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[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵艺妍 郭红芳 刘卫敏 赵小明 张建珍
【背景】脂质是生物体重要营养素之一，对于昆虫滞育、飞行、胚胎发育和能量调节至关重要。载脂蛋白（apolipophorin,apoLp）是昆虫脂蛋白颗粒的蛋白质部分，主要负责组织之间脂质转运。【目的】以世界性农业害虫飞蝗（Locusta migratoria）为研究对象，通过RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术对其载脂蛋白生物学功能进行分析，探究载脂蛋白在飞蝗卵巢脂质运输中的作用，为害虫防治提供新的分子靶标。【方法】利用RNAi技术，分别对羽化后第1天（1 PAE,post adult eclosion）的成虫2个载脂蛋白基因（LmapoLp-II/I和LmapoLp-III）进行dsRNA注射，以ds GFP为对照，每头注射15μg dsRNA；分别解剖羽化后第4、6、8天的卵巢进行观察；取羽化后第8天的卵巢，以EF1α作为内参基因，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测沉默效率；利用脂质组学技术测定并分析对照和沉默LmapoLp-II/I后飞蝗卵巢脂代谢物差异，采用OPLS-DA模型的差异倍数（FC）、P值和VIP值相结合的方法筛选差异脂质；制备冰冻切片，利用Bodipy染色技术对沉默LmapoLp-II/I后飞蝗卵巢中性脂质的含量和分布进行观察；利用甘油三酯（triglyceride,TG）测定试剂盒，对沉默LmapoLp-II/I后飞蝗卵巢总甘油三酯含量进行测定。【结果】与对照组相比，分别注射ds LmapoLp-II/I和ds LmapoLp-III后，卵巢中靶基因的表达量均可被显著抑制，沉默效率分别为80.84%和92.89%；注射ds LmapoLp-II/I的飞蝗卵巢发育迟缓，而注射ds LmapoLp-III的飞蝗卵巢与对照组相同，均能够正常发育逐渐变大，颜色由白色逐渐变黄。沉默LmapoLp-II/I后，脂质组学分析共检测到1 166种上调代谢物和1 384种下调代谢物，其中20种甘油三酯显著下调；此外，总甘油三酯测定及Bodipy染色结果显示，卵巢总甘油三酯含量和中性脂质含量均较对照组显著降低。【结论】飞蝗LmapoLp-II/I是影响卵巢发育的主要载脂蛋白基因，其参与卵巢脂质的积累和运输。研究结果可为基于脂质运输基因为靶标的害虫防治提供理论依据。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
颜世伟 庄平 张涛 马境 章龙珍
利用微创手术检查的方法对人工养殖西伯利亚鲟的卵巢发育期进行鉴别,根据卵巢发育期将西伯利亚鲟分为Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ期和Ⅵ期共5个实验组。对5个实验组血清脂蛋白脂酶(LPL)活性及血脂含量进行测定,并对其之间的关系进行分析。结果表明:随着卵巢发育,血清LPL活性、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)、甘油三酯(TG)呈"先上升,后下降"的趋势,其中LPL在Ⅴ期达到最高值,VLDL-C、TG均在Ⅳ期达到最高值;总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)随卵巢发育表现为上升趋势。血清TG与LPL呈正相关关系。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
段青源 麦康森 申屠基康 高前欣 杨家峰
以鱼粉和豆粕为蛋白源,鱼油和大豆油为脂肪源,配制蛋白质水平分别为35%、40%、45%和脂肪水平分别为7%、9%、11%的二因子三水平的实验饲料,并以鲜杂鱼饲料为对照,对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)(体质量36.5~42.9 g)进行为期20周的养殖实验,研究三疣梭子蟹对蛋白质、脂肪的需要量,以及对卵巢色素沉积的影响。养殖实验采用海区串笼吊养方式,每个吊笼放养1只雌蟹。实验共10个处理,每个处理18个蟹,3个重复。结果表明,不同蛋白质、脂肪水平饲料对三疣梭子蟹增重率(269.24%~404.90%)、饲料系数(2.01~2.55)、蛋白质效率(1.02%~1....
[期刊] 水产学报
[作者]
居建 朱珠 杨辉 魏文志 张莹莹
双酚A（BPA）是一种具有雌激素效应的塑化剂，对雄性生殖影响显著，载脂蛋白E（ApoE）对精巢中甘油三酯和胆固醇等脂质的运输过程有重要作用。本研究探讨BPA对精巢ApoE基因的影响及调控机制，以期找到BPA所引起的雄性生殖问题与脂代谢之间的潜在联系。将稀有鮈鲫暴露于BPA（15 μg/L）1、3和5周，通过实时荧光定量（qPCR）、免疫印迹（WB）及免疫荧光（IF）检测BPA对ApoE基因表达和分布的影响，通过染色质免疫共沉淀（ChIP）和DNA甲基化检测探究BPA对ApoE的调控机制。结果显示，qPCR、WB及IF结果显示BPA可以显著影响精巢ApoE基因的表达和分布。ChIP结果表明ApoE的启动子区存在一个雌激素相关受体γ（Esrrg）阳性作用位点，ApoE mRNA的表达变化与Esrrg的募集变化一致。DNA甲基化检测结果显示ApoE的启动子区处于未甲基化状态，BPA处理对其无显著影响。研究表明，BPA可以通过调控稀有鮈鲫精巢ApoE基因启动子区域的Esrrg的募集直接干扰ApoE基因表达，BPA可能通过影响稀有鮈鲫精巢脂质转运影响其生殖功能。本研究结果将为后续从脂质代谢角度探究环境内分泌干扰物对雄性生殖的影响提供参考。
[期刊] 水产学报
[作者]
丁立云 付辉云 侯迎梅 霍雅雯 孙蓬 金敏 周歧存
为探讨饲料磷脂对已交配和未交配雌性三疣梭子蟹卵巢发育、组织学结构和卵黄蛋白原基因表达的影响,本研究采用2×2双因子随机区组设计(日粮类型:0%和4%大豆卵磷脂;三疣梭子蟹交配处理:已交配和未交配),共4个处理组,以大豆卵磷脂0%和4%两种人工配合饲料分别投喂交配和未交配两组三疣梭子蟹雌蟹,进行了为期12周的饲养实验。结果显示,无论三疣梭子蟹是否交配,饲料中添加4%大豆卵磷脂可显著增加三疣梭子蟹的卵巢指数,提高血清中卵黄蛋白原、孕酮和雌二醇的浓度,增大卵母细胞直径;同时上调肝胰腺卵黄蛋白原m RNA相对表达
[期刊] 水产学报
[作者]
丁立云 付辉云 侯迎梅 霍雅雯 孙蓬 金敏 周歧存
为探讨饲料磷脂对已交配和未交配雌性三疣梭子蟹卵巢发育、组织学结构和卵黄蛋白原基因表达的影响,本研究采用2×2双因子随机区组设计(日粮类型:0%和4%大豆卵磷脂;三疣梭子蟹交配处理:已交配和未交配),共4个处理组,以大豆卵磷脂0%和4%两种人工配合饲料分别投喂交配和未交配两组三疣梭子蟹雌蟹,进行了为期12周的饲养实验。结果显示,无论三疣梭子蟹是否交配,饲料中添加4%大豆卵磷脂可显著增加三疣梭子蟹的卵巢指数,提高血清中卵黄蛋白原、孕酮和雌二醇的浓度,增大卵母细胞直径;同时上调肝胰腺卵黄蛋白原m RNA相对表达
[期刊] 水产学报
[作者]
成永旭 堵南山 赖伟
本文报道中华绒螯蟹卵巢快速发育期内 (9月初至 12月初 )脂类积累及对抱卵的影响。结果表明 :在这一时期 ,卵巢重量和脂肪含量都迅速增加 ,增加的脂肪中 ,中性脂 (NL)主要是甘油三酯和胆固醇 ,磷脂 (PL)主要是卵磷脂和脑磷脂 ,且NL或PL在总脂的比值比较稳定 ;无论是NL还是PL , 3 系列的多不饱和脂肪酸 (主要是C2 0∶5和C2 2∶6)的百分组成都显著增加 ,而 6系列的 (主要是C2 0∶4 )百分组成则显著降低 ;不能够抱卵的成熟蟹卵巢脂类组成与正常成熟至抱卵的蟹相比 ,具有较低含量的磷脂 ,脂肪酸组成中 ,长链多不饱和脂肪酸相对百分含量 ,如c2 0∶5和C2 2...
关键词：
中华绒螯蟹 卵巢 发育 脂类积累
[期刊] 中国水产科学
[作者]
齐茜 曲秋芝 张颖 索力 孙大江
采用ELISA方法、分光光度计法和组织学方法,系统研究了不同年龄小体鲟(Acipenser ruthenus)血清卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vg)、血清钙离子(Calcium,Ca2+)含量与卵巢发育变化的关系。结果表明:血清Vg浓度、Ca2+浓度与卵巢的发育时期相关;在卵黄沉积期内,血清中Vg浓度与Ca2+浓度呈线性正相关(R2=0.9264);卵黄生成前期和沉积初期,血清中Vg浓度和Ca2+含量较低;卵黄沉积期内,卵母细胞由沉积初期的0.56mm增大到卵黄沉积末期的2.01mm,血清Vg质量浓度由110.65μg/mL上升到242.22μg/mL,血清Ca2+浓度由2.34mo...
[期刊] 水产学报
[作者]
成永旭 王宗凯 堵南山 赖伟
在中华绒螯蟹卵巢快速发育阶段(9-12月初),经三个月饥饿后,卵巢指数从平均3.23增加到8.19,卵巢总脂含量略有增加,绝对脂肪含量每只蟹从开始的191 mg增加到513 mg。但饥饿后的卵巢与正常的成熟卵巢指数及脂肪含量相比,显著降低,这说明饥饿较大影响了卵巢的正常发育和成熟;肝胰腺指数从5.85~7.48降为0.75~4.13,其绝对含量也显著降低,每只蟹平均降低1270 mg,大大高于卵巢在饥饿时增加积累的脂肪,说明肝胰腺的脂肪除了转运到发育的卵巢中去以外,大部分脂肪应作为能量被消耗。饥饿期间卵巢对来源于肝胰腺长链多不饱和脂肪酸,尤其C20:5和C20:4优先选择利用,暗示这些脂肪酸是...
关键词：
中华绒螯蟹 饥饿 卵巢 肝胰腺 脂类
[期刊] 水产学报
[作者]
王桂香 李慷 刘如聪 姜之信 巴旭冰 宋宗诚 刘利平
星康吉鳗（Conger myriaster）是我国东海等近海常见鱼类，但随着过度捕捞和海洋环境的污染，星康吉鳗野生资源面临枯竭的风险，然而目前对于星康吉鳗繁殖的研究较少，缺乏星康吉鳗卵巢发育过程中的脂质需求的研究，因此本研究对人工诱导星康吉鳗卵巢发育组织脂质代谢进行了分析，以期为星康吉鳗人工繁殖提供理论基础。本研究使用超高效液相色谱四极杆轨道阱质谱（UHPLC/Q-Orbitrap MS）对人工诱导星康吉鳗卵巢发育不同时期肝脏、卵巢、肌肉和血浆进行了脂质组学分析，并测定了肝脏代谢酶活。通过对不同发育阶段星康吉鳗组织脂质成分分析，在肝脏、肌肉、卵巢和血浆中各鉴定出68、27、63和212种脂质标志物，主要包括磷脂酰丝氨酸（PS）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰胆碱（PC）、甘油三酯（TG）和鞘磷脂（SM）等。四种组织中TG、甘油二酯（DG）和神经酰胺（Cer）等脂类物质在发育过程中呈现出不同的变化趋势。肝脏代谢中，脂肪酸合成酶、肝脂酶和脂蛋白脂酶浓度呈现先升高后降低的过程，主要参与了TG、磷脂和脂肪酸的代谢。结果表明，星康吉鳗卵巢发育过程中主要组织的TG、磷脂发生了不同程度的变化，脂质代谢相关酶活性变化也与脂质代谢特征相对应。本实验初步探究了星康吉鳗卵巢发育过程中主要组织脂质调动情况，为星康吉鳗人工繁殖和可持续发展提供基础的参考。
关键词：
星康吉鳗 脂质转化 脂质组学 脂质代谢
[期刊] 淡水渔业
[作者]
全书月 李忠 梁宏伟 罗相忠 王丹 邹桂伟
为了解繁殖期长丰鲢卵巢和肝脏营养状况,明确亲鱼的营养程度,对长丰鲢卵巢发育后期的肝脏和卵巢营养成分及脂肪酸组成进行了对比分析。结果显示:卵巢中的粗脂肪和粗蛋白含量先上升后下降,肝脏中的粗脂肪含量逐渐下降,粗蛋白基本稳定不变。在卵巢和肝脏中共检测到21种脂肪酸,其中含量较高的脂肪酸种类分别是C16∶0、C18∶1、C22∶6和C16∶0、C18∶0、C18∶1;在卵巢和肝脏中单不饱和脂肪酸含量丰富,占总脂肪酸含量分别为38.5%~43.1%和33.0%~40.7%;在高度不饱和脂肪酸中,二十二碳六烯酸(DHA)含量在卵巢和肝脏中都是最高,含量分别为12.9%~15.5%和3.4%~5.7%。研究揭示了长丰鲢卵巢发育后期的肝脏和卵巢在营养物质组成上的特点。
关键词：
长丰鲢 肝脏 卵巢 营养成分 脂肪酸
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
蒋左玉 姚俊杰 熊铧龙 安苗 朱忠胜 宋娇
为了探讨普安银鲫(Carassius auratus gibelio)卵黄囊期脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)和肝脂酶(Hepatic lipase,HL)的表达特点及葡萄糖和维生素C溶液分别浸泡对它们的影响,本研究采用荧光定量PCR技术检测LPL和HL基因在普安银鲫卵黄囊仔鱼发育中的表达情况及m RNA表达水平,并检测了葡萄糖、维生素C对这两种基因m RNA表达量的影响。结果显示,LPL和HL基因在普安银鲫内源营养期、混合营养期和外源营养期均有表达,且LPL和HL m RNA表达量呈上升变化。葡萄糖组LPL和HL m RNA表达量呈上升变化,维生素C组也呈上升变化。...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
邵康 周杰 吴小雪 盛晟 殷宗俊 舒宝屏 罗联辉
为探讨皖南花猪卵巢组织脂联素受体mRNA与雌二醇(E2)合成相关因子mRNA表达的发育性变化及其相关性,用ELISA法测定0、30、45、90和180日龄(n=5)皖南花猪雌性仔猪血液脂联素(Adp)和E2水平,荧光实时定量PCR法检测卵巢组织脂联素受体1、2(adiponectin receptor 1,2;AdpR1,AdpR2)和卵泡刺激素受体(FSHR)、芳香化酶P450(aromatase P450arom)基因CYP19 mRNA的表达水平。试验结果显示:雌性仔猪血液E2质量浓度、卵巢组织AdpR1、AdpR2和FSHR mRNA表达均有显著或极显著的发育性变化(P<0.05或P<...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘立鹤 陈立侨 李康 周永奎 李二超
在基础饲料(CP 40%)中分别添加6%的鱼油、花生油、卵磷脂和猪油,投喂中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis,简称河蟹)28周,以投喂冰鲜小杂鱼的河蟹为对照组,研究投喂不同脂肪源饲料对河蟹卵巢发育和繁殖性能的影响。结果表明,饲料脂肪源对河蟹的卵巢发育和繁殖性能影响显著,鱼油组雌蟹的产卵力[2.787×103cell/g(Wt)]显著高于其他实验组,卵磷脂组[2.216×103cell/g(Wt)]和对照组[2.041×103cell/g(Wt)]次之;而鱼油、卵磷脂和对照组间雌蟹的受精率与孵化率无显著差异,但均显著高于猪油和花生油组;猪油组雌蟹的繁殖性能最差,其产卵力与孵化率分别...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
姚煜 梁旭方 李光照 王琳 刘秀霞
为了研究鳜(Siniperca chuatsi)脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)基因结构与功能关系,首先采用RT-PCR及RACE法,克隆得到鳜肝脏LPL与HL基因cDNA全序列。鳜肝脏LPL基因cDNA全长为2089bp,其中开放阅读框(ORF)为1548bp,编码515个氨基酸。鳜HL基因cDNA全长为1964bp,其中ORF为1494bp,编码497个氨基酸。进化树分析显示,鳜LPL与HL基因与其他脊椎动物的LPL、HL基因各自聚集成簇。对鳜基因组进行PCR获得鳜LPL与HL全基因组DNA序列,与其他脊椎动物基因结构相似,鳜LPL基因由10个外显子和9个内含子组成,全长7392bp;...
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