【目的】筛选生长繁殖快、产酸能力强且耐酸的乳酸菌,以获得制备果渣青贮发酵剂的优良菌株。【方法】通过葡萄糖发酵产酸产气特征、产酸速率和生长曲线进行供试乳酸菌的筛选,对筛选出的优良菌株进行形态学、生理生化和分子生物学鉴定,并进一步研究其生长温度范围、酸碱耐受性、耐盐性,最后对菌株发酵液进行酸度滴定和有机酸组分分析。【结果】经筛选共获得R7、R3、Rg和Re 4株优良乳酸菌。经形态学、生理生化和16SrDNA序列分析,确定R7为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),R3为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus),Rg为发酵乳杆菌(Lactobacillus ...

【目的】从猪新鲜粪便和肠道黏膜中筛选乳酸菌，为猪益生剂饲料添加剂提供理论依据和可靠菌种。【方法】采集陕西八眉猪的粪便和肠道组织，分离纯化乳酸菌，通过体外耐酸、耐胆汁试验以及抑菌试验和黏附试验，筛选特性优良的益生菌，用１６ＳｒｒＮＡ基因序列系统发育树确定其分类地位。采用小鼠安全性检验试验，检测筛选菌株的安全性。【结果】筛选出一株耐受性和抑菌性良好，生长曲线稳定且黏附性较好的乳酸菌，命名为ＦＢ０２７；另一株抑菌性和黏附性良好，生长曲线稳定且耐酸、耐胆盐较好的乳酸菌，命名为ＳＥ０１３。１６ＳｒｒＮＡ基因序列系统发育树分析发现，ＦＢ０２７为非解乳糖链球菌（ＳｔｒＥｐｔｏｃｏｃｃｕＳ ＡｌＡｃｔｏｌｙｔ．．．

【目的】筛选出适合柑橘皮渣青贮的乳酸菌,以获得柑橘皮渣青贮制剂最佳菌株。【方法】采用平板划线法从自然发酵的柑橘皮渣和添加秸秆发酵的柑橘皮渣中初步分离乳酸菌,对其进行形态学和生理生化鉴定;再通过产酸性试验、耐酸耐碱性试验、生长曲线、产有机酸情况等进行优良菌的复筛及其种属鉴定。以直接青贮为对照,利用优良菌发酵青贮柑橘皮渣,分析测定皮渣品质。【结果】初选的12株乳酸菌中有7株为乳杆菌属(Lactobacillus)细菌,5株为片球菌属(Pediococcus)细菌。经过产酸性试验、耐酸耐碱性试验、产有机酸情况等

为获得苜蓿青贮用乳酸菌,本研究从苜蓿附生乳酸菌中通过抑菌活性、酸化苜蓿粉及结构性糖代谢中间产物的性能指标筛选优良菌株,并研究其对苜蓿(Medicago sativa)青贮发酵的影响。结果表明,1)筛选到抑菌活性较高、酸化苜蓿粉及结构性糖代谢中间产物综合性能较好的菌株ZZU A341,被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);2)青贮90 d,添加该菌株的处理组pH、氨态氮含量低于添加商业菌株(YX)的处理组,显著低于自然青贮(P <0.05)。综上所述,使用该筛选方法获得的优良乳酸菌可有效改善苜蓿发酵品质。

本研究旨在挖掘出低温条件下生长速率和产酸速率俱佳的乳酸菌，并将其回接至若尔盖县白河牧场的青贮燕麦（Avena sativa），研究耐低温乳酸菌对燕麦青贮饲料发酵品质的影响。通过限制性培养方法筛选耐低温菌株，并结合16S rRNA序列分析技术进行鉴定。结果表明，1)乳酸菌菌株YZ3在4 ℃低温条件下产酸性能最佳（pH可达到5.38），且能耐低pH（4.0）和高盐浓度（6.5% NaCl）环境；2)通过生理生化试验、菌落形态、革兰氏染色以及16S rRNA序列分析表明，乳酸菌YZ3为副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）；3)低温环境下YZ3处理的燕麦青贮乳酸含量升至63.7 mg·g^-1，显著高于对照（P ＜ 0.05），青贮料pH降低至4.1，显著低于对照组（P ＜ 0.01）。综上所述，添加乳酸菌YZ3能够改善燕麦的青贮发酵品质，YZ3可作为川西北高寒地区的低温青贮菌株。

【目的】合理利用牧草资源,为新疆南疆地区畜牧业提供优质青贮,研究探讨了花果期盐穗木青贮后的营养价值和发酵品质,同时为提高青贮饲料发酵品质筛选提供乳酸菌资源。【方法】以新疆阿克苏地区花果期盐穗木为原料制作实验室小剂量自然发酵青贮,在发酵第150天时对比青贮前后盐穗木的干物质(DM)、粗蛋白(CP)、可溶性糖(WSC)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的含量变化,测定盐穗木青贮的p H、氨态氮(NH3-N)、乳酸(LA)、乙酸(AA)、丙酸(PA)和丁酸(BA)含量,并采用实验室纯培养方法结合生理生化分析,对青贮中乳酸菌的种类和形态学进行分类,通过葡萄糖发酵产酸产气试验、细菌微量生化反应碳源发酵试验、耐盐试验、耐酸试验和温度生长试验等生理生化试验对所筛选菌株进行研究。运用核酸Blast技术,将所测序列与Gen Bank数据库进行对比,选择并下载与所测序列同源性最高的已知分类地位的菌种,与本试验所测菌株的序列一起,采用Clustal进行比对,用MEGA5.0绘制系统发育树,确定各菌株分类地位,对分离的菌株进行种属鉴定。【结果】与青贮前相比,由于乳酸菌发酵利用原料中的糖类物质导致青贮后盐穗木中的干物质和可溶性糖含量下降,同时在青贮发酵过程中盐穗木茎秆中难降解的水溶性碳水化合物被乳酸菌降解为易被利用的纤维,导致中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的含量升高,青贮p H为4.250—4.286,乳酸含量为60.923—61.283属于优良品质青贮饲料的范围。从自然发酵盐穗木青贮中分离得到3株粪肠球菌(Enterococcus faecium)、1株屎肠球菌(Enterococcus lactis)、2株蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、1株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、1株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和1株布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)。9株菌均能在p H4—7环境下能生长,在3.0%和6.5%Na Cl条件下及10—45℃范围内生长,且生长状况良好,同时能利用D-葡萄糖、D-甘露糖、纤维二糖、D-甘露醇、D-果糖、蔗糖等多种碳源。其中,戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)产酸速率和生长速率较快,且具有很强的耐酸耐盐能力,在5—45℃范围内生长良好。【结论】将盐穗木制成青贮后其营养成分含量和发酵品质均处于良好水平,可将戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)这3株菌选作青贮饲料制作过程中的添加剂。

为提高湿热地区青贮饲料的品质,本研究首先分析了从西南高温高湿地区青贮饲料中分离到的227株天然乳酸菌种群结构,再根据乳酸菌在高温条件下的生长活性和产酸能力筛选到4株优质乳酸菌(LP149、LS358、LR753和LPA761),并对菌株生理生化特性和生长、产酸曲线进行了测定。结果表明,天然植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)是高温高湿地区青贮料中最常见的乳酸菌菌株(占62.55%),其次是鼠李糖乳杆菌(L. rhamnosus)和副干酪乳杆菌(L. paracasei),分别占总乳酸菌的13.21%和9.25%。所筛选的4株菌株为革兰氏阳性和过氧化氢酶阴性的杆状菌,能够在pH 3.5和45℃的条件下生长。根据生理、生化特征和16S rRNA测序分析,LP149、LS358、LR753和LPA761分别被鉴定为植物乳杆菌、唾液乳杆菌(L. salivarius)、鼠李糖乳杆菌和副干酪乳杆菌。在37和45℃条件下的菌株生长和产酸曲线结果表明,筛选出的4株乳酸菌有良好的高温适应性(45℃),不仅生长速度快,产酸能力强,耐盐性较好,对糖源利用范围广,而且对酸性环境有较好的适应性,可以作为后续进行高温青贮回填试验的候选菌株。

为筛选可提升高寒地区菊芋(Helianthus tuberosus)青贮发酵品质的耐低温乳酸菌，本研究以‘青芋2号’菊芋青贮物料为材料，利用平板培养法分离乳酸菌株，分析菌株生理生化特性，并通过16S rRNA测序进行菌株种属鉴定。结果表明，菊芋青贮物料中共分离得到34株乳酸菌株，经低温及生理生化筛选获得13株耐低温乳酸菌株，包括11株同型发酵乳酸菌和2株异型发酵乳酸菌，其耐酸性和耐盐性均较强；经产酸和生长能力对比，GN02菌株生长最快(OD=2.63),GN10菌株具有更强的产酸能力(pH=3.59),XN25菌株兼具较强的生长和产酸能力；16S rRNA测序鉴定出9株植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)、1株戊糖乳杆菌(Lactiplantibacillus pentosus)、1株棒状乳杆菌(Lactiplantibacillus coryniformis)、1株短乳杆菌(Lactiplantibacillus brevis)及1株无法鉴定。本研究筛选出适合高寒地区菊芋青贮发酵的耐低温植物乳杆菌、戊糖乳杆菌、短乳杆菌各1株。

【目的】从健康鸡肠道中分离筛选优质乳酸菌，为制备禽用微生态制剂提供技术支持。【方法】选用３０日龄健康青年鸡，取其盲肠内容物，通过选择性培养基筛选出具有产酸能力的乳酸菌，对其进行耐ｐＨ ３．０胃酸和３ｇ／Ｌ牛胆盐筛选试验及菌株生长曲线、产酸能力测定，并通过平板抑菌试验筛选出具有较强抑菌效果的菌株。最后对此菌株１６ＳｒｒＮＡ进行克隆测序，经ＢＬＡＳｔ比对和系统进化树分析，对菌株进行鉴定。【结果】从所取鸡盲肠内容物中分离得到Ｌ１～Ｌ９ ９株乳酸菌，其中Ｌ２、Ｌ４和Ｌ９株耐ｐＨ ３．０和３ｇ／Ｌ牛胆盐的综合能力较强。经过比较３株菌的生长曲线和产酸曲线，发现Ｌ２菌株耐酸耐牛胆盐、生长迅速、产酸能力强，且．．．

本研究对麻叶荨麻(Urtica cannabina)青贮饲料中优势乳酸菌进行分离鉴定，为改善麻叶荨麻青贮品质提供理论依据。经传统微生物和分子生物学鉴定，结果表明：麻叶荨麻青贮中共分离得到11株优势乳酸菌，其中1株为格氏乳球菌(Lactococcus garvieae, QM7),1株为粪肠球菌(Enterococcus faecalis, QM16),1株为鹑鸡肠球菌(Enterococcus gallinarum, QM35), 2株为铅黄肠球菌(Enterococcus casseliflavus, QM13、 QM32), 3株为类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides, QM6、QM8、QM10),3株为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus, QM9、QM11、QM12)。分离出的乳酸菌均能在4～45℃以及3.0%和6.5%的Na Cl条件下良好生长；而所有菌株在pH为3时不生长，在pH为3.5～9呈现生长或微弱生长。研究结果表明菌株QM7和QM11在培养至24 h时pH可下降到3.82和3.78,OD600值为2.12和2.06，表现出最强的产酸能力和生长速率，可作为后期调控麻叶荨麻青贮的菌剂应用。

乳酸菌是影响植物青贮效果的关键因素。为探究构树源不同乳酸菌对构树(Broussonetia papyrifera)青贮品质的影响，本试验首先从自然青贮构树叶中分离乳酸菌并鉴定，以上述构树源的乳酸菌青贮发酵构树叶为试验组，不添加乳酸菌青贮构树叶为对照组，避光青贮发酵60 d后进行检测分析，研究构树源不同乳酸菌对构树叶青贮品质的影响。结果表明：构树叶青贮料中共分离出清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides) 4株乳酸菌，前3株乳酸菌均为同型发酵乳酸菌，后一株为异型发酵乳酸菌，其中戊糖片球菌和粪肠球菌对构树单宁的耐受性显著优于其他两种菌(P <0.05)。与对照组相比，各试验组干物质含量、粗蛋白含量和可溶性碳水化合物含量均显著高于对照组(P <0.05)，戊糖片球菌和粪肠球菌组的粗蛋白含量显著高于类肠膜魏斯氏菌(P <0.05)。与对照组相比，各试验组pH和丙酸含量显著低于对照组(P <0.05)，乳酸含量显著高于对照组(P <0.05)，戊糖片球菌和粪肠球菌组的pH、乙酸、氨态氮含量显著低于其他试验组(P <0.05)，类肠膜魏斯氏菌组乳酸含量显著低于其他试验组(P <0.05)。综上表明，添加外源乳酸菌可改善构树叶青贮品质，不同乳酸菌对构树单宁耐受性影响其对构树叶青贮发酵品质。

为明确柱花草（Stylosanthes guianensis）青贮饲料中乳酸菌的耐高温情况及其对柱花草青贮品质的影响，采用传统微生物培养、分离、筛选结合16s rRNA基因鉴定技术研究了柱花草青贮饲料中的主要耐高温优质乳酸菌种类与生理生化特性，并用筛选出的优质乳酸菌菌株接种柱花草调制青贮饲料。结果表明：从柱花草青贮饲料中筛选出了7株可耐受45 ℃高温、7.5%NaCl盐度、pH4.5酸度、至少可利用11种碳源、接种2 h后均能迅速产酸的优质乳酸菌；基因鉴定表明它们分属于粪肠球菌（Enterococcus faecalis）（S1、S2、S5和S6菌株）、人参土芽孢杆菌（Weizmannia ginsengisoli）（S3菌株）和戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）（S4与S7菌株）3个属。粪肠球菌S1菌株与戊糖片球菌S4菌株分别接种于柱花草青贮30 d后，不但显著减少青贮饲料的干物质损失（P＜0.05），还使其pH、丁酸与氨态氮含量显著降低（P＜0.05），乳酸含量显著高于植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）接种组（P＜0.05），且肠杆菌科数量减少，无霉菌和酵母菌检出；特别是粪肠球菌S1接种组的粗蛋白含量显著高于植物乳杆菌接种组（P＜0.05），可有效提高柱花草青贮饲料发酵品质并且保存更多的营养成分。

[目的]对藏猪粪便中乳酸杆菌进行分离、鉴定及生物学特性研究。[方法]采集不同生长阶段藏猪(仔猪、保育猪、母猪)粪便,通过MRS选择性培养基培养、形态学观察、产酸性能测定、细菌生化鉴定及16S rDNA基因测序技术等方法从中分离、鉴定乳酸杆菌,检测藏猪源乳酸杆菌的生长曲线、耐酸耐胆盐特性、溶血活性、体外抑菌效果、益生基因,并对其进行安全性评估。[结果]从藏猪粪便中分离出48株乳酸杆菌,经16S rDNA基因测序和生物学特性分析,最终得到1株藏猪源唾液乳酸杆菌(Lactobacillus salivarius),该菌株具有较好的产酸性能,产酸量可达(0.070±0.005) mol/L;对高质量浓度胆盐和低pH具有良好的耐受能力;该菌株中检测到肠菌素P2基因(Ent P2),无溶血活性;体外抑菌结果显示,藏猪源唾液乳酸杆菌对金黄色葡萄球菌(CMCC 26003)和大肠杆菌(CMCC44102)具有良好的抑菌效果;15 d小鼠灌胃试验结果显示,小鼠的体质量变化和脏器指数与生理盐水组无显著性差异,未观察到菌血症和细菌移位现象。[结论]筛选得到1株安全无毒副作用的藏猪源唾液乳酸杆菌,该菌具有较好的生物学特性,可作为发酵饲料和防治细菌性肠道疾病的潜在益生菌。

[目的]对藏猪粪便中乳酸杆菌进行分离、鉴定及生物学特性研究。[方法]采集不同生长阶段藏猪(仔猪、保育猪、母猪)粪便,通过MRS选择性培养基培养、形态学观察、产酸性能测定、细菌生化鉴定及16S rDNA基因测序技术等方法从中分离、鉴定乳酸杆菌,检测藏猪源乳酸杆菌的生长曲线、耐酸耐胆盐特性、溶血活性、体外抑菌效果、益生基因,并对其进行安全性评估。[结果]从藏猪粪便中分离出48株乳酸杆菌,经16S rDNA基因测序和生物学特性分析,最终得到1株藏猪源唾液乳酸杆菌(Lactobacillus salivarius),该菌株具有较好的产酸性能,产酸量可达(0.070±0.005) mol/L;对高质量浓度胆盐和低pH具有良好的耐受能力;该菌株中检测到肠菌素P2基因(Ent P2),无溶血活性;体外抑菌结果显示,藏猪源唾液乳酸杆菌对金黄色葡萄球菌(CMCC 26003)和大肠杆菌(CMCC44102)具有良好的抑菌效果;15 d小鼠灌胃试验结果显示,小鼠的体质量变化和脏器指数与生理盐水组无显著性差异,未观察到菌血症和细菌移位现象。[结论]筛选得到1株安全无毒副作用的藏猪源唾液乳酸杆菌,该菌具有较好的生物学特性,可作为发酵饲料和防治细菌性肠道疾病的潜在益生菌。