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[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 胡凤荣  任翠  鲍仁蕾  罗凤霞  
采用简易CTAB法、改良CTAB法、SDS-CTAB法、高盐法和CTAB-硅珠法等5种方法对风信子花蕾、叶片和鳞片基因组DNA进行提取。比较DNA纯度、电泳、得率等指标,结果表明:CTAB-硅珠法没有获得DNA,其他方法均可提出DNA;在纯度方面,简易CTAB法>SDS-CTAB法>改良CTAB法>高盐法;在得率方面,简易CTAB法>改良CTAB法>高盐法>SDS-CTAB法。简易CTAB法提取的DNA纯度较高,OD260/OD280为2.01,OD260/OD230为2.33,浓度为406.8ng.μL-1,得率为175.95ng.μL-1。花蕾、叶片适合风信子基因组DNA的提取。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 李风童  陈秀兰  刘春贵  孙叶  马辉  张甜  包建忠  
以改良Hoagland营养液为根据,配制3种营养液配方,研究大量元素含量对水培风信子4个品种的根系和芽生长以及观赏品质的影响。结果表明:营养液处理会短暂阻碍根系的生长,缓苗期过后促进根系生长加快,其中A配方效果最为明显,芽的生长与根系生长存在一定相关性。营养液处理在控制植株徒长、调整冠幅、增加花葶直径、增大叶面积、提高叶片叶绿素含量等方面都有良好效果,但不同品种对不同营养液配方适应性有差异,综合比较来看,C、B、A、C配方分别是‘杰妮鲍斯’、‘芬达’、‘卡耐基’和‘星空’的最优营养液配方。可见,风信子水培过程中应根据不同的品种对营养液进行适当调整,以此达到最理想的水培效果。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 孙晓梅  李妍  杨宏光  崔文山  王亚斌  
研究以风信子Gipsy queen的鳞片及幼叶为外植体直接诱导不定芽生成,结果表明:Gipsy queen单鳞片、双鳞片的初代最佳诱导培养基为:MS+6-BA5.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,且双鳞片诱导效果好于单鳞片,诱导率达100%,增殖系数达10;幼叶外植体初代最佳诱导培养基为:MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,幼叶作为外植体比鳞片诱导效果好,诱导率达100%,增殖系数达26.27;最佳继代培养基为:MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+KT0.2mg·L-1,增殖系数达2.91;生根诱导最佳培养基为:1/2MS+NAA0.2m...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 许胜  王飞  刘雅莉  
以葡萄风信子(Muscari botryoides Mill)品种"紫葡萄"(Cantat)的鳞茎和叶片为外植体,通过植物组织培养再生系统的建立和抗生素敏感性试验,建立了稳定的葡萄风信子基因转化受体系统。结果表明,葡萄风信子的鳞茎和叶片均可被诱导形成大量的愈伤组织;叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D+0.1mg/L 6-BA,其诱导频率可达100%;鳞茎诱导愈伤组织的最适培养基为MS+3.0 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA,其诱导频率达91.2%;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,生根最适...
[期刊] 海洋渔业  [作者] 马鸿梅  王云祥  秦传新  段丁毓  朱文涛  陈丕茂  
近年来,由于经济生产活动和自然环境变化等原因,大亚湾珊瑚礁资源退化严重。为了保护珊瑚资源,以大亚湾风信子鹿角珊瑚(Acropora hyacinthus)为研究对象,通过室内小生境生态模拟实验,研究了风信子鹿角珊瑚在不同环境因子(温度、盐度、pH、光强)变化下的响应。结果表明:影响风信子鹿角珊瑚状态的主要环境因素为温度、pH、盐度,次要影响因素为光强,当温度为25℃、pH为8.3、盐度为33、光强为6 000 lx时,珊瑚生存状态最佳;29℃以上是珊瑚的致死温度,pH在6.3以下或8.3以上会导致珊瑚白化死亡;当盐度在37以上时珊瑚发生白化死亡,当盐度在29以下时珊瑚触手不再伸出摆动,并伴有粘液分泌覆盖其表面;光照的强弱在5 d内对珊瑚生理状况无显著影响,光强为6 000 lx时正交试验方差最大。研究结果确定了风信子鹿角珊瑚的最适环境因子,可为将来室内培育珊瑚以及野外珊瑚移植提供理论依据。
[期刊] 华北农学报  [作者] 易红梅  张芳  王凤格  赵久然  陈景堂  郭景伦  王璐  
利用快提法对不同取样部位及不同取样时期的样品提取DNA并进行PCR检测,结果表明:PCR扩增效果较好的样品包括种子胚、胚乳、未发芽时的水培初生根和次生根的根尖、发芽1 d的胚芽(幼叶)、发芽1~3 d的胚芽鞘、以及发芽3~5 d的中胚轴;而发芽后的水培根尖、发芽3 d的幼叶、发芽5 d的胚芽鞘、发芽10 d的中胚轴提取的DNA扩增效果较差或没有扩增产物。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 许巧情  董明钢  
以三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)为对象,研究了无水乙醇,95%乙醇,4%多聚甲醛,福尔马林溶液,TE缓冲液5种固定剂不同固定时间对三角帆蚌斧足DNA提取质量及PCR扩增的影响。结果显示95%乙醇固定后提取的三角帆蚌基因组DNA降解少,DNA浓度高,OD260/OD2 8 0在1.8~2.0之间,OD260/OD230在1.5左右,表明95%乙醇固定后三角帆蚌基因组DNA的提取质量最好,再依次为无水乙醇、福尔马林溶液、4%多聚甲醛,DNA提取质量最差的是用TE固定的三角帆蚌。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘妮妮  刘雅莉  娄倩  杨慧萍  
【目的】探索葡萄风信子直接再生花芽体系的建立,为葡萄风信子外植体直接再分化花芽研究提供参考。【方法】以葡萄风信子‘亚美尼亚’花蕾外植体为材料,MS为基础培养基,在均添加0.1mg/L 2,4-D的条件下,分别用不同质量浓度的6-BA(0,0.5,1,2,3,4mg/L)、GA3(0,0.5,1,2,3,4mg/L)和玉米素(0,0.05,0.1,0.5,1,2mg/L)处理,筛选出诱导花芽的最佳激素及最适质量浓度;以MS+6-BA(或玉米素)2mg/L+2,4-D 0.1mg/L研究开花时花瓣切片、花葶、叶片以及叶片诱导的愈伤组织诱导直接再分化花芽的情况。【结果】用MS+2mg/L 6-BA+...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 姜玲  刘雅莉  娄倩  焦淑珍  权永辉  
【目的】克隆葡萄风信子MYB转录因子基因(MaMYB1),并对其进行生物信息学和表达模式的分析。【方法】以开蓝色花的葡萄风信子品种"亚美尼亚"为材料,利用RACE技术得到其MaMYB1基因cDNA全长,对其进行生物信息学分析,利用酵母单杂交方法检测其转录激活活性,并用实时定量PCR方法分析该基因在根、茎、叶及不同发育时期花中的表达特性。【结果】通过RACE-PCR,克隆得到953bp的MaMYB1基因,其开放阅读框长750bp,编码249个氨基酸,推测的蛋白分子质量约为27.7ku,理论等电点为9.3。MaMYB1基因编码的蛋白序列中具有2个典型的MYB结构域R2和R3,且在R3结构域下游含有...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 韩艳利  旷春桃  李湘洲  姜思同  李颖  
采用超声微波辅助水蒸气蒸馏法,微波辅助水蒸气蒸馏法和水蒸气蒸馏法提取山苍子干果中山苍子油。通过单因素实验对提取工艺进行了优化,超声微波协同提取法的提取条件为:微波功率100 W,液料比20︰1,提取时间2 h,得率为3.22%;微波辅助水蒸气蒸馏法的提取条件为:微波功率100 W,液料比20︰1,提取时间2 h,得率为3.20%;在液料比为20︰1,提取时间为4h的条件下,普通水蒸气蒸馏法的得率为3.17%。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王春梅  张秋明  罗齐克  王红  
柑橘植物组织中富含多糖、酚类、单宁、色素等物质,它们的存在严重干扰了柑橘黄龙病PCR检测的准确性。因此有必要筛选出一种能得到纯度高、结构完整的柑橘总DNA(含黄龙病病原DNA),且操作简便的提取方法。本研究对比试验了3种柑橘总DNA提取方法,方法1采用Sandrine等人的提取法;方法2采用CTAB法;方法3采用试剂盒法。实验研究表明,方法2提取柑橘黄龙病病原DNA的PCR检测准确率最高。
[期刊] 华北农学报  [作者] 刘遵春  包东娥  廖明安  
通过添加Vc对传统的CTAB法进行改进,结果表明:在磨样时,1 g鲜样中添加0.10 g的Vc提取的DNA质量最高;最佳提取材料是嫩芽,其次是新梢和成熟叶片。
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 谢一青  李志真  黄儒珠  肖祥希  王志洁  
为从富含次生代谢物的光皮桦Betula luminifera嫩叶中获得高质量DNA,设计了5种先提核再提DNA的CTAB法Ⅰ,CTAB法Ⅱ,CTAB法Ⅲ,CTAB法Ⅳ及改进的SDS法,并以常规CTAB法为对照。用不同的方法就光皮桦基因组DNA进行了提取,采用琼脂糖凝胶电泳检测、A260/A280值测定、限制性内切酶处理和PCR扩增等方法对所提的DNA进行了比较分析。结果表明:实验设计的5种改进方法提取的DNA质量要比常规法的好,但提取的效果差异较大。其中改进的CTAB法Ⅰ是提取光皮桦基因组DNA的最佳方法;PCR扩增结果表明,不同的DNA提取方法会影响PCR带型的变化。图3表1参13
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 康信聪  刘东波  夏志兰  陈芳  
运用CTAB法、CTAB改良法1、CTAB改良法2、氯化苄法、裂解法、改良SDS法、改良尿素法等7种方法提取北冬虫夏草基因组DNA,发现CTAB改良法2(提纯时加入低浓度乙醇)提取的DNA的OD260/OD280都在1.9以上,能获得清晰的PCR扩增图谱,能被HindⅢ酶切消化。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 胥婧  沈秀萍  邵秀玲  胡白石  许志刚  
根据风信子黄腐病菌(Xanthom onas hyacinthi,XHA)的fimA基因,合成了1对特异性引物JAAN/JARA,目的片段为226 bp,用来检测样本中有无目标细菌。用XHA全菌体免疫家兔,获得抗血清,建立了检测风信子黄腐病菌的间接免疫荧光染色检测技术。用上述两种方法对风信子黄腐病菌和人工接种发病样品进行检测。结果表明,这两种方法可以准确、灵敏地检测风信子黄腐病菌及带菌样品,方法简单、快速、实用,可以在口岸检疫中推广使用,以减少风信子黄腐病菌进入中国的风险。
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