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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
韦英益 胡庭俊 苏子杰 韦现色 张书霞
采用MTT法测定不同浓度马尾藻多糖(Sargassum polysaccharide,SP)对正常猪脾淋巴细胞体外增殖及其感染猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)后培养活性的影响,并用Griess和ELISA法分别检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)、白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。试验结果表明:25～400μg.mL-1的SP能协同伴刀豆球蛋白(ConA)显著促进T淋巴细胞体外增殖,400μg.mL-1的SP显著促进脂多糖(LPS)刺激的B淋巴细胞体外增殖活性。SP提高正常猪脾细胞体外培养不同时间段的NO分泌量,与对照组比较,差异显著(P<0.05);不同浓度SP...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
乔飞鸿 吕英军 张晓裕 王晓斌 鲍恩东
为探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)的抗病毒效果,对离体培养的鸡胚成纤维(CEF)细胞进行水疱口炎病毒(VSV)感染,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测BCG-PSN对CEF细胞活性的影响;用细胞病变法(CPE)检测BCG-PSN对VSV的抑制作用,并在安全浓度范围内筛选BCG-PSN抑制VSV的最佳作用时间和作用剂量。试验结果表明:BCG-PSN能显著抑制VSV在CEF细胞上的生长,但抑制作用并非随着其剂量的增加和作用时间的延长而增强,质量浓度为144.0μg/mL的BCG-PSN在CEF细胞上作用24 h后,产生的抗病毒活性最强;当BCG-PSN质量浓度大于800μg/mL时则对CEF...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王彦彬 崔保安 陈红英 王亚宾 张红英 魏战勇
【目的】为获得重组猪干扰素α。【方法】本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟猪干扰素α基因插入供体质粒pFastBacⅠ多克隆位点,置于pH启动子控制下,昆虫可识别的蜂素信号肽(honeybeemelittinsignalpeptide,HBM)取代猪干扰素α原有信号肽以实现分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10感受态细胞进行同源重组,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。【结果】重组蛋白通过间接免疫荧光、Western-blot证明重组蛋白在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张玲 胡庭俊 陈炳全
马尾藻具有很高的食用和药用价值,分离提取马尾藻多糖(Sargassum polysaccharides,SP),对其理化性质进行分析;研究马尾藻多糖对氧化应激态鸡脾脏淋巴细胞内谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)分泌水平及淋巴细胞体外增殖的影响。结果表明:马尾藻多糖提取率为152.8 g/L;马尾藻多糖浓度为100、200、400 mg/L时,能显著促进体外培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖;H2O2浓度为50μmol/L时,能诱导体外培养的鸡脾脏淋巴细胞处于氧化应激状态。马尾藻多糖浓度为400 mg/L,与细胞共孵育4 h或12 h,能显著增加氧化应激态细胞内GSH含量;共孵育培养8 h,能显著降低氧...
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴旋 白东清 杨广 宁博 张雪涛 孙立卓
选取540尾黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),连续投喂含不同水平灵芝多糖(300,600,900,1 200,1 500mg/kg)的配合饲料8周。而后采用Percoll密度梯度离心等技术,对黄颡鱼头肾巨噬细胞与外周血白细胞进行分离纯化,使用NBT还原法、Griesse试剂显色法与MTT法测定头肾巨噬细胞呼吸爆发活性与外周血白细胞的增殖能力,探讨灵芝多糖对黄颡鱼免疫细胞活性的影响。结果表明,灵芝多糖各水平组均能显著提高黄颡鱼头肾巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和外周血白细胞的增殖能力(P
[期刊] 水产学报
[作者]
孙杰 郭雅娜 戴彩姣 陈孝煊 李莉娟 袁军法
为了体外表达黑头软口鲦上皮瘤细胞（EPC）I型干扰素（IFN-1），本实验通过RT-PCR从EPC中扩增ifn-1基因，构建重组表达质粒pET-32a-IFN-1，并转化到宿主菌Transetta，体外纯化后检测其抗病毒活性。结果显示，ifn-1编码区大小为552 bp，编码184个氨基酸，与草鱼干扰素1（CiIFN1）亲缘关系最近。通过SDS-PAGE分析，重组表达质粒pET-32a-IFN-1在宿主菌中可明显表达约35 ku的融合蛋白条带，且部分呈可溶性表达，进而通过亲和纯化可溶性重组IFN-1（rIFN-1），免疫新西兰大白兔获得效价较高的抗IFN-1多克隆抗体，可用于检测细胞内源性的IFN-1。定量PCR显示rIFN-1与EPC细胞孵育可以诱导抗病毒蛋白Mx1的表达，并抑制鲤春病毒血症病毒（SVCV）引起的细胞病变（CPE）及SVCV的复制，表明rIFN-1具有抗病毒活性。
[期刊] 林业科学
[作者]
翟梅枝 贾彩霞 景炳年 刘朝斌
The antiviral substances of walnut leaves were extracted by different solvents and methods, and its antiviral activities were determined. The results showed that antiviral substance activity is dissimilar based on extracts from walnut leaves with different solvent and methods. Inhibition rate on TMV...
关键词：
核桃 烟草花叶病毒 提取方法
[期刊] 水产学报
[作者]
曹丽萍 丁炜东 张柳 Galina Jeney 徐跑 殷国俊
为了探讨香菇和黄芪多糖对鲤免疫细胞的免疫活性作用,采用Percoll密度离心等技术,对鲤的头肾巨噬细胞和外周血白细胞进行分离纯化,并离体培养,从细胞和分子水平上研究了香菇和黄芪多糖的免疫调节作用。巨噬细胞和外周血白细胞分别体外暴露不同浓度的黄芪多糖和香菇多糖后,采用MTT法测定它们对鲤外周血白细胞增殖的影响;NBT还原法和Griess试剂显色法测定对头肾巨噬细胞的呼吸爆发的影响;实时定量PCR法测定头肾巨噬细胞细胞因子IL-1β诱导表达的影响。结果显示,黄芪和香菇多糖作用头肾巨噬细胞24h后,香菇多糖浓度为1,10,100μg·mL-1时能显著诱导巨噬细胞的氧爆发活性,黄芪多糖则没有显著的诱导...
关键词：
鲤 多糖 巨噬细胞 IL-1β
[期刊] 水产学报
[作者]
冯军厂 蔡忠良 陈永艳 常绪路 刘慧芬 赵燕静 张建新
为研究乳酸乳球菌Q-9胞外多糖(exopolysaccharides from Lactococcus lactis Q-9, EPS-9)对鲤免疫应答、抗氧化活性以及抗嗜水气单胞菌性能的影响，本实验将提取并纯化的EPS-9 (250、500和1 000 μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养，检测头肾细胞的增殖能力和吞噬活性，以及孵育液中一氧化氮(NO)和细胞因子的合成量。将300尾健康鲤[(47.66±0.43) g]随机分为5组，对照组(阴性和阳性)灌喂无菌的磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline, PBS)，处理组分别灌喂不同浓度的EPS-9 (250、500和1 000 μg/mL)，1次/天，连续处理7 d后取血液和肝胰腺组织。随后，阳性组和处理组腹腔注射嗜水气单胞菌，阴性组用无菌PBS处理，感染24 h后取血液和肝胰腺组织。分别检测血清中NO和细胞因子的合成量，及溶菌酶(LZM)和碱性磷酸酶(AKP)的活性；肝胰腺组织中的抗氧化(T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px和MDA)指标。体外结果显示，EPS-9能显著增强鲤头肾细胞的增殖能力和吞噬活性，并提高NO、促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的合成量。体内结果显示，与阴性对照组相比，EPS-9灌喂处理能显著上调血清中NO和促炎细胞因子的合成量，LZM和AKP活性，以及肝胰腺的抗氧化水平。嗜水气单胞菌感染后，NO、促炎细胞因子的合成量及LZM、AKP的活性均显著低于阳性对照组。但无论感染与否，EPS-9处理组血清中抗炎细胞因子的合成量均显著升高。上述结果表明，EPS-9在体内和体外均具备提高鲤的非特异性免疫、抗氧化活性和抗病原菌感染的能力，可作为一种安全有效的添加剂应用于水产养殖中。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
翟梅枝 高芳銮 沈建国 林奇英 谢联辉
对26种植物样品进行了抗病毒(TMV)活性测定。结果表明,不同植物提取物对TMV侵染心叶烟的抑制效果不同,其中莲、榕树、柿子、杨梅、水蜈蚣、叶下珠、羊蹄甲和菊花对TMV的抑制率在90%以上;对高活性抗病毒植物莲叶而言,抗病毒物质的活性因提取溶剂和提取方法的不同而异,水作为溶剂提取时,提取物对TMV的抑制率仅约为70%,而以甲醇和体积分数95%的乙醇作溶剂提取时,提取物对TMV的抑制率约在98%以上;用体积分数95%的乙醇为溶剂,采用索氏提取、回流提取和冷浸提取时,所得提取物对TMV的抑制率均为100%。冷浸提取的优化条件是:以体积分数95%的乙醇为提取溶剂,料液比20∶180(1∶9)提取1...
[期刊] 华北农学报
[作者]
田兆丰 刘霆 张涛涛 李永丹 董丹 刘伟成
通过对一株具有广谱抗病毒活性的放线菌菌株Yn168的形态、培养特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析,对该放线菌进行了菌种鉴定,并研究了不同发酵条件对该菌发酵液抗病毒活性的影响。鉴定结果表明,该菌株为一株小链霉菌(Streptomyces parvus)。不同发酵条件下发酵液抗病毒活性检测表明,当种子培养24 h、种子液接种量为8%、培养温度为28℃、初始pH值为7.0、摇床转速为200 r/min时,发酵液对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的抑制活性最强,枯斑抑制率在86%以上。
关键词：
放线菌 菌种鉴定 抗病毒活性 发酵条件
[期刊] 水产学报
[作者]
李由申 丁广义 张书环 郭慧芝 周江 罗凯 许巧情
为探究中华鲟干扰素e2 (AsIFNe2)的免疫调控作用，本实验通过原核表达获得了重组中华鲟干扰素e2蛋白(rAsIFNe2)，并分析其对抗病毒相关基因的影响及其抗病毒活性。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)结果显示，rAsIFNe2能显著激活中华鲟鳍细胞中干扰素刺激基因(IFN-stimulated genes, ISGs)的表达，如Mx、 PKR、 Viperin和ADAR4。此外，rAsIFNe2还能通过激活IRFs和IFNes基因的表达，从而帮助宿主细胞迅速建立抗病毒状态。在鲤春病毒血症病毒(SVCV)感染鲤上皮细胞(EPC)模型中，rAsIFNe2能够诱导EPC细胞中Mx、PKR和Viperin的表达，并降低EPC细胞中SVCV病毒G、N和P基因的表达，减少病变效应的产生。研究表明，AsIFNe2在宿主抗病毒天然免疫反应中发挥作用。本研究为深入了解中华鲟的干扰素免疫系统以及治疗病毒性疾病提供理论依据。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张雅君 梁忠岩 张丽霞
【目的】研究党参粗多糖的组成及其对小鼠主要免疫细胞活性的影响,为党参的开发利用提供依据。【方法】以东党参为试材,提取分离其粗多糖,利用气相色谱法对其单糖组成进行分析。制备小鼠(ICR雄性)脾脏B淋巴细胞悬液和纯化的巨噬细胞,分别应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)和中性红吞噬试验测定党参粗多糖对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬功能的影响。【结果】党参粗多糖收率为9.7%,单糖组成为葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)、鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、半乳糖醛酸(GalA),其物质的量比为102.7∶7.9∶2.2∶1.8∶1.1∶1.0。党参粗多糖能够刺激小鼠...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张学文 章怀云
干扰素 (IFN)在诱导细胞的抗病毒和抗生长反应及调节免疫反应中起关键作用 .尤其是抗病毒反应是干扰素的基本功能 ,其分子机制正逐步被揭示 .IFN诱导的过程实际上是一个信号传递和级联放大的过程 .其主信号途径通过位于细胞膜上的酪氨酸激酶使酪氨酸磷酸化 ,激活信号传导物和转录激活因子 .然后信号传导物和转录激活因子转移到细胞核内 .它们导致了许多基因产物的表达并由此产生一系列的生理学过程
关键词：
干扰素 信号传递 分子机制
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
樊兵 吴云锋 袁耀锋
以烟草花叶病为防治对象,经过在普通烟上的生物测定,筛选出抑制率在20%以上的含有抗病毒活性物质的植物58种。包括独活、大戟、泽泻、青蒿、艾蒿、刺儿菜、鱼腥草、黄花蒿、泥炭藓、睫毛地衣、悬藓、中华木衣藓、蕨类、红藻、锦葵、秋葵、黄蜀葵、天竺葵、山茶、茶、无花果、法国梧桐树、海桐、紫杉、水杉、黄岑、香石竹、银杏、苦瓜、重楼、紫金牛、射干、虎杖、小藜、紫草、月季、蛇床子、海带、连翘、牛蒡、蹄叶橐吾、板兰根、大黄、贯众、金银花、槟榔、薄荷、蒲公英、柴胡、结缕草、马齿苋、穿心莲、玉簪、菠菜、苦楝树、大豆、连翘、草莓、银杏。其中银杏、无花果、板兰根、大黄对烟草花叶病毒的抑制率在50%以上,无花果最高,达到...
关键词：
植物 抗病毒物质 筛选
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