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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
宋昕昊 杨丹 季春雷 王佩蓉 张静静 彭麟 高修歌 季辉 江善祥
[目的]旨在探究马度米星铵对克氏原鳌虾肝胰腺药物代谢酶的影响。[方法]将192尾成年雄性克氏原鳌虾（体质量21 g左右）随机分为四组（每组48尾）。除对照组外，各处理组的克氏原螯虾分别采用低剂量（0.7 mg·L~(-1)）、中剂量（3.5 mg·L~(-1)）和高剂量（7 mg·L~(-1)）的马度米星铵连续药浴给药28 d。分别在给药后7、14、21和28 d各处死12尾克氏原鳌虾，取其肝胰腺，制备微粒体后，测定细胞色素P450（CYP_(450)）、细胞色素b5（CYP b5）含量，I相药物代谢酶红霉素-N-脱甲基酶（ERND）活性、氨基比林-N-脱甲基酶（APND）活性和苯胺-4-羟化酶（AH）活性以及II相药物代谢酶谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGTs）、N-乙酰基转移酶（NATs）的活性，并采用实时荧光定量PCR方法测定了CYP_(450)、gst、CYP b5基因的mRNA的表达水平。[结果]在28 d内，7 mg·L~(-1)处理组各时间段CYP_(450)含量与对照组相比显著增高（P < 0.05），CYP b5无显著变化（P > 0.05）；与对照组相比，7 mg·L~(-1)处理组的I相药物代谢酶ERND、APND、AH活性和II相药物代谢酶GSTs、UGTs和NATs活性均显著升高（P < 0.05），3.5 mg·L~(-1)处理组的ERND、UGTs和NATs活性显著升高（P < 0.05），0.7 mg·L~(-1)处理组ERND活性显著升高（P < 0.05）；马度米星铵对肝药酶相关的gst、CYP_(450)基因表达均显著上调（P < 0.05），CYP b5基因除第7 天显著上调（P < 0.05），其余时间无显著变化（P > 0.05）。[结论]马度米星铵可以诱导克氏原鳌虾肝胰腺药物代谢酶，其中ERND和GSTs对马度米星铵较敏感，可以作为早期马度米星铵污染水体的生物标记物。
[期刊] 华中农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张新灿 李小定
以20～35 g克氏原螯虾为研究对象，随机分为4组，每组60尾，在基础饲料中分别掺拌0(C0组)、10(C10组)、20(C20组)、30 mg/kg(C30组)氟苯尼考喂养20 d，再改用基础饲料喂养15 d进行消除试验，测定肝胰腺Ⅰ相药物代谢酶7-乙氧基香豆素-O-脱乙基酶（ECOD）、7-乙氧基异吩恶唑酮-O-脱乙基酶（EROD）、苯胺-4-羟化酶（AH）、红霉素-N-脱甲基酶（ERND）、氨基比林-N-去甲基化酶（AND）和Ⅱ相药物代谢酶谷胱甘肽S-转移酶（GST）、磺基转移酶（SULT）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGT）活力变化，以及细胞色素P450(CYP450)、GST、热休克蛋白HSP70和金属硫蛋白（MT）mRNA表达水平的变化。结果显示，氟苯尼考显著抑制Ⅰ相药物代谢酶活力，但能诱导Ⅱ相药物代谢酶活力升高（P
[期刊] 水产学报
[作者]
陶易凡 强俊 王辉 徐跑 马昕羽 赵文强
研究了高ｐＨ胁迫对克氏原螯虾鳃、肝胰腺中酶活性的变化，以及对鳃、肝胰腺组织结构的影响。在得出９６ Ｈ Ｌ Ｃ＿（５０）的基础上，设置对照（ｐＨ７．６）和实验（ｐＨ１０．２）２个ｐＨ处理组，进行９６ Ｈ高ｐＨ胁迫，于胁迫后０、２、８、２４和９６ Ｈ测定鳃Ｎａ～＋－Ｋ～＋－ａＴｐ酶、乳酸脱氢酶（ＬａＣＴａＴｅ ｄｅＨｙｄｒｏｇｅＮａｓｅ，ＬｄＨ）、延胡索酸还原酶（ｆｕｍａｒａＴｅ ｒｅｄｕＣＴａｓｅ，ｆｒｄ）、肝胰腺超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕＴａｓｅ，ｓｏｄ）、过氧化氢酶（ＣａＴａＬａｓｅ，ＣａＴ）的活性以及丙二醛（ｍａＬｏＮｄｉａＬｄｅＨｙｄｅ，ｍｄａ）的含量，并采集完整的．．．
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
李海兵 宋晓玲 韦嵩 刘君 李赟
分析了克氏原螯虾Procambarus clarkia人工感染白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)后,其血细胞吞噬(Phagocytosis)活性,肝胰腺酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性的变化规律,其目的是为WSSV感染与螯虾的免疫防御反应等研究提供依据。分析结果显示,随着WSSV感染克氏原螯虾时间的延长,血细胞吞噬活性、肝胰腺酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性也随之改变,其中血细胞吞噬活性的变化规律性比较明显,可作为WSSV感染的敏感指标,也可以用作间接指示克氏原螯虾健康状况的指标。而在不同的感染时间,克氏原螯虾肝胰腺ACP...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
陶易凡 强俊 王辉 徐跑 马昕羽 赵文强
采用石蜡切片技术，结合生物酶的测定，以体重（２５．８８±４．４０）ｇ的克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓ ｃｌａｒｋｉｉ）为研究对象，研究了低ＰＨ胁迫对克氏原螯虾鳃和肝胰腺生理代谢与组织结构的影响。在得出９６ Ｈ ｌｃ５０的基础上，将克氏原螯虾暴露于半致死浓度ＰＨ水体中９６ Ｈ，以ＰＨ７．６作为对照，并于胁迫后０ Ｈ、２ Ｈ、８ Ｈ、２４ Ｈ、９６ Ｈ采集鳃和肝胰腺样品，测定鳃部分代谢酶和肝胰腺主要抗氧化指标，并对鳃和肝胰腺组织进行切片观察。实验结果表明，ＰＨ ９６ Ｈ ｌｃ５０为３．６７５。低ＰＨ暴露后，实验组鳃Ｎａ～＋－ｋ～＋－ａＴＰ酶和乳酸脱氢酶（ｌａｃＴａＴｅ ｄｅＨｙｄｒｏｇｅＮａｓ．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
赵伟 王雷 刘梅 蒋克勇 齐灿灿 杨广 王宝杰
为了研究致病性副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)对凡纳滨对虾(Litopanaeus vannamei)肝胰腺抗氧化酶活性及相关基因表达的影响,本研究选取始体重(2.20±0.24)g的健康凡纳滨对虾初270尾,将其随机分为2组,分别以0 CFU/m L和5×107 CFU/m L剂量的致病性副溶血弧菌对凡纳滨对虾进行浸浴攻毒实验。在实验第6小时、12小时、24小时和36小时取肝胰腺,进行抗氧化酶活性及免疫相关基因表达测定。结果显示,感染副溶血弧菌后,实验组对虾肝胰腺中超氧化物歧
[期刊] 水产学报
[作者]
李媛媛 蔡生力 刘红
卵黄磷蛋白作为卵黄蛋白的主要成分,可为甲壳动物胚胎和早期幼体发育提供能量,为研究其来源及合成规律,实验应用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR法检测了凡纳滨对虾和罗氏沼虾性腺不同发育时期卵巢和肝胰腺两种组织中卵黄蛋白原mRNA的表达水平。结果发现,凡纳滨对虾和罗氏沼虾的卵巢和肝胰腺中都有卵黄蛋白原mRNA的表达。随着卵巢的发育,凡纳滨对虾卵巢中卵黄蛋白原mRNA的相对表达量在前5个阶段不断增加,分别为1.1,5.9,10.4,26.9,85.0,恢复期急剧减少,为1.6。肝胰腺中的相对表达量也不断增加,分别为1.3,3.3,7.1,37.3,51.6,恢复期急剧减少,为1.0。罗氏沼虾肝胰腺中...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
於叶兵 吕富 赵卫红 杨文平 王爱民 黄金田
研究分析了克氏原螯虾(Procambarus clarkii)雌性亲本在产卵和抱卵期间肝胰腺和肌肉生化组成的变化及能量变动。结果表明:(1)克氏原螯虾产卵前后肝胰腺与肌肉指数均无显著性变化(P>0.05),而卵巢指数由6.14%降到0.40%(P<0.01),产卵后至卵破膜阶段肝胰腺指数上升了13.29%,显著高于产卵前水平(P<0.05)。(2)克氏原螯虾产卵后肝胰腺和肌肉中3大营养物质均呈现下降趋势,其中肝胰腺中粗脂肪含量与肌肉中粗蛋白含量下降极显著(P<0.01),至卵破膜阶段,肝胰腺中的蛋白质和碳水化合物含量快速恢复且极显著超过产卵前水平(P<0.01)。产卵前后肝胰腺能值下降最大,抱...
关键词：
克氏原螯虾 生理阶段 生化组成 能值
[期刊] 淡水渔业
[作者]
魏华 沙晓姣 陈阿琴 唐建清 夏爱军
为了研究5-HT与DA阳性物质在克氏原螯虾(Procambrus clarkii)不同发育时期的卵巢细胞和肝胰腺细胞中的分布特征,运用免疫组化法对卵巢发育4个不同时期的卵巢与肝胰腺进行观察。结果表明,各期卵巢卵细胞和肝胰腺细胞中均存在5-HT与DA阳性物质。Ⅰ期卵巢5-HT阳性物质分布于卵母细胞胞核,胞质未出现阳性;Ⅱ期～Ⅳ期5-HT阳性物质主要集中在卵母细胞胞质以及胞核。在发育各期的肝胰腺中5-HT的免疫物质均呈阳性。Ⅰ～Ⅳ期卵巢中,DA阳性物质主要分布于卵母细胞的胞核以及肝胰腺细胞,其强度呈递减趋势。结果提示5-HT具有促进卵巢发育作用,而DA则抑制卵巢发育。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
程翔 蔡生力 刘红 李媛媛
中国明对虾卵黄蛋白原mRNA基因在卵巢和肝胰腺中都有表达。采用实时荧光定量PCR方法测定在卵巢不同发育时期卵巢和肝胰腺这两种组织的卵黄蛋白原mRNA的表达水平,提取组织总RNA,设计特异性引物进行荧光定量PCR扩增,对卵巢发育的各个阶段,卵原细胞增殖期、卵黄发生前期、初级卵黄发生期、次级卵黄发生期和消退期的卵黄蛋白原mRNA表达进行相对定量分析。结果表明:在卵巢中,卵黄蛋白原mRNA在前3个阶段随着卵巢的发育,表达量不断增加,分别为0.04、0.23和1.03,次级卵黄发生期开始减少到0.16,消退期卵黄蛋白原mRNA表达量又增加到1.00。而在肝胰腺,前4个阶段随着卵巢发育,表达量逐步增加,...
[期刊] 水产学报
[作者]
孟晓林 田雪 郭倩倩 黄建蓉 卢荣华 梁俊平 李学军 孔祥会 聂国兴
为了解铜在虾夷扇贝鳃和肝胰腺中的累积规律及对抗氧化酶、脂代谢的影响,以不同浓度的铜分别对虾夷扇贝暴露0、1、3、6、10及14 d,检测铜在鳃、肝胰腺组织中的累积量及对抗氧化酶SOD、CAT及GPx活性的影响,并通过高通量测序手段,分析72 h胁迫时,高浓度铜对肝胰腺组织脂代谢关键调控因子的影响。结果表明:0.025 mg/L胁迫组在鳃中的最高累积出现在第14天(347.55μg/g),0.05和0.10 mg/L胁迫组最高累积均出现在第6天(340.72和302.30μg/g),整体随时间呈曲线变化关系,而肝胰腺组织中,高浓度(0.10 mg/L)组累积随时间呈线性关系,最高为第14天(60...
关键词：
虾夷扇贝 铜 抗氧化酶 脂代谢
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨丹 宋昕昊 季春雷 彭麟 高修歌 左儒楠 季辉 江善祥
[目的]研究鲫鱼肝脏细胞色素P450酶系对马度米星铵的响应。[方法]采用半静态染毒法，设置0.112、0.224、0.448 mg·L~(-1)的马度米星铵处理组和助溶剂对照组，在染毒后第7、14、21及28天，测定肝脏中细胞色素P450 1A(CYP1A)、3A(CYP3A)及4T(CYP4T)的mRNA表达水平，同时测定7-乙氧基异吩唑酮-脱乙基酶（EROD）、氨基比林-N-脱甲基酶（APND）、苯胺-4-羟化酶（AH）、红霉素-N-脱甲基酶（ERND）、NADPH-细胞色素C还原酶（NCCR）的活性及细胞色素P450（CYP450）的含量；通过体外肝微粒体孵育法评价马度米星铵对CYP1A活性的影响。[结果]马度米星铵对CYP1A、CYP3A和CYP4T的mRNA表达水平有一定诱导作用；0.448 mg·L~(-1)马度米星铵组CYP450含量在第21天显著低于对照组（P<0.05）；试验期间，马度米星铵组ERND活性均低于对照组；暴露于各染毒组的AH活性呈先升高后降低的趋势；体外肝微粒体孵育体系中，马度米星铵对CYP1A活性的抑制作用小于25%。[结论]马度米星铵对鲫鱼肝微粒体CYP1A活性无影响；马度米星铵对ERND活性的抑制作用可能与CYP3A的转录水平无关；ERND对马度米星铵较为敏感，适合作为马度米星铵污染水体的生物标志物。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
张成锋 闵宽洪 张汉华 朱健 周鑫
对不同发育期的克氏原螯虾的肝胰腺和性腺指数进行了测定,并采用甲醇抽提的方法,利用电化学发光免疫分析仪测定了克氏原螯虾不同发育期的卵巢和肝胰腺中孕酮和雌二醇的含量变化。结果表明,随着卵巢发育,发育初期肝胰腺指数随着发育的进行逐步增加,到初级卵黄发声期到达最大值后随之下降。卵巢中孕酮和雌二醇含量随着卵巢发育的程度而逐步提高,在初级卵黄发生期到达峰值,随后逐渐下降,在肝胰腺中有着相似的趋势,但是峰值出现稍晚,在次级卵黄发生期。
关键词：
克氏原螯虾 卵巢 肝胰腺 孕酮 雌二醇
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张泉 袁燕 朱鸿飞 张鑫宇 孙怀昌
目的为了避免在制备基因治疗或基因免疫的质粒时使用动物源性的核糖核酸酶A(RNaseA)。方法提取牛胰腺总RNA,利用RT-PCR扩增出牛核糖核酸酶AcDNA,RT-PCR产物克隆到pGEM-T载体测序验证后,将此cDNA亚克隆到大肠杆菌分泌型表达载体pEZZ18中。结果SDS-PAGE电泳显示其转化菌经温度诱导后能表达预计的大小为28kD重组蛋白。用渗透法释放出表达产物,将其加入到经碱裂解粗提的质粒DNA中并孵育0.5h,琼脂糖凝胶结果表明表达产物能很好地去除细菌的RNA并且不降解超螺旋质粒DNA。结论在质粒的纯化过程中,重组牛核糖核酸酶可以替代动物源性的RNaseA。
关键词：
RNaseA 克隆 表达 鉴定
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
石宝通 钱照君 王辉 陆伟 牛东红 李家乐
利用RACE技术获得了UB-E2基因c DNA全长,通过RT-PCR技术研究UB-E2基因在不同组织、发育时期的表达量和17α-羟孕酮激素刺激后UB-E2表达量及性腺发育情况。结果表明:该基因序列全长3 943bp,开放阅读框675 bp,编码224个氨基酸,相对分子量23. 93 ku,等电点8. 61,82～219位氨基酸序列为泛素结合酶家族特有的结构域。氨基酸序列比对发现,克氏原螯虾UB-E2基因与节肢动物UB-E2基因有较高的同源性;系统进化分析表明,UB-E2基因与凡纳滨对虾和斑节对虾聚为一支。荧光定量结果显示,UB-E2基因在克氏原螯虾卵巢组织中的表达量显著高于其他组织(P
关键词：
克氏原螯虾 性腺 UB-E2 表达
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