靶序列富集多重ＰＣＲ（ｔａＲｇｅｔ ｅｎＲｉＣｈｅｄ ｍｕｌｔｉＰｌｅｘ ＰＣＲ，ｔｅｍ–ＰＣＲ）作为一种新型的分子生物学高通量检测技术，通过靶序列富集、靶序列加标签以及超级引物扩增３个阶段实现对靶标序列的大量扩增。靶序列富集多重ＰＣＲ具有独特的反应过程，克服了常规多重ＰＣＲ扩增条件不兼容、扩增具有偏爱性等缺点，实现了对同一反应体系多种病原的同步检测，为临床病原鉴别诊断、基因分型、耐药基因等领域的研究提供了新思路，具有较大的发展前景。笔者对ｔｅｍ–ＰＣＲ的研究背景、反应原理、技术应用及试剂盒开发等进行综述，旨在为ｔｅｍ–ＰＣＲ的研究和发展提供参考依据，为中国应对公共卫生危机提供新思路。

大量研究表明,资源富集区产业转型困境与这些地区相对落后的科技、人力资本等方面的发展有关。基于此,本文通过一个"发展序"的分析框架进一步系统解释了资源富集区在这些方面的发展相对落后的原因。发展序定义为:政府总是在先重视什么、其次又重视什么的发展问题上做着选择,选择结果依次排列,就构成了发展序。据此理解,本文利用2008年数据,通过省级层面的地区分类比较,结果显示有利于产业转型的一些关键领域的发展之所以在资源富集区表现得相对落后,根本原因还在于其相对较低的生产力发展水平以及脆弱的财政能力。当前,为促进资源富集区的产业转型,应使他们的发展序向更有利于建立接续替代产业的方向变异。为此,在目前的情况下可...

采用生物素—磁珠吸附微卫星富集法,筛选虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)微卫星分子标记,并用同位素法进行二次筛选。结果在筛选的192个菌落中获得136个阳性克隆,经测序分析,获得微卫星序列179个,其中完美型占50.8%,非完美型43.0%,混合型占6.1%。除探针中使用的CA重复外,还得到TC、AG、ACA、CTAT的重复序列。用引物设计软件Primer Premier5.0设计引物85对,挑选其中的40对合成并进行筛选

一、经济发展阶段与产业发展重心 18世纪60年代英国第一次产业革命以来,经济发达国家经过丁几个不同时期,归纳起来有初步工业化阶段,工业化阶段,后工业化等三个阶段。其中工业化阶段又可分为重工业化阶段(或称为重化学工业化阶段)、高度加工化阶段。在所谓后工业化社会中将是信息化和高技术化。发达国家所走过的经济发展道路向我们展示了这样一条规律性的结论:在不同的经济发展阶段,产业结构具有明显不同的特点,产业结构中优先发展的产业也按一定顺序变

历史经验表明,由于人均收入、技术进步和生产力发展水平存在着由低到高、由简单到复杂的演变顺序,因而一个国家在经济发展的不同时期会有不同的产业发展重点,各个国家在大致相同的发展时期会有大致相同的发展重点。我国目前人均国民生产总值300多美元,到2000年可达800—1000美元。在人均收入由这种

【目的】溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌是４种重要的食源性病原弧菌，能够造成人类多种疾病，建立同时检测这４种食源性病原弧菌的检测方法是保障食品安全的基础。本研究旨在建立同时检测溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌的多重富集定量ＰＣＲ（ｍｕｌｔｉＰｌｅｘ ｅｎＲｉＣｈｍｅｎｔ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ，ｍｅ－ｑ ＰＣＲ）方法，并含扩增内标用于指示ＰＣＲ反应的假阴性，创新一种高通量、高灵敏度、具备定量能力的检测方法，为这４种食源性病原弧菌的检测提供新方法。【方法】以细菌１６Ｓ Ｒ Ｒｎａ为扩增内标靶序列设计引物，并针对副溶血弧菌的ＣｏｌｌａｇｅｎａＳｅ、溶藻弧菌的ｇｙＲ Ｂ、霍．．．

文章首先从理论上推导出金融资产价格的高频时间序列出现大幅震荡前后多重分形谱所具有的异象特征,然后随机选取两只股票(民生银行、哈飞股份)各35天的5min高频交易数据对上述特征进行实证分析。结果表明,两只股票在持续大幅波动开始与结束时,其多重分形谱形态及参数的变化与理论上的异象特征相吻合。运用该研究方法可以对金融资产持续大幅波动的开始及结束做出一定预测。

光合细菌作为环保型饲料添加剂 ,具有营养丰富、净化水质、防治鱼病、维持水体生态平衡的作用。采用大棚简易富集培养法 ,可大量培养光合细菌 ,此技术成本低、效益高、操作简单 ,适于在北方淡水养鱼中推广使用。

通过对桂西资源富集区产业集群发展进行SWOT分析,指出了机遇与挑战所在,对产业集群的升级和转型提出了4种战略思考。

【目的】探究从前苏联引进的簇毛麦No.1026(Dv#4)的EST-SSR序列特征及其在染色体的分布,分析它们在不同簇毛麦间及与小麦间的多态性,为其进一步的研究与利用提供依据。【方法】通过Illumina HiSeq测序获得No.1026植株的转录组序列,利用MISA软件分析转录组SSR序列及特征,采用Primer 3设计SSR引物,随机合成238对引物,对小麦中国春与簇毛麦Dv#4和引自英国剑桥的簇毛麦Dv#2的基因组DNA进行扩增,在琼脂糖凝胶上分离评价扩增产物的多态性,并利用一套小麦-簇毛麦异染色体系进行扩增分析。【结果】检测了No.1026总长62.76 Mb的转录组序列,发现10 497个SSR位点,它们分布于8 735条Unigene上。在1—6个核苷酸的重复单元中,单、双、三碱基的重复占95.85%,其中三核苷酸串联重复数量最多,占SSR总数的50.33%,而CCG/CGG基序的重复占三核苷酸串联重复的41.66%;单核苷酸重复是第二大类型,出现频率为27.13%,其中A/T重复占单核苷酸重复的74.58%。二核苷酸重复类型的数量位列第三,占SSR总数的18.39%。在238对EST-SSR引物中,88对在中国春与簇毛麦(包括Dv#2和Dv#4)之间的扩增产物显示多态性;8对只在簇毛麦和单一异染色体系扩增;4对可在簇毛麦和多个异染色体系中特异扩增;但多数可在簇毛麦中清晰扩增的引物不能在任何异染色体系中扩增,推测可能与簇毛麦基因组及染色体导入小麦过程中的变异有关;47对(19.74%)在2份不同来源的簇毛麦Dv#2和Dv#4之间的扩增产物呈现多态性。利用1对EST-SSR引物和1个EST-PCR标记检测48个簇毛麦植株,证明多态性的SSR引物可有效用于检测簇毛麦的异质性。【结论】簇毛麦No.1026(Dv#4)的转录组中存在丰富的SSR序列,其中CCG/CGG、A/T和AG/CT等三核苷酸、单核苷酸和二核苷酸是其最主要的串联重复基序。部分EST-SSR的侧翼保守序列与单一或若干外源染色体特异相关联,据此开发特异的分子标记,可用于跟踪检测小麦背景中特异的簇毛麦染色体或染色体片段。Dv#4与Dv#2间的部分EST-SSR具有多态性,提示2份不同来源簇毛麦的表达序列间存在一定程度的遗传差异,因此,簇毛麦Dv#4值得进一步的发掘研究。

提取了7个药用菟丝子种样品的DNA,采用ITS序列扩增通用引物对其进行PCR扩增,并对PCR产物进行克隆和测序.根据所测得菟丝子ITS全长序列与其常见易混品所在属的代表植物ITS序列比对,设计了一对特异性引物并进行了PCR检测.结果表明,此对引物能将药用菟丝子种子与4种易混品区分开来,可以用于药用菟丝子的真伪鉴定.

随着社会的进步,统计数据由过去的年度数据变为如今的季度、月度和日度数据,有些以实时交易为基础的超高频金融数据达到了按秒为间隔的频率,这些数据被称为季节时间序列。季节时间序列研究已经成为近十年来经济计量学和统计学中的热点,Journal of Econometrics(1993,volume55)就此问题进行了专题讨论。本文按照历史发展顺序对季节性时间序列理论进行了系统地介绍,并对这一领域的前沿热点问题进行了评述和展望。

税收调整产业结构作用的发挥,从根本上说,依赖于以产业发展序列为导向,使税负在产业之间作非均衡、轻重有序的分布。只有税负水平轻重有序(指与产业发展序列相吻合),才能使税收的调节产生正效应,促使不合理的产业结构的转换、重构和优化:如果税负水平轻重无序,就会使税收的调节产生负效应,在一定程度上影响产业政策的贯彻,加剧产业结构的不均衡、不合理的状况。因此,要分析现行税制是否、或在多大程度上体现了国家产

为了探索利用PCR简单扩增高GC含量的长重复序列的方法,经反复摸索后选用LAPCR法即LAPCRTaq酶结合GC缓冲液Ⅱ来扩增奶牛高GC含量的长片段重复序列,成功获得了全长2538bp,GC含量为65.7%的DNA序列,其中ITS1的GC含量高达80%.探索了克隆复杂DNA序列时引物设计的特别规则、反应体系的改进、DNA聚合酶的选用等措施.

【目的】建立一种有效分离T-DNA插入突变体侧翼基因组序列的方法。【方法】分离侧翼的目标基因组序列是利用T-DNA标签法研究植物功能基因组学的一个关键步骤,笔者发展稳定高效的Actail-PCR分离技术。该技术一侧引物来自于T-DNA载体,另一侧引物为一个复性控制引物。复性控制引物在3'端为一个14bp的随机简并引物,在5'端非目标尾部序列接上一个通用引物,中间由5个多聚脱氧次黄嘌呤核苷(poly(dI))连接。【结果】Actail-PCR技术将随机简并引物重新编辑成复性控制引物,在40℃的低严谨条件下,3'端的随机简并引物可以与T-DNA插入突变体的侧翼目标区段随机的结合,扩增得到目标片段,...