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[期刊] 华北农学报
[作者]
吕复兵 张献龙 刘金兰
以陆地棉品种“珂字２０１”为材料，比较了ＩＡＡ＋ＫＴ和２，４－Ｄ＋ＫＴ在愈伤诱导和悬浮培养中的效应，结果表明，愈伤组织诱导中，ＩＡＡ和２，４－Ｄ表现为正效应，且２，４－Ｄ的效应强于ＩＡＡ；ＫＴ表现为负效应；胚性愈伤悬浮培养中，３种激素都表现出负效应。以胚性细胞悬浮系为材料进行了原生质体的分离和培养试验，分离原生质体的最佳酶组合为纤维素酶（ＯｎｏｚｕｋａＲ１０）３％＋果胶酶（Ｐｅｃｔｉｎａｓｅ）１．５％，原生质体培养的最佳激素组合为ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ，适当提高原生质体密度有利于原生质体培养。光照，温度等物理因素对原生质体培养也有明显影响。原生质体再生的愈伤组织直接在无激素的...
关键词：
陆地棉,原生质体培养,植株再生
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
朱根发 葛台明 余毓君
用缩短继代间隔的方法，从小麦３５８１６幼穗愈伤组织中筛选到由小颗粒组成的松脆型胚性愈伤组织，并建立了胚性细胞悬浮系。从中分离的原生质体培养在经高压灭菌的改良ＭＳ或改良Ｎ６培养基中，得到了大量的再生愈伤组织和胚状体。经直接分化或增殖后分化均得到再生植株。生长迅速的再生愈伤组织具有较高的植株再生能力；将再生细胞团增殖后分化能明显提高植株再生率和再生植株数。随着悬浮培养时间的增加，原生质体培养中直接胚胎发生途径将减少。
关键词：
小麦 胚性细胞悬浮系 原生质体 植株再生
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
侯喜林 曹寿椿 佘建明 蔡小宁 陆维忠
用 1 0g/ 10 0mL纤维素酶 (OnozukaR 10 ) ,0 1g/ 10 0mL果胶酶 (MecerozymeR 10 )及 10mmol/LCaCl2 ·2H2 O ,0 7mmol/LKH2 PO4 和 0 5mol/L甘露醇的混合酶液 ,从 14～ 18d苗龄的不结球白菜子叶上分离出高产率的原生质体。原生质体培养在KM8P1附加 2 ,4 D 0 5mg/L、 6 BA 0 2 5mg/L、NAA 0 5mg/L、葡萄糖 9 0g/ 10 0mL、蔗糖 1 0g/ 10 0mL、半乳糖0 0 3g/ 10 0mL液体培养基上 ,分裂旺盛。形成愈伤组织后经芽诱...
关键词：
不结球白菜 子叶 原生质体培养 植株再生
[期刊] 林业科学
[作者]
王影 黄敏仁 陈道明 卫志明 孙勇如
从小叶杨（Ｐｏｐｕｌｕｓｓｉｍｏｎｉｉ）胚性悬浮细胞分离得到大量有活力的原生质体，产量高达３．８×１０７ｇ－１ＦＷ。高密度（３×１０６／ｍＬ）液体浅层培养可促进小叶杨原生质体的分裂和生长；以葡萄糖为唯一碳源的Ｋｍ８ｐ培养基，有利于原生质体的持续分裂；在培养基中添加有机氮，有助于提高原生质体的植板率。原生质体形成细胞团后，逐步降渗和分皿培养，能有效促进细胞团的持续分裂。愈伤组织在不同分化培养基上的分化频率存在着明显的差异，同工酶分析说明，分化能力强的愈伤组织，其ＴＣＡ循环和磷酸戊糖途径较为活跃，ＧＯＴ、ＥＳＴ和ＰＥＲＯＸ的活性比较高。当芽伸长到２—３ｃｍ时，从基部切下转移到无激素的１／２ＭＳ培养...
关键词：
小叶杨,原生质体培养,植株再生,同工酶
[期刊] 华北农学报
[作者]
李俊兰 张寒霜 王海波 高鹏 贾景日 黄国存 郝企信 魏建昆
通过对棉花体细胞胚胎发育过程的观察发现，其发育的四个时期即球形期，心形期，鱼雷期和子叶期均有白化现象。成熟期的白色子叶胚比绿色子叶胚在成苗培养基上生长快，且形成再生植株的频率高。
关键词：
陆地棉,体细胞胚,白化,植株再生
[期刊] 中国农业科学
[作者]
文峰 肖诗鑫 聂扬眉 马秋香 张鹏 郭文武
【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol.L-1TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol.L-1TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1—2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张家明 刘金兰 孙济中
陆地棉品种柯字201悬浮细胞团接种在成热培养基上,两周后形成大量1—3mm长的胚状体,20天就有胚状体萌发,51—55天为萌发高峰,以后迅速减少,但直到70天仍有少数胚状体萌发。46—55天之间萌发的胚状体数占总数的54.9%。胚状体萌发前7—10天逐渐失绿白化,萌发后2—3天又恢复绿色。萌发胚在成苗培养基上培养2个月长成具5—10片真叶的再生植株,通过水培技术已移栽成活50多株。再生植株在子叶期就表现出形态变异,以子叶变异最丰富,子叶数有1片、2片以至3—4片;子叶形状有正常的、杯状的及不规则的等多种类型。还观察到大量连体胚。在27株成熟植株中,发现6株不育株。不育株花粉粒体积小,壁无刺、形...
关键词：
陆地棉 胚状体萌发 植株再生 变异
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘继红 徐小勇 邓秀新
原生质体再生植株发生变异的现象较为普遍 ,已涉及到很多作物 ,变异的类型较多 ,主要有染色体变异、形态和农艺性状变性、抗性变异等 ,产生变异的机理主要有遗传和生理两方面 ,此类变异有其优点和不足 ,但无庸置疑的是原生质体再生植株遗传变异为植物育种提供了大量可供选择和利用的材料。
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙京燕 李伟明 张寒霜 赵俊丽 尹晓琳 王立安
选用低酚陆地棉无菌苗下胚轴为材料进行全固体组织培养,直接诱导获得了胚性愈伤组织,并进一步分化为再生植株。结果表明,激素是影响棉花直接体细胞胚胎发生的重要因素。MSB培养基中添加2,4-D有利于愈伤组织的形成,却不能直接诱导获得胚性愈伤组织。MSB培养基中添加IBA和BA也不能直接诱导获得胚性愈伤组织。MSB培养基附加适当浓度的IBA和KT能直接诱导出胚性愈伤组织。最适激素组合(1.0 mg/L IBA,0.5 mg/L KT)能使诱导棉花下胚轴产生大量胚性愈伤组织,并且在3个月内就可肉眼观察到不同发育时期的胚。MSB培养基中附加1.0 g/L谷氨酰胺和0.5 g/L天门冬酰胺有利于胚萌发成苗。...
关键词：
棉花 低酚 体细胞胚胎发生 植株再生
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孙玉强
根据增加棉花基因库多样性的迫切需要,棉花改良计划正在转向于多种分子育种技术的应用和资源的利用。丰富的棉花野生种(Gossypiumspp.)是栽培棉遗传改良重要的种质资源和更新资源,并成为宝贵的遗传资源库,野生棉研究利用对栽培棉的遗传改良有着重大的现实和理论意义及潜在的应用
[期刊] 华北农学报
[作者]
王怀名 A.舍弗尔-门沃尔 G.米克斯-瓦格纳
研究了8个杂种一代嫩茎花椰菜品种,在5个品种中得到了细胞分裂、多细胞团和愈伤组织;1个品种的愈伤组织再生了新枝。离体繁殖的无菌苗叶片剪成细条,酶液由2％纤维素酶和1％解析酶组成,21℃、50转/分摇床上分离3小时。0.5M蔗糖液漂浮纯化。接种于1％琼脂糖滴上,滴加液体培养基,25℃、光照16小时、光强4000lux下培养。3～5天细胞分裂;1周左右形成4个或更多细孢团;3～5周形成小愈伤组织。愈伤组织达2～3mm时,移到愈伤组织固体培养基上;直径达1cm时,移到固体分化培养基上,分化出根和新枝。
关键词：
原生质体培养 新枝再生 嫩茎花椰菜
[期刊] 林业科学研究
[作者]
李正红 孙振元 刘秀贤 彭镇华
用纤维素酶、果胶酶、甘露醇的混合酶液提取地锦和五叶地锦无菌苗幼叶、五叶地锦胚乳愈伤组织及地锦幼胚愈伤组织的原生质体,对影响原生质体提取得率及活力因素进行分析,对不同材料原生质体得率进行比较,对提取的原生质体进行液体浅层、固液结合及固体等方式培养,对原生质体形成的愈伤组织以MS和改良B5培养基附加不同浓度NAA、6 BA、2,4 D、PEG、KT、ZT等进行分化培养。试验结果表明:纤维素酶对原生质体提取得率有极显著影响,适宜地锦幼叶原生质体提取的酶液组合为:纤维素酶0.5%、果胶酶0.3%、甘露醇0.6mol·L-1、酶解8h;不同材料原生质体提取得率有显著差异;仅五叶地锦胚乳愈伤组织来源的原生...
关键词：
地锦 五叶地锦 原生质体 培养
[期刊] 水产学报
[作者]
谢恩义 马家海
为了开发礁膜人工育苗的新技术,以4％果胶酶和2％纤维素酶的甘露醇溶液,分离酶解经无菌处理的礁膜叶状体,在40mmol·L~(-1)CaCl_2,0.7mol·L~(-1)甘露醇,pH5.5,温度28℃,摇床速度50r·min~(-1)旋转振荡3h的条件下,1.0g湿重礁膜可获原生质体约2×10~6个。原生质体分离后依次用比重为1.030、1.026、1.022的消毒海水(添加N、P、Fe~(2+)、IAA、KB、Vit C)培养,2d后已形成明显的再生细胞壁,3～4d后细胞开始分裂,8d后形成由4～8个细胞组成的细胞团,以后原生质有不同的发育形态,较常见的是形成由一共同胶质膜包被的类似亲本的叶...
关键词：
礁膜 原生质体 酶解 分离 培养
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张航宁 吴琴生 刘大钧
原生质体培养和植株再生技术是药用植物生物工程的基础，药用植物原生质体的来源，酶解的条件，培养基的组成，培养的方法等对原生质体培养有着很大的影响。目前，原生质体培养在药用植物高产细胞系的筛选、体细胞杂交和基因工程方面已取得了长足的进展。
关键词：
药用植物 原生质体 应用
[期刊] 西南农业学报
[作者]
雷开荣 U.Ryschka E.Klocke
用酶法分离甘蓝下胚轴原生质体和萝卜叶肉原生质体, 对供体原生质体(萝卜) 进行融合前单因素(酶EcoRI) 或双因素复合处理(酶EcoRI+ UV0.035-0.105J/cm 2), 用PEG法诱导甘蓝与萝卜属间非对称性原生质体融合。结果表明,(1)不同处理方法对植株再生率有明显影响,对称性融合植株再生率为8.5% ,非对称性融合植株再生率低3个百分点; 单因素处理植株再生率达11% , 双因素复合处理植株再生率只有2.3% 。在双因素复合处理中,尽管各处理间植株再生率有显著差异, 但紫外线强度与植株再生率间无明显的规律变化; (2) 双因素复合处理再生植株具有较低的相对DNA含量,通道数为...
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