- 年份
- 2024(5882)
- 2023(8586)
- 2022(7435)
- 2021(6783)
- 2020(6096)
- 2019(13974)
- 2018(13894)
- 2017(26664)
- 2016(15390)
- 2015(17388)
- 2014(17789)
- 2013(17806)
- 2012(17198)
- 2011(15782)
- 2010(15908)
- 2009(14437)
- 2008(14943)
- 2007(13660)
- 2006(11696)
- 2005(10542)
- 学科
- 济(61479)
- 经济(61404)
- 管理(39882)
- 业(39003)
- 方法(30855)
- 企(30742)
- 企业(30742)
- 数学(27178)
- 数学方法(26865)
- 学(18411)
- 农(16898)
- 财(16440)
- 中国(14661)
- 贸(11593)
- 贸易(11590)
- 业经(11510)
- 地方(11497)
- 制(11488)
- 易(11242)
- 农业(11106)
- 务(10573)
- 财务(10554)
- 财务管理(10525)
- 和(10506)
- 环境(10148)
- 企业财务(10011)
- 银(9961)
- 融(9941)
- 金融(9934)
- 银行(9905)
- 机构
- 大学(234849)
- 学院(231300)
- 济(88323)
- 经济(86376)
- 研究(86130)
- 管理(79925)
- 理学(69141)
- 理学院(68191)
- 管理学(66593)
- 管理学院(66177)
- 中国(61567)
- 科学(59591)
- 农(54644)
- 京(50650)
- 所(48095)
- 研究所(44420)
- 农业(44023)
- 业大(43468)
- 财(41005)
- 中心(38403)
- 江(35857)
- 财经(33042)
- 北京(31447)
- 范(31112)
- 师范(30624)
- 院(30152)
- 经(29931)
- 农业大学(28738)
- 州(28336)
- 省(27792)
- 基金
- 项目(157298)
- 科学(120512)
- 基金(113456)
- 研究(104860)
- 家(103505)
- 国家(102734)
- 科学基金(83993)
- 社会(63419)
- 省(61824)
- 基金项目(60196)
- 社会科(59951)
- 社会科学(59928)
- 自然(58237)
- 自然科(56838)
- 自然科学(56810)
- 自然科学基金(55801)
- 划(53681)
- 教育(48760)
- 资助(47294)
- 编号(40421)
- 重点(36897)
- 部(34469)
- 成果(34253)
- 发(33770)
- 计划(33069)
- 创(31699)
- 科研(31599)
- 创新(29889)
- 科技(29749)
- 课题(29320)
- 期刊
- 济(93742)
- 经济(93742)
- 研究(62170)
- 学报(52130)
- 农(49307)
- 科学(43200)
- 中国(42755)
- 大学(36882)
- 学学(35299)
- 农业(33093)
- 财(32732)
- 管理(26342)
- 教育(21770)
- 融(19531)
- 金融(19531)
- 业(18473)
- 技术(17388)
- 财经(16477)
- 经济研究(14922)
- 版(14902)
- 业大(14745)
- 业经(14361)
- 经(14102)
- 问题(12963)
- 农业大学(12151)
- 科技(11381)
- 林业(10940)
- 技术经济(10840)
- 贸(10718)
- 统计(10645)
共检索到335134条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李慧平 王庆竹 汤纬玮 文晓鹏
为探讨马尾松PmMYB169基因耐低磷胁迫功能,在前期克隆PmMYB169全长序列的基础上,构建pBWA(V)HS-PmMYB169-GLosgfp载体,在烟草中对PmMYB169基因进行亚细胞定位;通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,分析转基因植株对低磷胁迫的抗性。结果表明:PmMYB169基因在细胞核中行使功能;遗传转化获得22株转基因植株,对表达量较高的3个株系(Line-2、Line-11、Line-16)进行耐低磷分析显示,低磷胁迫下转基因烟草中磷含量、生物量、Apase活性、POD活性及SOD活性均显著高于野生型,而正常磷及高磷条件下两者并无明显差异,因此,超表达PmMYB169基因显著提高了植株的耐低磷能力。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨占武 杨君 张艳 吴金华 李志坤 王省芬 吴立强 张桂寅 马峙英
【目的】研究棉花ＮＢ－ＬＲＲ家族基因ＧＢＲｖｄ的亚细胞定位及超表达烟草的黄萎病抗性，为解析ＧＢＲｖｄ介导的植物抗黄萎病机制提供依据。【方法】对真核表达载体ｐＪＣｖ５２进行改造，在ＳｐｅⅠ酶切位点插入Ｇｆｐ，使其兼具亚细胞定位的功能，命名为ＧｐＪＣｖ５２。应用Ｇａｔｅｗａｙ技术构建ＧＢＲｖｄ的亚细胞定位和超表达载体，并分别转化农杆菌Ｇｖ３１０１。利用生物信息学和农杆菌介导的烟草瞬时表达技术对ＧＢＲｖｄ分别进行亚细胞定位预测与观察。采用农杆菌介导法转化烟草，并通过组织培养技术获得转基因植株。运用ｐＣＲ对超表达ＧＢＲｖｄ的烟草进行阳性植株筛选，且利用半定量Ｒｔ－ｐＣＲ对阳性转基因植株进行表达检测。制．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
宋毓峰 董连红 靳义荣 史素娟 张良 刘朝科 冯祥国 胡晓明 王倩 刘好宝
【目的】应用生物信息学方法,分离和克隆烟草钾转运体KUP/HAK/KT家族新基因,对其进行亚细胞定位和表达分析,为开展烟草KUP/HAK/KT钾转运体的研究提供借鉴。【方法】通过生物信息学方法,搜索林烟草(Nicotiana sylvestris)和绒毛状烟草(N.tomentosiformis)基因组数据库,预测两种烟草中的钾转运体KUP/HAK/KT家族成员,构建系统进化树。根据所获结果,从林烟草中获得一个新的烟草KUP/HAK/KT家族基因。采用Wolf PSORT对蛋白的亚细胞定位进行预测,并利用农杆菌浸润法注射本生烟(N.benthamiana)叶片后激光共聚焦显微镜下观察,依据融合...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
常欣 庞磊 李叶云 魏艳丽 江昌俊
【目的】通过转基因烟草验证茶树CsCBF1基因抗寒性功能,为发掘、筛选茶树重要功能基因提供理论依据。【方法】利用根癌农杆菌介导法将构建的表达载体pBI121-CsCBF1导入烟草,通过PCR、RT-PCR和GUS活性染色鉴定外源CsCBF1基因是否导入并整合到烟草基因组上转录表达。然后将转pBI121-CsCBF1型、转pBI121型和野生型烟草分别置于25,4和0℃下处理48h后,检测其膜质通透性、丙二醛(MDA)含量和叶绿素荧光参数Fv/Fm,并将0℃处理3d的转pBI121-CsCBF1型和野生型烟草置于25℃下培养1周后观测恢复表型和统计死亡率。【结果】成功构建表达载体pBI121-C...
关键词：
茶树 烟草 CsCBF1基因 抗寒性
[期刊] 草业科学
[作者]
姜红岩 张蕊 滕珂 檀鹏辉 刘凌云 尹淑霞
NAC(NAM, ATAF1/2, CUC2)是植物所特有的最大的转录因子家族之一,在调控植物生长发育、响应非生物胁迫等方面发挥着重要作用。本研究利用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)从日本结缕草(Zoysia japonica)中克隆获得了ZjNAC2基因(GenBank登录号为MH580281),其编码区序列长1 110 bp,编码369个氨基酸。保守结构域分析显示,ZjNAC2编码蛋白在N端有一个典型的NAM结构域,表明ZjNAC2属于NAC转录因子家族。同时通过染色体步移的方法获得其启动子序列1 574 bp,通过作用元件分析发现该启动子上有ABA、非生物胁迫等多个不同的响应元件。亚细胞定位结果显示,ZjNAC2定位于细胞核。荧光定量分析表明,ZjNAC2在根中的表达量最高,并且在衰老叶片中表达量显著高于幼嫩叶片;此外ZjNAC2的表达受200μmol·L(–1) ET、10μmol·L(–1)MeJA、10μmol·L(–1) ABA和20%PEG4000的抑制,但受300 mmol·L(–1) NaCl处理的诱导。本研究表明ZjNAC2转录因子可能参与多种信号转导途径,这为进一步深入研究ZjNAC2的功能奠定了基础。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
史中惠 王仕稳 殷俐娜 张梅娟 邓西平
【目的】研究超表达OsMGD基因烟草植株在低磷条件下的生长情况,为明确OsMGD基因对植物耐低磷胁迫的影响机理奠定基础。【方法】通过构建表达载体pGWB2-OsMGD和农杆菌介导的转化方法,获得超表达OsMGD基因烟草植株,用磷浓度为5μmol/L的HS营养液对转基因烟草植株进行低磷处理后,研究转基因烟草植株MGD活性、脂质和脂肪酸含量、叶绿素含量、根系鲜质量、根冠比和磷含量的变化情况。【结果】超表达OsMGD基因烟草植株中MGD活性增加了1~3.5倍;在转基因烟草植株中,半乳糖脂(MGDG和DGDG)、磷脂和总脂肪酸含量均显著高于野生型植株,但是转基因烟草植株中的脂肪酸组分与野生型相比无显著...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
许石剑 肖炳光 高玉龙 李永平
以含抗烟草花叶病毒(TMV)基因的烟草Ti245为抗病亲本,以K326为感病亲本,经杂交得到F1,F1自交得到F2群体,分析了Ti245抗TMV的遗传规律,并对抗性基因进行SSR标记定位。结果表明:Ti245对TMV的抗性由1对隐性基因控制;基因定位发现,Ti245抗TMV的位点位于LG9连锁群,标记*Tp217200距目的基因最近,遗传距离为3.3cM。
关键词：
烟草 烟草花叶病毒:遗传分析 基因定位
[期刊] 林业科学
[作者]
尹佟明 李东 陈颖 黄敏仁 王明庥
We reported our preliminary study on mapping of the expressed sequence tag (EST) using single-stranded DNA conformation polymorphism (SSCP) on polymerase chain reaction (PCR) product. Five ESTs primer pairs, developed from nuclear genes including CAD(cinnamyl-alcohol dehydrgenase), CHS(chalcone synt...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李凡 路史展 刘羽鑫 林拥军 吴高兵 周菲
在烟草质体中应用来源于玉米的复合型顺式表达元件驱动来源于Isoptericola variabilis的新型耐草甘膦EPSPS基因AroA_(I.va*)的表达,使其在叶片及非绿色组织中同时高效表达。对获得的同质化质体转化植株进行转录及蛋白水平分子检测,结果表明:AroA_(I.va*)基因在转基因植株叶片及根部组织中均得到有效表达;达到同质化的烟草转基因植株pLSZ3#2和pLSZ3#3的T_0代种子可耐受高于12 mmol/L(2 000 mg/L)的草甘膦处理,在温室中培养的转基因植株可耐受1 800 mg/L剂量的草甘膦喷施处理。野生型与转基因植株的正反交实验证实通过质体转化获得的草甘膦抗性转基因植株具有母性遗传的特点。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王国东 陈朝银 李金晶 普丽梅 关瑞攀 葛锋 刘迪秋
为进一步研究ＪｓＷＲＫＹ１的生物学功能，构建ＪｓＷＲＫＹ１的植物超表达载体并转入烟草中过表达。再生的ＪｓＷＲＫＹ１转基因烟草与野生型烟草在表型上无明显差异。ＪｓＷＲＫＹ１过表达上调了转基因烟草体内几个防卫相关基因ＭｎｓＯＤ、Ｃｕ／Ｚｎ ｓＯＤ、Ｃｎ、ｎＡＤＰＨ ＯｘｉＤＡｓｅ和ＰＲ１的转录水平。与野生型烟草相比，ＪｓＷＲＫＹ１转基因烟草体内的超氧化物歧化酶、过氧化物酶和抗坏血酸过氧化物酶活性在正常生长以及胶孢炭疽菌接种后均显著增强。平板抑菌试验结果显示，ＪｓＷＲＫＹ１转基因烟草叶片总蛋白对病原真菌葡萄座腔菌、串珠状赤霉菌、胶孢炭疽菌和尖孢镰刀菌的菌丝生长具有不同程度的抑制作用。此外，用胶孢炭疽．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
林元震 张志毅 郭海 林善枝 张谦
【目的】研究甜杨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(PsG6PDH)基因超表达对烟草抗寒冻性的影响,为烟草的抗寒冻育种提供理论依据。【方法】构建甜杨PsG6PDH基因的植物表达载体pBGⅠ,采用叶盘转化法转化烟草,对转化烟草植株低温驯化后的形态、生理生化指标进行测定与分析。【结果】PCR检测及Southern杂交结果显示,甜杨PsG6PDH基因已整合到转基因烟草的基因组中。低温试验表明,未经冷驯化的对照烟草较转基因烟草早出现萎蔫,恢复正常生长也较晚;经过冷驯化在接近0℃处理24h的对照烟草叶片基本萎蔫,而转基因烟草仍然正常。在0℃及更低温度胁迫下,转基因烟草的相对电导率一直保持在35%左右,而对照烟草的相...
[期刊] 华北农学报
[作者]
杨会苗 陈段芬
为了确定中国水仙凝集素基因NTL1的抗蚜功能及培育具有抗蚜功能的大花烟草,利用qPCR方法,研究了中国水仙凝集素基因(NTL1)在转基因大花烟草4个株系中的相对表达情况;利用自然感蚜、活体接种和离体接种方法研究了不同转基因株系的抗蚜能力。结果表明,NTL1在不同株系中的相对表达量差异显著,从高到低依次为3,4,1,2;抗蚜虫试验结果显示:转基因烟草具有一定抗蚜性,但不同烟草株系的抗蚜能力有所不同;活体转基因烟草单株与离体烟草叶片的平均蚜虫密度抑制率分别为8.22%76.61%,4.62%65.65%;转基
[期刊] 中国水产科学
[作者]
段亚飞 刘萍 李吉涛 李健 高保全 陈萍
取健康脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)成体,体长(5.81±0.32)cm,体质量(1.18±0.35)g。根据本实验室已构建的脊尾白虾血细胞全长cDNA文库进行EST测序分析,获得脊尾白虾抗细胞凋亡因子DAD1基因的cDNA全长并命名为EcDAD1基因。该序列全长645 bp,包括5′非编码区184 bp,开放阅读框345 bp和3′非编码区116 bp,共编码114个氨基酸,预测分子量为12.85 kD,理论等电点为8.75。同源性分析表明,脊尾白虾抗细胞凋亡因子EcDAD1氨基酸序列与其他物种DAD1有高度同源性,与斑节对虾(Penaeus monodon)的相...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张婷 丁贵杰 文晓鹏
［目的］研究马尾松紫色酸性磷酸酶基因功能及其对低磷胁迫的应答。［方法］采用ＲＡＣＥ法克隆马尾松紫色酸性磷酸酶（ＰＡＰｓ）家族成员Ｐｍ ＰＡＰ１，利用软件和数据库，对基因结构功能进行多重分析预测，检测其接种外生真菌及低磷胁迫下的表达模式。［结果］表明，Ｐｍ ＰＡＰ１基因Ｃ ＤＮＡ全长２ ５２０ ｂＰ，开放阅读框１ ８６９ ｂＰ，编码６２２个氨基酸残基，具紫色酸性磷酸酶保守结构域特征，属于高分子量ＰＡＰｓ。Ｐｍ ＰＡＰ１有信号肽，无跨膜区，推测定位于细胞质基质或细胞器基质中，它与莲（ＮＥｌｕｍｂｏ ＮｕＣｉｆＥＲＡ）、无油樟（ＡｍｂｏＲＥｌｌＡ ｔＲｉＣｈｏＰｏＤＡ）的亲缘关系最近，相似性分别达７．．．
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
蔡琼 丁贵杰 文晓鹏
克隆马尾松Ｐｉｎｕｓ ｍａｓｓｏｎｉａｎａ水通道蛋白（ａＱＰ），并对其生物信息学与干旱胁迫表达模式进行分析。采用逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）以及互补脱氧核糖核酸（Ｃ Ｄｎａ）末端快速扩增（ＲａＣＥ）方法克隆马尾松水通道蛋白基因。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Ｑ ＲＴ－ＰＣＲ）分析其在干旱胁迫下的响应模式。结果克隆到一个马尾松水通道蛋白基因，命名为Ｐｍ ＰｉＰ１（ＧＥｎ Ｂａｎｋ登录号为ｋＦ５８２０３８）。此基因Ｃ Ｄｎａ全长序列为１ ３０１ ＢＰ，包括８６７ ＢＰ的完整开放阅读框，９９ ＢＰ的５′末端非翻译区和３３５ ＢＰ的３′末端非翻译区。编码２８８个氨基酸残基，分子量为３０．８６．．．
关键词：
植物学 马尾松 水通道蛋白 克隆 表达
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
