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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 杨敏敏  刘红艳  左阳  赵应忠  
以芝麻细胞核雄性不育系95ms-5为材料,对AFLP反应体系中的酶切连接、预扩增和选择性扩增中的关键性因素进行了优化。结果表明,在模板DNA质量浓度为200ng/μL、37℃酶切连接6h的情况下,预扩增中最佳Mg2+浓度为1.0mmol/L,dNTP最佳浓度为0.3mmol/L,Taq酶量以0.5U为宜,预扩增引物终浓度为0.4mmol/L;选择性扩增中,预扩增产物稀释10倍后,以Mg2+0.8mmol/L、dNTP 0.2mmol/L、Taq酶1.0U、选扩引物0.6mmol/L为宜。
[期刊] 华北农学报  [作者] 屠礼传  梁秀银  王文泉  郑永战  柳家荣  
通过群体改良对芝麻雄性不育原始材料进行基因重组,产生了大量优秀变异。用系内连续姊妹交、回交等手段育成了综合农艺性状良好、不育度为99%以上、不育株率稳定在50%左右、可供杂交种生产应用的ms86-1不育系。形态学研究证明,所选不育系雄蕊败育彻底,雌蕊发育正常,具有正常的结籽能力;小孢子败育发生在四分体后的无液泡小孢子期;雄性不育性具有良好的环境稳定性。根据初步的遗传分析推测,不育性可能不是受单隐性基因控制,而至少涉及两个基因位点。在不育系内连续进行姊妹交可提高不育株出现频率。用不育系配制的杂交种豫芝9号(ms86-1×Danbackggae)已在生产上推广应用。
[期刊] 华北农学报  [作者] 陈晓凤  黄凤兰  李国瑞  王文跃  张智勇  包春光  吴春桃  张现世  
以蓖麻种子为研究对象,优化其cDNA-AFLP反应体系,为研究不同蓖麻材料或不同发育阶段的蓖麻种子内脂肪酸基因表达差异奠定理论基础。试验结果表明:提取蓖麻种子总RNA;将RNA逆转录为cDNA,用高频限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ进行酶切,并与EcoRⅠ、MseⅠ接头连接,得到连接产物;连接产物稀释40倍作为预扩增模板,进行预扩增;优化选择性扩增反应体系,得到最佳反应体系为:10×PCR Buffer 2.0μL、dNTPs(10 mmol/L)1.4μL、Mg2+(25 mmol/L)1.4μL、模板稀释80倍1.0μL、Ex扩增引物(50 pmol/μL)1.2μL、My扩增引物(50 ...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王大玮  李煜  周玮  李周岐  
【目的】建立并优化适合杜仲的AFLP技术体系,为进一步构建其遗传图谱及开展分子标记辅助育种奠定基础。【方法】对杜仲基因组DNA提取方法、酶切与连接体系、预扩增和选择性扩增程序的影响因素进行分析,并对适合杜仲AFLP分析的引物组合进行筛选。【结果】模板DNA的提取采用改进的CTAB法,酶切模板DNA用量500 ng,酶切时间6 h,连接反应时间6 h,预扩增产物最适稀释倍数30倍。同时筛选出E-AAG+M-CAA,E-AAG+M-CAT,E-AAG+M-CTA,E-AAG+M-CTG,E-ACA+M-CAA,E-ACA+M-CTA,E-ACC+M-CTG共7对适合杜仲AFLP分析的引物组合。【结...
[期刊] 华北农学报  [作者] 张超杰  徐维华  刘万好  唐美玲  
以黑珍珠和砂蜜豆为材料,对AFLP分析过程中模板DNA的制备、酶切与连接、酶切连接产物的预扩增与选择性扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳等过程中易出现的问题及其解决方法作了对比研究,建立了一套适合于甜樱桃的AFLP分子标记体系。共筛选了64对引物,其中30对扩增效果理想,能够得到清晰、稳定的条带,平均每对引物扩增条带为60条。该体系的建立为研究甜樱桃遗传多样性和标记农艺性状的技术平台构建奠定了基础。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 饶勇  李大雄  刁攀琏  
采用不完全双列杂交方法测定了隐性核不育系与黔油系列品种(系)产量、单株有效角果、主花序有效角果、千粒重、角实粒数的配合力。结果表明:(1)二者之间在产量、角实粒数和单株有效角果及主花序有效角果的特殊配合力分别达到极显著差异和显著差异,而千粒重无显著差异;(2)不育系产量及产量性状一般配合力除单株有效角果无差异外,其余均达显著差异;(3)黔油系列品种(系)产量性状的一般配合力达到显著和极显著差异,其中多数品种(系)仍可继续用作常规品种选育的核心亲本
[期刊] 华北农学报  [作者] 高国训  靳力争  任志雨  鲁福成  陆子梅  
以芹菜雄性不育两用系01-3AB为不育源,根据其所携带的雄性不育隐性核基因和转育目标自交系相关性状的遗传特点设计转育方案,通过杂交、自交、回交、成对兄妹交等方法,向3个芹菜自交系转育核不育基因。转育结果表明,获得的3个新芹菜雄性不育两用系不育性稳定,结籽正常,综合农艺性状优良,相关性状与父本相同。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 蒋海玉  王欣  李劲峰  
引进四川的甘蓝型杂交组合89-50中分离的不育株作母本,用自选的双低、高配合力的自交系8840894、92103作轮回亲本,采用杂交、连续回交-自交、自交育性分离、株系内成对测交、株系内兄妹交转育成新的双低、高油分、高配合力的隐性核不育两型系99F114AB、99F121AB。其具有低芥酸、低硫甙、高含油量、高配合力等优良性状,恢复源广较易配制出强优势的杂交组合,具有较好的开发应用前景。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王文跃  李国瑞  黄凤兰  尚雨丝  王超  罗蕊  邱靖  王丹  张智勇  陈永胜  
以蓖麻茎秆为试材,研究了影响cDNA-AFLP标记蓖麻差异基因反应体系的几个关键因素,建立了适宜蓖麻的cDNA-AFLP分析体系。结果表明:当裂解液为1.4 mL时提取的RNA浓度最高,EcoRⅠ和MseⅠ的组合6 h可将ds-cDNA酶切完全,与相应接头连接过夜后产物用于预扩增,预扩增产物稀释15倍时作为选择性扩增模板可以获得条带丰富且重复性好的结果。蓖麻cDNA-AFLP反应体系的建立为进一步研究蓖麻株高、叶型等相关基因奠定了基础。
[期刊] 华北农学报  [作者] 高桐梅  卫双玲  李春明  张海洋  李丰  贺松涛  
为了探索太空环境对不同芝麻品种的诱变效应,以实践8号卫星搭载的豫芝11号、日本黑芝麻、郑芝D15、郑芝05N01、郑芝06ms198等5个芝麻品种为材料,分析了太空诱变对芝麻SP3与SP4世代农艺性状和抗性变异的影响,并对豫芝11号、日本黑芝麻及其诱变后代进行了AFLP分子标记检测。结果表明:不同芝麻品种经太空诱变后在叶型、蒴型、花色、生育期、株高、始蒴部位、黄稍尖、单株蒴数、千粒质量、产量和抗病性上均产生了变异,品种间突变类型及突变频率均存在差异,抗性性状有正向增加的趋势,但农艺性状负向突变较正向突变幅度大。与对照(未经太空诱变)相比,株高、始蒴部位、黄稍尖、单株蒴数、千粒质量、产量最高分别...
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 周生财  黄华宏  童再康  吴小林  
采用核酸电泳缓冲液(TNE)结合十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)提取的高质量楠木Phoebe基因组脱氧核糖核苷酸(DNA)可满足扩增片段长度多态性(AFLP)分析的要求。利用浙江楠Phoebe chekiangensis基因组DNA优化建立楠木AFLP反应体系如下:酶切反应300 ng基因组DNA,0.3μL缓冲液4,0.3μL牛血清白蛋白(100×BSA),50nkat EcoRΙ,25 nkat MseΙ,双蒸水加至30.0μL放置37℃恒温箱酶切4 h,聚合酶链式反应(PCR)仪上65℃15min;连接反应20.0μL酶切产物,2.5μL T4缓冲液,666.8 nkat T4连接酶,5...
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 明军  张启翔  晏小兰  邱丽娟  
采用改进的SDS DNA提取方法从梅花的嫩叶和老叶中提取获得总DNA .所得DNA样品的OD2 6 0 OD2 80 值在1 7~ 1 9之间 ,琼脂糖凝胶上主带清晰、较少降解、样品纯度高、蛋白去除干净且得率高 .该体系对原提取程序作了多处简化 ,使操作简便、快捷、高效 ,适合于梅花DNA提取 ,所提取的DNA样品不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂 ,可被限制性内切酶MseⅠ和EcoRⅠ完全酶切 ,适合AFLP PCR反应应用 ,得到清晰的指纹式样 .
[期刊] 企业管理  [作者] 筱晓  
很多年前,柴继军还是个摄影记者和图片编辑。他每天处理全国各地摄影师用特快专递寄来的照片,但由于题材和版面所限,实际上能用的只有十分之一甚至更少,剩下的往往会被扔掉,柴继军觉得这样做非常可惜,因为他知道,拍一组好图片很不容易,有些甚至是冒着生命危险去拍摄的。于是,他试着把一些照片转给其他媒体的同行使用,然后再将稿费邮寄给投稿者。虽然这是在给自己找麻烦,但柴继军觉得这样做很有价值!
[期刊] 中国土地  [作者] 苏建成  
“芝麻”也要“抢”苏建成(朔州市山阴县土地局)某县一房地产公司在建造商品住宅时,贪图豪华、讲求高贵,商品楼房建成后,几乎无人问津。“一个个大西瓜”尽管惹人喜爱、撩人心扉,却无人敢动“刀”品尝。几百万资金难以发挥其应有的效益,令人痛惜而感慨不已。这几年...
[期刊] 国际贸易问题  [作者] 罗永泰  
从营销创新的角度探讨了隐性营销的支撑体系、传播体系和关系体系。支撑体系是实施隐性营销的前提,传播体系和关系体系是隐性营销体系的主体。通过三者之间有机的互动来创造顾客需求,实现企业营销目标与顾客需求的良性循环。
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