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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 刘莉芳  罗丽飞  陈宇龙  高泽霞  
通过基因克隆获得了团头鲂3种雌激素受体(estrogen receptor,ER)基因的CDS(coding sequence)序列:ERα(1 904 bp)、ERβ1(1 842 bp)和ERβ2(2 609 bp),比较不同物种间的ERs基因的同源性,结果显示团头鲂ERs与鲤、金鱼和斑马鱼具有较高的同源性。为分析ERs对团头鲂性腺与生长发育的调控作用,分别以团头鲂不同年龄阶段的生长快慢群体为研究对象,比较分析ERs在不同年龄阶段生长快慢个体肌肉和性腺组织中的表达量。结果显示,在1龄到3龄团头鲂肌肉中,ERα和ERβ1在生长快组(FG)中的表达量整体高于生长慢组(SG)(P<0.05),并且ERα在1龄FG和SG团头鲂中的表达量差异比2龄和3龄团头鲂更为明显(P<0.05)。ERβ2在FG和SG团头鲂中的表达量差异与ERα和ERβ1相反(P<0.05),且在3龄雄性团头鲂中,ERβ2在FG组中的表达量极显著高于SG组。在1龄和2龄雌性团头鲂中,雌激素受体基因ERα、ERβ1和ERβ2在FG组的表达量显著高于SG组。在雄性团头鲂中,ERα在1龄FG组的性腺中的表达量高于SG组;1龄和2龄雄性团头鲂性腺中,ERβ2在FG组的表达量显著低于SG组,但在3龄雄性性腺中,ERβ2在FG组的表达量显著高于SG组。以上研究结果表明,ERs在一定程度上可促进鱼类生长和性腺发育,ERα、ERβ1和ERβ2可能组成一个复杂的调控体系,彼此相互影响,并共同调节机体生长和性腺发育。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈葵  龚宏伟  
对完全在淡水中人工饲养达到初次性成熟的暗纹东方鱼屯 (FuguobscurusAbe)亲鱼越冬后采用日粮中添加一种植物雌激素的方法强化培育 ,在温室中饲养亲鱼 10天 ,经一次注射催情激素 (雌鱼每千克PG2mg +LRH -A2 60 μg ,雄鱼减半 ) ,2 2℃水温条件下效应时间 4 8小时 ,湿法授精。结果 ,产卵率 70 % ,出苗率 3 6%。结论 :家养的暗纹东方鱼屯性成熟最小年龄提前一年 ;日粮添加植物雌激素强化培育亲鱼可以显著促进亲鱼性腺发育并顺利产卵 ,并提高出苗率
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王月影  范光丽  杨国宇  王艳玲  张永德  
为了探讨不同发育时期大鼠乳腺中雌激素受体α(Estrogen receptor,ERα)的表达情况,采用RT-PCR方法对不同发育时期大鼠乳腺组织中的ERα进行了半定量研究。结果表明,妊娠和泌乳期大鼠乳腺组织中的ERα表达水平均低于处女期,且差异显著(P0.05)。表明ERα可能参与了乳腺细胞的发育和凋亡。
[期刊] 水产学报  [作者] 王磊  李响  柳峰松  刘利平  
为评估不同激素诱导花鳗鲡卵巢发育的效果并探究促性腺激素在花鳗鲡发育过程中的作用,实验比较了不同激素组合处理后花鳗鲡性体指数(gonadosomatic index,GSI)的变化,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对处于不同发育阶段雌鱼脑垂体中促性腺激素基因Gt Hα(促性腺激素亚基),LHβ(促黄体生成素亚基)及FSHβ(卵泡刺激素亚基)的表达进行了定量研究。结果发现,鲤脑垂体萃取液(CPE)与人类绒毛膜促性腺激素(h CG)组合能够有效促使雌性花鳗鲡性腺发育成熟,GSI平均达22.9%,与对照组相比差异显著。单独注射雄烯二酮(ADSD)和注射ADSD、CPE、h CG混合制剂诱导效...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 丁家桐  葛红山  姜勋平  刘桂琼  张军强  
用PCR RFLPs法检测了 90头姜曲海、梅山、二花脸母猪雌激素受体基因 (ESR)的多态性 ,分析了该基因与产仔数和乳头数的关系。结果表明 ,ESR基因型间总产仔数 (TNB)和产活仔数 (NBA)差异极显著 (P 0 0 5 )。
[期刊] 水产学报  [作者] 赵维信  贾江  
鳙(Aristichthysnobilis)、团头鲂(Megalobramaamblycephala)和短盖巨脂鲤(Colossomabrachypomum)胚胎与仔鱼体内三碘甲腺原氨酸(T_3)和甲状腺素(T_4)含量的变化,采用放射免疫测定法进行测定,研究发现胚胎阶段的T_3和T_4含量较稳定,出膜后仔鱼阶段的T_3和T_4含量逐渐下降。结合三种鱼类典型甲状腺腺泡结构发生的研究,表明甲状腺腺泡最早出现在咽鳃区腹主动脉周围,典型甲状腺腺泡出现的时间分别与该种鱼类T_4含量的升高相一致。研究表明,鳙、团头鲂和短盖巨脂鲤早期发育阶段甲状腺激素含量的变动是由于母源性甲状腺激素的用尽耗竭与自身甲状腺...
[期刊] 水产学报  [作者] 张逛  王武  段征宇  桂朗  苏冒亮  牟幸江  张俊彬  
为了解金钱鱼促性腺激素受体基因(GtHRs)在金钱鱼性腺发育中的作用,采用反转录PCR(Rt-PCR)与cDNA末端快速克隆(RACE)首次克隆了金钱鱼卵泡刺激素受体(FSHR)和促黄体生成素受体(LHR)的cDNA序列全长。FSHR的cDNA全长2538 bp,编码702个氨基酸,LHR的cDNA全长3315 bp,编码722个氨基酸,它们都含有属于糖蛋白激素受体(GHR)家族的典型跨膜螺旋结构区域(TM helix)。同源性分析显示金钱鱼GtHRs与欧洲鲈的相似性最高,且GtHRs在进化中具有一定的保
[期刊] 中国水产科学  [作者] 陈凯  习丙文  滕涛  王亚冰  高金伟  梁利国  谢骏  
促肾上腺皮质激素释放激素受体(corticotropin-releasing hormone receptor,crhr)是鱼类下丘脑–垂体–头肾调控轴上的重要应激调节因子。本研究通过c Dna末端快速扩增(race)技术成功克隆出团头鲂(megalobrama amblycephala)crhr1 m rna全长序列,应用生物信息学方法对其序列特征进行解析;同时采用荧光定量pcr技术分析了团头鲂crhr1的组织分布图谱及外源性皮质醇注射模拟应激处理下团头鲂crhr1 m rna的表达变化。研究结果表明,crhr1 m rna序列开放阅读框(open reaDing frame,orf)为12...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 丁炜东1 曹丽萍1 曹哲明1 邴旭文1 陈克春2 胡晋鸣3  
对雌激素受体α基因的氨基酸序列进行抗原性分析,筛选合适的基因片段进行克隆,经RT-PCR扩增得到大小为945 bp的片段,经测序鉴定后,将该片段定向亚克隆于pMAL-c2x表达载体中,转化至TB1感受态细胞中进行诱导表达。经1 mmol/L IPTG诱导4 h观察到有新的重组蛋白获得了表达,采用SDS-PAGE和Western blot试验进行检测,结果表明表达的重组蛋白的分子质量约为78.1 ku,表达产物占菌体总蛋白的42.3%,且具有免疫学活性。进一步纯化和蛋白酶切后,得到单一的雌激素受体α蛋白。以该蛋白免疫小鼠制备抗体,在免疫第7周时达到最大滴度1.158±0.232。将制备的多克隆抗...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 丁炜东  曹丽萍  曹哲明  邴旭文  陈克春  胡晋鸣  
对雌激素受体α基因的氨基酸序列进行抗原性分析,筛选合适的基因片段进行克隆,经RT-PCR扩增得到大小为945bp的片段,经测序鉴定后,将该片段定向亚克隆于pMAL-c2x表达载体中,转化至TB1感受态细胞中进行诱导表达。经1mmol/L IPTG诱导4h观察到有新的重组蛋白获得了表达,采用SDS-PAGE和Western blot试验进行检测,结果表明表达的重组蛋白的分子质量约为78.1ku,表达产物占菌体总蛋白的42.3%,且具有免疫学活性。进一步纯化和蛋白酶切后,得到单一的雌激素受体α蛋白。以该蛋白免疫小鼠制备抗体,在免疫第7周时达到最大滴度1.158±0.232。将制备的多克隆抗体进行黄...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 曲宪成  崔严慧  周正峰  曲学伟  金一春  胡萍华  尚晓莉  程翠  张开岳  张勇  蒋骄云  
利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列长度为1354bp,其中包括TATA盒、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y和AP1等可能对GtHⅡβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点;转录起始位点位于-40~10bp。进一步利用PCR方法扩增得到了811bp(-771~+40bp)、601bp(-561~+40bp)、386bp...
[期刊] 水产学报  [作者] 吴婷婷  杨弘  董在杰  夏德全  史瀛仙  季肖东  沈玉  孙伟勇  
采用显微注射方法,将带有小鼠MT-1基因启动顺序与人生长激素hGH基因顺序重组的线状DNA片段,注入团头鲂和鲤的受精卵,获得成活的实验鱼。经斑点、Southern杂交、Northern杂交、放射免疫和酶联等方法检测,表明外源基因在受体鱼中得到整合、转录、翻译和表达,并具促生长效应。转基因雌鱼和雄鱼有性繁殖所获得的子鱼带有外源基因,表明外源基因能通过性细胞传递给子代,并仍具促生长效应。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵博文  赵鸿昊  杨振华  赵炎  古勇明  王卫民  高泽霞  
运用方差分析、主成分分析和聚类分析3种多元统计分析方法对团头鲂、长春鳊及其杂交子代(团头鲂♀×长春鳊♂)的形态学差异和性腺发育进行比较分析,结果表明:杂交子代的多数可数、可量性状同父母本相近,差异不显著;聚类分析显示杂交子代在形态上与母本团头鲂更相似,但遗传了父本长春鳊的全腹棱特征。对1龄和2龄杂交子代的性腺观察结果显示:1龄杂交子代性腺均呈细线状,肉眼很难分辨雌雄,组织切片观察精巢和卵巢大都处于Ⅱ期和Ⅲ期状态;2龄杂交子代的卵巢和精巢存在单侧发育和两侧不均衡发育的情况,大多处于Ⅳ期阶段。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵博文1  2  赵鸿昊1  2   杨振华1  2   赵 炎1  2   古勇明3   王卫民1   高泽霞1  2  
运用方差分析、主成分分析和聚类分析3种多元统计分析方法对团头鲂、长春鳊及其杂交子代(团头鲂♀×长春鳊♂)的形态学差异和性腺发育进行比较分析,结果表明:杂交子代的多数可数、可量性状同父母本相近,差异不显著;聚类分析显示杂交子代在形态上与母本团头鲂更相似,但遗传了父本长春鳊的全腹棱特征。对1龄和2龄杂交子代的性腺观察结果显示:1龄杂交子代性腺均呈细线状,肉眼很难分辨雌雄,组织切片观察精巢和卵巢大都处于Ⅱ期和Ⅲ期状态;2龄杂交子代的卵巢和精巢存在单侧发育和两侧不均衡发育的情况,大多处于Ⅳ期阶段。
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 田刚  李思发  
于5月份团头鲂正常繁殖期前夕,以初次性成熟(二足龄)二倍体团头鲂为对照样本,同龄同池培育的同源倍间正交三倍体、同源倍间反交三倍体、异源倍间杂交三倍体为实验样本,分别取性腺,石蜡切片,镜检发育状况。发现团头鲂三倍体的性腺可归纳为三种情况:(1)性腺发育程度很低,表现为雄性二足龄三倍体的性腺外观细小,生殖细胞处于精原细胞水平。(2)性腺发育出现异常,表现在性腺外观畸形,有卵巢单侧不发育,有精巢大部分为细线,局部增粗等情况,还有发现外观无异常,但切片观察为雌雄嵌合体。(3)性腺发育无异常,表现为性腺外观没有异常,切片观察也能观察到各期典型的生殖细胞。
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