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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李达 吴莉英 唐前瑞 邱收 姚觉 周红灿 魏湘萍 于晓英
为获得非洲菊清晰的SRAP标记图谱,对非洲菊DNA的提取方法及其SRAP-PCR反应体系的影响因子进行了初步探讨,建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的DNA模板和SRAP-PCR反应体系.最佳SPAR-PCR反应体系:在50μL的反应总体系中,Mg2+2.0mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,DNA模板100ng,DNA聚合酶2.0U,上游、下游引物各0.22mmol/L.扩增程序:在94℃预变性4min,反应前5个循环在94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高到55℃,最后72℃延伸5min.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
徐建华 杨虹琦 杨程 周冀衡 段凤云 陈信波 詹莜国 赵世浩
以8个烤烟栽培品种为试验材料,对烟草基因组DNA的提取方法进行比较,并对建立烟草SRAP-PCR反应体系的影响因子设置梯度试验.结果显示:改进的CTAB法能较好地满足烟草基因组DNA的提取,在20μLSRAP-PCR的反应体系中,DNA模板40ng、Mg2+1.5mmol/L、dNTP0.25mmol/L、引物0.2μmol/L、Taq聚合酶1.5U,8个烤烟品种的扩增多态性高,带型清晰,差异明显.
关键词：
烟草 DNA提取 SRAP 优化
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
阳桂丹 张巨源 陈雯莉
以ＳｙｎｅｃｈｏｃｙＳｔｉＳＳｐ．Ｓｔｒａｉｎ ｐｃｃ６８０３为实验菌株，设计改良制备定量ｐｃｒ模板的方法；同时，对ＳｙｎｅｃｈｏｃｙＳｔｉＳＳｐ．Ｓｔｒａｉｎ ｐｃｃ６８０３总ｒｎａ的ｔｒｉｚｏｌ抽提法进行优化．结果显示，利用改良方法抽提得到的ｒｎａ结构更完整；同时，利用改良方法制备的模板可以用于后续定量ｐｃｒ实验；其中，只有高表达量基因适用于半定量ｐｃｒ，低表达量基因则需要实时荧光定量ｐｃｒ检测．
[期刊] 西南农业学报
[作者]
黄丽云 李杰 陈雄庭 张秀娟
以非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus)大红花品种花托为外植体,选用MS为基本培养基,附加激素6-BA、NAA和IBA,研究了不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响。结果表明,诱导愈伤时,MS+6-BA10 mg.L-1+NAA0.5 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1+琼脂5.5 g.L-1的效果最佳,培养30 d后转接到MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA1 mg.L-1+AD(硫酸腺嘌呤)5 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1+琼脂5.5 g.L-1的培养基上诱导芽的分化。增殖培养以MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg.L-1+蔗糖30 ...
关键词：
非洲菊 组织培养 再生体系
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
彭木 王秋玉 闫绍鹏
桦剥管菌Piptoporus betulinus作为一种褐腐真菌,是白桦木材的专性腐朽菌,在工业污染物降解和医药领域中起着重要作用。以桦剥管菌为材料,在SRAP-PCR体系优化的基础上,对来自东北主要林区(带岭、塔河、帽儿山以及敦化)不同种群的桦剥管菌进行遗传多样性分析,为桦剥管菌多态性鉴定以及进一步利用提供理论依据。结果表明:用单因素法及均匀设计法优化后的SRAP-PCR体系为10×Buffer 2.0μL、Primer各8μmol/L、dNTP 16 mmol/L、Taq polymerase 2.5
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
于晓英 吴铁明 彭尽晖 吕长平 张宏志 丁江南
为了获得萱草清晰的 AFL P指纹图谱并进一步进行萱草种质资源的鉴别与分类研究 ,以大花萱草为试材 ,用改进后的 SDS法和 CTAB法 ,从萱草的幼叶、成熟叶、新根等部位提取 DNA.结果表明 ,用这两种方法均可从萱草的幼叶、成熟叶、新根中获得高分子量基因组 DNA和 AFL P指纹图谱 ,其中以幼叶的 DNA产量和品质最好 ,CTAB法提取的 DNA纯度较高且程序简单
关键词：
萱草 扩增片段长度多态性 脱氧核糖核酸
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
尹跃 曹有龙 陈晓静 何军 张波
以宁杞1号为试验材料,探讨Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶用量、引物浓度、模板DNA用量对枸杞SRAP-PCR反应的影响.建立20μL反应体系,模版DNA 50 ng,Buffer 1×,Mg2+1.5 mmol.L-1,dNTPs 0.3 mmol.L-1,引物0.3μmol.L-1,Taq DNA聚合酶用量为1 U,并利用该反应体系,两对不同引物组合Me1/Em1和Me3/Em5对12份枸杞样品DNA进行SRAP-PCR扩增,1.8%琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,不同品种(系)间DNA谱带多态性丰富,说明该体系稳定可靠.
关键词：
枸杞 SRAP-PCR 单因素分析
[期刊] 华北农学报
[作者]
王振国 张海英 于广建 张峰 王永健 许勇 郭绍贵 宫国义
采用正交试验设计方法,对影响黄瓜SRAP反应体系的5种因素(dNTP、模板DNA、引物、Taq聚合酶及变性剂)4个水平进行优化筛选,确立了适合黄瓜SRAP分析的优化反应体系,即在10μL PCR反应体系中含有1μL 10×PCR buffer,150μmol/L dNTP,30 ng模板DNA,0.3μmol/L引物、1.5 U Taq聚合酶,PCR产物变性时用10μL变性剂。
关键词：
黄瓜 正交设计 SRAP
[期刊] 林业科学研究
[作者]
郑婷婷 林萍 王开良 姚小华 杨水平
Camellia oleifera is one of the important oil tree species in south China,and C.oleifera industry is quickly developed with the support of the national policies in recent years.The disorder of C.oleifera varieties is one of the key issues restricting the development of C.oleifera industry.Because of...
关键词：
油茶 SRAP 正交设计 体系优化
[期刊] 华北农学报
[作者]
史红丽 韩明玉 赵彩平
建立适宜桃基因组DNA的SRAP-PCR扩增体系,为桃基因图谱的构建和分子标记打下基础。以桃基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从dNTPs、Mg2+、Taq酶、引物、模板5种因素4个水平对桃SRAP-PCR反应体系进行优化,所建立的体系为25μL:dNTPs为0.12 mmol/L,Mg2+为4 mmol/L,Taq酶2 U,引物为0.3 mmol/L,模板DNA50ng。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性l min,35℃复性l min,72℃延伸l min,5个循环;94℃变性l min,50℃复性l min,72℃延伸l min,35个循环,72℃延伸10 min。
关键词：
桃 SRAP 优化 正交试验
[期刊] 林业科学研究
[作者]
李培 阙青敏 王芳 李俊成 朱芹 廖柏勇 陈晓阳
[目的]优化相关序列扩增多态性(SRAP)体系内的不同组分,建立适用于红椿SRAP分子标记的反应体系,并进一步从SRAP引物组合中筛选出稳定、多态性好的引物组合,为红椿遗传多样性研究奠定试验基础。[方法]针对SRAP-PCR反应体系中5个因素各设置8个水平,先利用单因素试验确定浓度梯度,后在确定的梯度范围内选定4个水平,按照正交试验L16(45)进行优化,结合正交直观分析法和新复极差法对各因素进行优化筛选。[结果]确定最优体系为总体系25μL,模板DNA 25 ng,上下游引物各0.3μmol·L(-1)
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
阳桂丹 张巨源 陈雯莉
以ＳｙｎｅｃｈｏｃｙＳｔｉＳ Ｓｐ．Ｓｔｒａｉｎ ｐｃｃ ６８０３为实验菌株，设计改良制备定量ｐｃｒ模板的方法；同时，对ＳｙｎｅｃｈｏｃｙＳｔｉＳ Ｓｐ．Ｓｔｒａｉｎ ｐｃｃ ６８０３总ｒｎａ的ｔｒｉｚｏｌ抽提法进行优化。结果显示，利用改良方法抽提得到的ｒｎａ结构更完整；同时，利用改良方法制备的模板可以用于后续定量ｐｃｒ实验；其中，只有高表达量基因适用于半定量ｐｃｒ，低表达量基因则需要实时荧光定量ｐｃｒ检测。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
孙文会 岳琳 段二红 罗晓 廉静 杨勤
以酵母菌为生物模板,利用水热合成法制备TiO_2。在模板剂添加量为5.0%、水热合成温度为140℃、水热合成时间为4.5h、煅烧温度为350℃、煅烧时间为3.0h的制备条件下,所制备的TiO_2与未添加酵母菌模板的TiO_2相比,光催化降解酸性大红3R的性能提高23.3%。通过X射线衍射、扫描电子显微镜、透射电子显微镜等对催化剂的微观结构和形貌进行分析,制备的TiO_2为锐钛矿型,颗粒粒径为1920nm。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
汪成成 崔文山 董健 冯健 王骞春 姜韬 闫文文 张璐
利用正交设计L16(45)对日本落叶松SRAP-PCR反应体系的模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶浓度五因素在四个水平上进行优化试验,PCR结果采用统计软件SPSS13.0进行分析,结果表明:各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中模板DNA影响最大;筛选得到日本落叶松SRAP-PCR反应的最佳体系(20μL)为模板DNA浓度为120ng.20μL-1,dNTPs的浓度为0.15mmol·L-1,引物浓度为0.3μmol·L-1,Mg2+浓度为1.5mmol·L-1,Taq酶浓度为0.5U.20μL-1。这一优化体系的建立为今后利用SRAP标记技术对日本落叶松遗传多样...
关键词：
正交设计 SRAP-PCR 日本落叶松
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭小菲 姜立娜 蔡祖国 任文娟 赵一鹏
为建立菜用大黄最佳的SRAP反应体系,进一步对菜用大黄品种进行遗传多样性分析,以菜用大黄基因组DNA为模板,采用单因素与正交设计相结合的方法,对SRAP-PCR扩增体系中的模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶浓度5个因素进行优化,并确立菜用大黄SRAP-PCR的最佳体系。结果表明:菜用大黄各因素对反应体系影响大小依次为:引物浓度>Mg2+浓度>dNTPs浓度>Taq DNA聚合酶浓度>DNA用量;最佳反应体系为:25μL反应体系中含10×PCR Buffer 2.50μL、模板DNA 30 ng、Mg2+2.50 mmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、Taq...
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菜用大黄 SRAP-PCR 体系优化
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