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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
俞鲁 凌宁 张楠 沈其荣 黄启为
以海南发病香蕉园中的健康香蕉根际土壤为样品,以香蕉枯萎病病原菌Fusarium oxysporm f.sp.cubense(FOC)为指示菌进行香蕉枯萎病拮抗菌的分离筛选和鉴定,初筛得到16株拮抗菌,通过复筛得到1株有较强抑菌活性的拮抗菌株YL-19,其发酵液抑菌圈直径为26.26 mm。通过形态特征观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析将其初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。该菌最适生长温度为37～42℃,最适初始pH值为6～8。对发酵液的抑菌物质稳定性初步研究显示:抑菌物质对胰蛋白酶及紫外线照射不敏感,对强酸、强碱和温度比较敏感。盆栽试验结果表明:用YL-19二次发酵的...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
韦锡昌 林蓝慧 蒙姣荣 李界秋 王忠文
【目的】从香蕉根际土壤等材料中分离筛选获得对香蕉枯萎病菌有抑制作用的拮抗菌，为香蕉枯萎病生物防治提供理论基础及菌株资源。【方法】采用稀释平板分离法，从香蕉枯萎病罹病土壤、桑蚕和发酵藻等材料中分离得到微生物，再分别采用平板划线法和单孢分离法对细菌、真菌进行分离和纯化，以香蕉枯萎病菌亚热带4号生理小种（Foc STR4）为靶标菌，采用平板对峙法进行拮抗菌的筛选试验，对抑制效果最好的菌株进行基因测序鉴定、生理生化指标测定；以只接种Foc STR4为对照进行防治香蕉枯萎病的盆栽试验。【结果】从罹病的香蕉根际土壤中筛选得到一株对Foc STR4有明显抑制效果的拮抗细菌TU3-1，抑制率为56.18%，在实验中发现TU3-1对香蕉炭疽病菌等其他13种供试植物病原菌有抑制作用，其中对香蕉炭疽病菌的抑制效果最好，抑制率为75.99%。盆栽试验结果显示，与只接种Foc STR4处理相比，对香蕉枯萎病的防治效果为51.81%。经基因测序、序列比对和生理生化实验观测，TU3-1菌株被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌属（Bacillus velezensis），该菌株为革兰氏阳性菌，厌氧性，可水解淀粉和纤维素，产生氨气和蛋白酶，最适宜培养基为PDA培养基，最适培养温度为30 ℃，最适生长pH为7。【结论】筛选鉴定得到1株对Foc STR4抑制率为56.18%、对香蕉枯萎病防治效果为51.81%的拮抗细菌TU3-1，被鉴定为B. velezensis TU3-1对其他10种植物病原真菌及3种植物病原细菌也有抑制作用，表现出广谱抑菌活性，可进一步开发作为生防菌种质资源。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
甘林 代玉立 刘晓菲 兰成忠 杨秀娟
【目的】发掘防治香蕉枯萎病的高效生防菌资源,为有效控制香蕉枯萎病的发生提供参考。【方法】利用选择性培养基从福建省香蕉产区野生香蕉根际土壤中分离菌株,以香蕉枯萎病菌为靶标,采用平板对峙法、代谢物抑菌试验、抑菌谱和耐毒素能力测定筛选具有拮抗活性的生防细菌;通过形态学观察、生理生化特性测定、16S r DNA和gyr A基因序列分析及构建系统发育树进行生防菌株的鉴定,并采用灌根法测定生防菌株对香蕉枯萎病的防治效果。【结果】利用选择性培养基从野生香蕉根际土壤中分离到195株细菌,以香蕉枯萎病菌为靶标,采用平板对峙法筛选出对香蕉枯萎病菌具有拮抗活性的细菌17株,其中菌株NJ-1和NJ-4对香蕉枯萎病菌的抑菌带宽度分别达12.67和11.67 mm;不同拮抗细菌菌株间的代谢物对香蕉枯萎病菌的抑制率存在差异,其中菌株NJ-1和NJ-4的抑菌效果较好,抑制率分别达89.06%和88.47%。菌株NJ-1和NJ-4对12种植物病原真菌均具有较好的抑制作用,抑菌谱广,且对5%的香蕉枯萎病菌粗毒素具有一定的耐受性。经菌落形态、生理生化特征及分子鉴定,菌株NJ-1和NJ-4分别为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。盆栽试验结果表明,菌株NJ-1和NJ-4对香蕉枯萎病具有较好的防治作用,其防治效果分别为71.69%和70.75%,且与对照药剂450g/L咪鲜胺水乳剂1 000倍液处理相比,菌株NJ-1和NJ-4对促进香蕉苗株高、根长生长有显著优势。【结论】菌株NJ-1和NJ-4对香蕉枯萎病具有高效的生防潜力,而且对香蕉生长具有一定的促进作用。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
韦巧婕 郑新艳 邓开英 王小慧 高雪莲 沈其荣 沈标
从生长健康的黄瓜根际土壤中分离筛选得到1株对黄瓜枯萎病病原菌——尖孢镰刀菌黄瓜专化型具有较强拮抗作用的细菌菌株B,根据其生理生化特性及16S rRNA基因序列分析,初步鉴定其为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。菌株B含有fenB、bam和ituA、ituB、ituC、ituD基因,它们分别是Fengycin、Bacillomycin和Iturin生物合成的相关基因。菌株B还对棉花黄萎病、甜瓜枯萎病、辣椒疫病等病原菌也有较强的拮抗作用。盆栽试验表明:拮抗菌B与有机肥发酵制成的微生物有机肥(BIO)对黄瓜枯萎病有显著的防治作用,发病率降低了66.7%,病情指数下降了67%,防治效果达到80....
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张龄尹 刘珊珊 魏文哲 徐谞 操一凡 刘红军 沈宗专 李荣 沈其荣
[目的]香蕉枯萎病是一种毁灭性土传病害，对香蕉产业的可持续发展造成重大威胁。为实现香蕉枯萎病的有效防控，本研究拟初步构建对香蕉枯萎病具有抑制作用的生物防治菌群。[方法]首先利用平板对峙法从香蕉枯萎病的抑病型土壤中分离筛选对香蕉枯萎病菌（尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种）具有抑制作用的菌株，并通过16S rRNA测序技术对菌株进行鉴定，然后通过室内培养试验测定了菌株的产生长素和生物膜形成能力，最终结合室内共培养试验和盆栽试验探究了构建的菌群对香蕉枯萎病的抑制作用。[结果]分离筛选到的4株拮抗菌均对香蕉枯萎病菌表现出较强的抑制作用，其16S rRNA序列检测结果，分别为芽胞杆菌（Bacillus sp.）、链霉菌（Streptomyces sp.）、芽胞杆菌（Bacillus sp.）、川大肠杆菌（Enterobacter sp.）；室内培养试验发现，所分离筛选到的4株拮抗菌具有较强的产生长素和生物膜形成能力；体外共培养研究结果进一步发现，由4株菌组成的合成菌群表现出最强的抑制效果，相比于对照，抑菌率增加了93.6%；最终盆栽试验证实了该合成菌群能有效在香蕉植株根际定殖，并显著降低了病原菌数量，相比于对照，其病原菌数量降低了92.13%。[结论]本研究成功分离筛选并构建了一个由4株细菌组成的抑病菌群，盆栽条件下其能明显抑制香蕉枯萎病病原菌的增殖，为利用有益微生物防控香蕉枯萎病提供了一定的技术支撑。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张龄尹 刘珊珊 魏文哲 徐谞 操一凡 刘红军 沈宗专 李荣 沈其荣
[目的]为实现香蕉枯萎病的有效防控，本研究拟构建对香蕉枯萎病具有抑制作用的生物防治菌群。[方法]利用平板对峙法从香蕉枯萎病的抑病型土壤中分离筛选对香蕉枯萎病菌(尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种)具有抑制作用的菌株，并通过16S rRNA测序技术对菌株进行鉴定，通过室内培养试验测定菌株产生长素和生物膜形成能力，结合室内共培养试验和盆栽试验探究构建的菌群对香蕉枯萎病的抑制作用。[结果]分离筛选到的4株拮抗菌均对香蕉枯萎病菌表现出较强的抑制作用，16S rRNA序列检测结果表明，其分别为芽胞杆菌(Bacillus sp.)、链霉菌(Streptomyces sp.)、芽胞杆菌(Bacillus sp.)、肠杆菌(Enterobacter sp.);室内培养试验发现，分离筛选的4株拮抗菌具有较强的产生长素和生物膜形成能力；体外共培养研究结果进一步发现，由4株菌组成的合成菌群表现出最强的抑制效果，相比于对照，抑菌率增加了93.6%;盆栽试验证实该合成菌群能有效在香蕉植株根际定殖，并显著降低病原菌数量，相比于对照，其病原菌数量降低了92.13%。[结论]成功分离筛选并构建了一个由4株细菌组成的抑病菌群，盆栽条件下其能明显抑制香蕉枯萎病病原菌的增殖，为利用有益微生物防控香蕉枯萎病提供了一定的技术支撑。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
罗文建 杨凡 史宣杰 赵秀云
从黄瓜根际土壤和根、茎中分离出对黄瓜枯萎病病原菌——尖孢镰刀菌黄瓜专化型具有较强拮抗作用的细菌菌株7株,这些细菌在平板上对尖孢镰刀菌的抑菌效果最高可达46%。经济福平抗生素诱导抗性后,这7株菌株共得到具有抗性的菌株4株:GJ-9、NH-1、P_7、XX_2J_7。检测有利福平标记的菌株在黄瓜苗根系和植株内的定殖能力,结果显示菌株在黄瓜苗具有良好的定殖能力,并且能通过根部运输进入茎中,从而显著提高黄瓜苗的PAL、POD和PPO防御酶活性。盆栽试验结果表明:将筛选到的7株拮抗菌的发酵液对黄瓜苗进行处理,其中拮抗菌NH-1的发酵液对黄瓜枯萎病具有显著的防治效果,其处理后的黄瓜苗病情指数为26.00,防治效果达到66.03%。根据其生长形态特征及对其进行gyrb基因序列分析,鉴定其为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis)。
关键词：
黄瓜枯萎病 拮抗菌 生物防效 芽胞杆菌
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
邱炜 黄惠琴 叶建军 鲍时翔
从土壤样品中共分离放线菌398株,用纸片法对其进行抗古巴尖孢镰刀菌4号生理小种活性筛选,结果发现共有8株具有活性,其中分离于海南儋州植物园土壤的菌株DA07408活性最强。经形态与生理生化特征、16S rDNA序列测定及其系统发育分析,将菌株DA07408初步鉴定为橄榄产色链霉菌Streptomyces olivochromogenes。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
漆艳香 张欣 彭军 谢艺贤
【目的】探讨2种菊科植物全株水提液和2株拮抗菌对香蕉枯萎病及土壤微生物的影响,为香蕉枯萎病的防治措施提供参考依据。【方法】采用盆栽试验法测定了向日葵(Helianthus annuus)、油麦菜(Lactuca sativa var.longifoliaf Lam.)根茎叶水提液及洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia,TY)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens,DF)对香蕉枯萎病的防效及土壤中香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.
[期刊] 西南农业学报
[作者]
崔萍 安慧 张楠 李芳慧
应用组织分离法从发病番茄根部分离番茄枯萎病病原菌并进行致病性测定,根据菌体形态特征、ITS序列同源性分析将病原菌鉴定为镰刀菌属尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。探讨了发病及健康番茄根际栽培基质、大田土及山地贫瘠土壤的微生物数量,采用平板对峙培养法初筛得到77个对番茄枯萎病病原菌有拮抗作用的分离物,进一步复筛得到24个拮抗性能较为稳定的分离物,其中来自山地土的真菌A6、A29、A9、A31、A44、A28拮抗作用较强。山地贫瘠土壤尽管微生物总量较少,但是分离获得的拮抗菌数量最多。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
王瑞菊 赵奎华 刘长远 苗则彦 梁春浩 林凤
从土壤中分离并筛选到4个对甜瓜枯萎病菌具有稳定拮抗作用的细菌,经初步鉴定,Y1、Y2、X1、X11均为芽孢杆菌(Bacillussp.)。室内防治试验测定表明,它们对甜瓜枯萎病均有一定的防治效果,其中最好的Y1防治效果可达75.32%。
关键词：
甜瓜枯萎病 生物防治 拮抗菌
[期刊] 华北农学报
[作者]
连彩 郭晓军 朱宝成 王建明 张超 曹晓璐 姚娜
为筛选对兰花枯萎病病原菌尖孢镰刀菌具有拮抗作用的芽孢细菌,从各地采集的土样中分离获得的237株芽孢杆菌进行初筛、复筛,最终从衡水饶阳县棉田的土样中筛选出的芽孢杆菌3A3-15,对病原菌有较强的抑菌活性,且抑菌谱广。结合形态学观察、生理生化试验,根据16S rDNA序列相似性分析,此菌株与Bacillus velezensis标准菌株CR-502的16S rDNA序列相似度达99.92%,因此,鉴定拮抗菌株3A3-15为Bacillus velezensis。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
何欣 黄启为 杨兴明 冉炜 徐阳春 沈标 沈其荣
【目的】通过筛选和鉴定香蕉枯萎病的致病菌株,之后接种不同浓度的病原菌孢子悬液,研究香蕉植株的发病程度,以期为香蕉枯萎病的田间诊断提供科学的理论依据。【方法】采用室内筛选和盆栽试验相结合的方法。【结果】从香蕉枯萎病病株的假茎基部分离筛选纯化获得了一株致病的尖孢镰刀菌菌株。盆栽回接该菌株35d后,有90%香蕉植株发病,香蕉死亡率高达70%,经鉴定确认该菌株为香蕉枯萎病致病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC);本试验条件下,致病菌株的孢子悬液浓度为103CFU/g土时是香蕉枯萎病发病的临界浓度,当致病菌株的孢子悬液浓度不超过105CFU/g土时,香蕉枯萎病的发...
关键词：
香蕉枯萎病 病原菌 孢子浓度 发病程度
[期刊] 华北农学报
[作者]
张双凤 张爱民 赵钢勇 张克宏
从棉花植株根部筛选的108株芽孢杆菌中,通过对棉花黄枯萎主要病原菌大丽轮枝菌拮抗效果的复筛,分离到一株LC-105菌株,其抑菌圈达到20 mm以上;本研究从该菌株的发酵代谢产物中,分离出活性拮抗物质,进一步通过DEAE-Sephadex A-50离子交换层析和Sephacryl-S100凝胶层析对其代谢产物进行了分离纯化,证明该拮抗物质为一种蛋白质,最后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了所分离物质的纯度达到电泳纯。
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