不可培养细菌的有效抑制作用,对芽孢杆菌、土壤杆菌、芽单胞菌的明显促进作用。但到70 d时,即收获后2周,检测不到木霉对细菌群落影响。【结论】DGGE和T-R...
[期刊] 华北农学报  [作者] 黄亚丽  蒋细良  田云龙  朱昌雄  
利用PD液体培养基从哈茨木霉T-DNA插入突变体库中筛选出在产孢性状上与野生型菌株明显不同突变子7株,其突变表型主要表现在分生孢子产生数量显著减少和菌丝上有大量厚垣孢子分化。利用TAIL-PCR方法对7株突变体的侧翼序列进行克隆,从5个突变体中获取了5条T-DNA侧翼序列。为木霉菌厚垣孢子产生相关全长基因的克隆和产孢机制的研究奠定了基础。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 霍雪雪  王庆玲  张豪  李哲  郑泽慧  李荣  黄艳华  郭凯  
[目的]本文旨在探究木霉对植物病原菌的拮抗作用和对黄瓜的促生增产效果。[方法]从烟草根际筛选出1株木霉菌Tv-1511,采用形态学观察和分子生物学分析对该菌株进行鉴定;通过平板对峙培养,研究了Tv-1511对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、层生镰刀菌(F.proliferatum)、白绢病菌(Sclerotium rolfsii)、串珠镰孢菌(F.moniliforme)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)的拮抗作用;通过室内发芽试验和盆栽试验,研究不同浓度的Tv-1511孢子液对黄瓜种子萌发活力和幼苗生长的影响;通过田间试验,研究Tv-1511制成的生物有机肥对黄瓜生长和产量的影响。[结果]综合形态学和分子生物学鉴定,确定Tv-1511为绿色木霉(Trichoderma viride);Tv-1511对6种病原真菌有明显的拮抗作用,在对峙培养8 d后抑菌率为59.81%~71.73%,主要通过竞争作用、重寄生作用和抗生作用来有效抑制病原菌的生长;Tv-1511孢子液可以促进黄瓜种子萌发、幼苗生长和生物量增加,促进作用随孢子液浓度的增加呈先升高后下降的趋势,在浓度为10~5 CFU·mL~(-1)时促进作用最强。由Tv-1511的制备的生物有机肥促生增产效果显著,其中木霉代替30%化肥处理组黄瓜的产量是不施肥(CK)的1.59倍,是常规施肥(CF)的1.20倍,均达到了差异显著水平(P<0.05)。[结论]绿色木霉Tv-1511及其制备的生物有机肥有防病、促生和增产等多方面功能,具有良好的开发应用前景。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 杨春林  席亚东  刘波微  张敏  彭化贤  
用哈茨木霉T-h-30对几种蔬菜进行处理,通过对蔬菜不同生育期的农艺性状、经济性状、产量和病害发展情况的考察,研究木霉的促生作用及生物防治效果。结果表明,哈茨木霉T-h-30对蔬菜有显著的促生作用,能增加植株的株高、地茎、叶片数,有效提高蔬菜的品质和产量;对黄瓜枯萎病和黄瓜白粉病也有很好的生物防治效果,并能有效控制芹菜病毒病的发展,且对供试植株安全。
[期刊] 草业科学  [作者] 谢琳淼  常春丽  姚志红  王洪瑞  赵冬雪  张荣沭  敖红  
为研究哈茨木霉(Trichoderma harzianum)对紫羊茅(Festuca rubra)和草地早熟禾(Poa pratensis)生长的影响和抗性的诱导作用,以不同浓度的哈茨木霉提取液对两种草进行种子萌发及盆栽试验。结果表明,哈茨木霉可以提高两种草种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,其中以1×10~4cfu·mL~(-1)哈茨木霉提取液的提高效果最为显著(P<0.05)。此外哈茨木霉处理后两种草幼苗的胚根、胚芽长度显著高于对照(P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王俊威   陈婉东   王巧玲   巫雨蓝   王娟   潘悦  
【目的】鉴定3株蒜头果内生木霉,并探讨其对幼苗生长发育的影响,为蒜头果内生木霉资源的利用及优质苗木培育提供参考。【方法】采用分子系统学和形态学方法,鉴定3株分离自蒜头果茎部和根部的内生木霉。通过接种效应试验,测定根施3种木霉菌液和无菌水(对照)后,蒜头果幼苗的生长性状、生物量、叶绿素含量、抗氧化酶活性、可溶性糖和可溶性蛋白含量以及木霉的根系定殖率,并结合各项指标的隶属函数值对不同处理的蒜头果幼苗品质进行综合评价。【结果】通过构建木霉属菌种系统发育树以及对菌落形态和微观结构的观察,确定3株内生木霉分别为哈茨木霉(Trichodermaharzianum,SF15)、贵州木霉(T. guizhouense,SF548)和绒毛木霉(T.t omentosum,SF434)。接种菌株SF15和SF548的蒜头果幼苗株高增量、叶片增量显著高于对照,3种木霉处理的幼苗茎粗增量均显著高于对照。接种菌株SF15和SF548的蒜头果幼苗主根长和根部吸器数量显著高于对照,而最大吸器直径显著低于对照,且不同处理组的蒜头果幼苗主根长与根部吸器数量呈一定正相关,而与最大吸器直径呈一定负相关。接种菌株SF15和SF548的幼苗地下、地上、全株鲜质量及干质量均显著高于对照,接种菌株SF434的处理组全株鲜质量及地下和全株干质量显著高于对照。3个接菌组蒜头果幼苗叶片叶绿素含量,POD、SOD、CAT活性以及可溶性糖和可溶性蛋白含量均显著高于对照。接种菌株SF15和SF548的蒜头果幼苗根系定殖率分别为64.25%和61.78%,显著高于接种SF434的根系定殖率55.57%。基于各项测定指标的隶属函数值,不同处理组幼苗品质的综合排名为:接种SF15的处理>接种SF548的处理>接种SF434的处理>对照。【结论】3株蒜头果内生木霉对幼苗生长、生物量、叶绿素含量、抗氧化酶活性以及可溶性糖、可溶性蛋白含量的提高有积极促进作用,其中菌株SF15和SF548的促生效果较为显著,为蒜头果潜在的促生菌株。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 陈志敏  吴昊鑫  曾慧芳  张绍升  
采用诱捕法从烟田土壤中分离到1株腐霉(Pythium spp.),鉴定为瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum).接种试验结果表明该菌对烟草、黄瓜、辣椒具有致病性.采用对峙培养试验测定木霉菌(Trichodermaspp.)对瓜果腐霉的抑制作用,筛选出拮抗瓜果腐霉哈茨木霉(T.harzianum)菌株TGY040604,该菌株对瓜果腐霉的生长抑制率达到80%以上,其次生代谢产物对病原菌也具有一定的抑制效果.盆栽试验结果表明,该木霉菌菌株对烟草猝倒病的防效达65%,优于甲霜灵锰锌.
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 孙伟  刘爱英  梁宗琦  
In the 1970's, a Japanese scientist discovered that some strains of Monascus spp. when they grew on rice might produce a certain secondary metabolite, known collectively as Monacolin K,
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 胡仕凤  唐俊  高永东  翟志伟  刘力行  高必达  陈捷  
为探索康氏木霉REMI突变株适宜的产酶条件,通过正交试验对其固态发酵培养基、接种量、料水比、培养时间和培养温度等进行了研究.试验确定最佳培养基组分为稻草粉︰麦麸为9︰1(质量比),料水比1︰1(质量比),硫酸铵1%,Tween-200.1%,通过单因素优化试验,确定最佳培养条件为:接种量5%~7.5%,培养温度30℃,培养时间96h,pH自然;该突变株的FPA酶活和CMC酶活分别达6.097,8.123IU/g.
[期刊] 西南农业学报  [作者] 杜婵娟  付岗  潘连富  叶云峰  黄志君  
为了明确拮抗木霉在土壤中的定殖动态,采用稀释分离法,测试了木霉gz-2菌株随时间推移在土壤中垂直及水平方向的数量变化情况。结果表明,在垂直方向上,26 cm深度以内,gz-2菌株的定殖数量总体呈先上升后下降的趋势,深度越深,其数量达到峰值的时间越短;深度超过28 cm,其数量不再上升;56 d内,gz-2菌株的最大定殖深度为40 cm。在水平方向上,gz-2菌株呈阶梯式扩散模式,其定殖数量总体呈先上升后下降趋势,并在接种后第35 d达到峰值;63 d内,最大定殖半径为24 cm。土壤含水量和p H对gz-2菌株在土壤中定殖数量的影响测试结果表明,当土壤含水量为25%,pH为7.8时,该菌株在土...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王升平  范觉鑫  李丽立  张彬  蒋竹英  
通过传统分离培养法从动物肠道分离得到112株芽胞杆菌,其培养物通过离心过滤后采用氨基酸全自动分析仪对分离得到的100多株芽胞杆菌进行上清氨基酸分析,采用打孔法测定芽胞杆菌对大肠杆菌O8株的抑制效果,通过紫外诱变和SG(2G氨乙基)GLG半胱氨酸筛选对菌株进行选育.结果发现,不同芽胞杆菌菌株产赖氨酸能力相差较大,其中产赖氨酸水平高、抑菌性好的菌株枯草芽胞杆菌PA105,上清赖氨酸水平超过0.3g/L.将枯草芽胞杆菌PA105进行紫外诱变和AEC筛选,获得产赖氨酸高且抗菌的突变菌株枯草芽胞杆菌PL83,上清赖氨酸水平达到0.582g/L,几乎比常规菌株提高了1倍.
[期刊] 中国农业科学  [作者] 亓飞  林姝  宋蒙飞  张孟茹  陈姝延  张乃心  陈劲枫  娄群峰  
【目的】白粉病是危害黄瓜产量、品质的最严重的病害之一,抗白粉病材料的发掘与研究,可以实现从根本上解决病害问题。对获得的‘长春密刺’突变体材料进行分析,旨在筛选出黄瓜抗白粉病突变体材料,丰富育种群体。【方法】对400份‘长春密刺’突变体材料进行苗期接种白粉病菌试验,通过叶片病斑观察结合病情指数分析,初步筛选出抗病材料,将筛选出的抗病材料在大田环境下自然发病进一步观察表型。对初步筛选出的抗病材料进行苗期生理鉴定,测定并分析超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性以及叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素、可溶性蛋白含量等生理指标,通过田间自然发病进一步筛选抗病材料,并测定其蒸腾速率、胞间二氧化碳浓度、气孔导度、净光合速率等光合作用指标及乙烯、茉莉酸、水杨酸激素含量,并通过荧光定量PCR分析叶片中乙烯、茉莉酸、水杨酸、木质素、病程相关蛋白等防御信号途径中相关基因的表达。【结果】与感病材料相比,抗病材料的表面菌斑少,净光合速率、气孔导度都优于对照‘长春密刺’,胞间CO2浓度低于‘长春密刺’。在防御激素方面,抗病材料的乙烯、茉莉酸、水杨酸含量同样优于感病材料,而在成熟期叶片的防御信号途径相关基因表达上,抗病材料的表达高于感病材料。通过苗期接种白粉病菌和田间自然发病综合筛选出了两份抗白粉病突变体材料:Mu-86-2、Mu-58-9。【结论】通过对突变体库的筛选可以获得抗白粉病新材料,这些材料的获得对黄瓜抗白粉病的遗传研究和新品种培育具有重要价值。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 顾少涵  潘俏  李子昂  陈洁  陈劲枫  娄群峰  
[目的]本文旨在筛选耐低温的黄瓜突变体,丰富黄瓜耐低温资源材料。[方法]对1 818份‘长春密刺’黄瓜突变体材料进行13℃低温发芽试验,通过比较相对发芽率和胚根生长情况,初步筛选耐低温材料。进一步对筛选出的幼苗进行低温处理(15℃/7℃,昼/夜12 h/12 h,10 d),测定并分析其冷害指数、形态指标、电导率、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。[结果]根据13℃低温发芽试验,将突变体材料分为耐低温型、中间型和冷敏型。其中,耐低温材料共22份,占总材料的1.21%。苗期4项形态指标表明
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 潘俏  张舒癑  沈迪  吴家琪  陈春莲  陈洁  陈劲枫  娄群峰  
[目的]本文旨在从黄瓜突变体材料中筛选耐盐突变体材料。[方法]对948份‘长春密刺’黄瓜突变体材料进行NaCl溶液催芽试验,通过对比发芽率、发芽势和相对发芽率,结合胚根生长状况进行初步筛选,然后对发芽期筛选出的优质材料进行幼苗期盐胁迫处理(120 mmol·L(-1)NaCl营养液,处理7 d),测定株高、根长、茎粗、地上部鲜质量、地下部鲜质量、茎节数等形态指标,分析超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性以及叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素和可溶性蛋白含量等生理指标。[结果]根据发芽期突变体材料的发芽指
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