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[期刊] 中国农业科学  [作者] 卞建春  郭恒杰  王捍东  刘学忠  袁燕  任建新  刘宗平  王宗元  康世良  武瑞  
【目的】通过对镉暴露家兔睾丸和肝脏中小分子金属结合蛋白分离与比较,揭示动物睾丸组织镉高敏感性的机制。【方法】6月龄雄性青紫兰家兔经皮下染镉,9d后将兔子杀死,制备睾丸和肝脏匀浆超离上清液,用Sephadex G-75凝胶层析法进行蛋白分离,经双波长(280nm和254nm)测定紫外吸收和原子吸收分光光度法测定Cd、Zn元素含量两种方法确定洗脱液小分子量金属结合蛋白峰管;通过试验比较它们的紫外扫描特性、热稳定性、镉锌元素比值和氨基酸组成。【结果】肝脏分离蛋白分子量为6.0~10.0kD,有254nm特征紫外吸收峰,OD250nm/OD280nm的值为13.13,有较好的热稳定性,不被无水乙醇抽提...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 吴小胜  魏帅  魏益民  郭波莉  杨鸣琦  刘晓玲  
【目的】研究亚慢性镉(Cd)暴露对五指山猪(Wuzhishan Pig,WZSP)肝脏生化指标的影响,寻找亚慢性镉暴露致肝脏损伤的敏感性生化指标,为镉肝脏毒性的监测及预防提供科学依据。【方法】将3月龄健康WZSP 20头随机分为5组,分别饲喂添加镉0.0 mg.kg-1(Ⅰ组)、0.5 mg.kg-1(Ⅱ组)、2.0 mg.kg-1(Ⅲ组)、8.0 mg.kg-1(Ⅳ组)及32.0 mg.kg-1(Ⅴ组)的全价饲料,持续喂养100 d。试验期,每20 d测1次饲料镉含量,血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和γ-谷氨酰胺基转移酶(γ-GGT)活性;试验结束后测定血液和肝脏中镉的...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 王长康  艾启青  黄小红  刘建昌  
山麻鸭的睾丸和肝脏经硫酸铵分级沉淀分离、DEAE-32离子交换柱层析,获得的肝脏N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC3.2.1.52)比活力为85.30 U.mg-1,纯化倍数为10.48.睾丸NAGase再进一步通过Sephacryl S-300凝胶过滤纯化,获得的NAGase比活力为5537.00 U.mg-1,纯化倍数为59.20.睾丸NAGase经聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,出现单一蛋白带,测定等电点pI为5.05.以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)为底物研究酶催化底物水解的反应动力学.结果表明:山麻鸭睾丸和肝脏NAGase的最适pH分别为5....
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王明发  田亚东  钟翔  康相涛  冯培刚  王恬  
为了研究肉鸡肝脏中金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量和MT mRNA表达水平作为评定锌源生物利用率的有效性,在固始鸡和AA肉鸡饲料中添加不同水平的饲料级硫酸锌(ZnSO4·H2O)、氧化锌(ZnO)和氨基酸络合锌(ZnAA),分别测定了2、3、4、5和6周龄末肝脏中MT含量和MT mRNA的表达水平。结果表明:品种间肝脏中MT含量和MT mRNA表达水平差异极显著,固始鸡高于AA肉鸡。锌源和锌添加水平对所测定指标产生显著影响,氨基酸络合锌显著高于硫酸锌,这两种锌源极显著高于氧化锌;随着锌添加水平增加,肉鸡肝脏中MT含量和MT mRNA表达水平提高,锌水平之间差异极显著。4周...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张瑜  郭荔  豆丹丹  任伟龙  王丽平  
[目的]P-糖蛋白(P-gp)是影响底物药物口服生物利用度至关重要的因素。本试验旨在探究脂多糖(LPS)对猪肝脏、肾脏和小肠组织中P-gp定位和表达的影响,为临床合理有效用药提供理论支持。[方法]采用免疫组织化学SABC法结合DAB显色技术,用抗P-gp的单抗C219对相关组织的P-gp进行定位,进一步采用Image-ProPlus软件对猪肝脏、肾脏、空肠和回肠中P-gp的表达进行半定量分析,检测LPS处理对P-糖蛋白定位和表达的影响。[结果]猪肝脏组织中的P-gp均主要分布于肝细胞间的胆小管细胞膜上,LPS处理3h后P-gp表达量显著上升(P<0.05),6h后可降至正常水平。猪肾脏中P-g...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 钟万福  李加琪  杨承忠  王翀  张豪  张爱玲  
【目的】克隆仙湖肉鸭肝脏基础型脂肪酸结合蛋白Lb-FABP基因的cDNA,并进行组织表达谱和蛋白结构分析,为肉鸭的分子育种提供基础资料。【方法】通过比较基因组学,采用RT-PCR和RACE技术,获得了Lb-FABP基因的cDNA序列全长序列;并采用半定量PCR分析了Lb-FABP基因在16个组织的表达;通过生物信息学方法预测了Lb-FABP基因的蛋白结构。【结果】仙湖肉鸭Lb-FABP基因的cDNA全长548bp,包括97bp长的5′非翻译区(5′UTR)和70bp长的3′非翻译区(3′UTR)以及381bp开放阅读框(ORF,含终止密码子)。Lb-FABP基因组序列包括4个外显子和3个内含子...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 陈璐  杨臻  徐锦华  乔璐  宋金龙  孙慧武  穆迎春  
除虫脲(diflubenzuron, DFB)是一种常用的杀虫剂,其代谢物残留会威胁水生动物及人体健康。为探究水产动物响应DFB胁迫的分子机制,本研究以鲤(Cyprinus carpio)为对象,选定0.1 mg/L和1.0 mg/L的药浴浓度对鲤进行15 d暴露实验。采用RNA-Seq技术对肝脏开展转录组测序,以P_(adj)
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘明妮  胡云  方茜  马文强  赵茹茜  
[目的]研究慢性皮质酮处理后肉鸡生长性能及肝脏铁稳态的变化。[方法]选取30只49日龄如皋黄羽雄性肉鸡,随机分为对照组和皮质酮组。肉鸡饲喂玉米豆粕型日粮,对照组肉鸡注射15%(体积分数)乙醇0.4 mL·kg~(-1),皮质酮组肉鸡注射4.0 mL·kg~(-1)皮质酮,连续注射7 d。记录试验起始及结束时肉鸡体质量,检测肉鸡血清及组织铁代谢指标、十二指肠和肝脏铁代谢相关基因及蛋白的表达。[结果]与对照组相比,皮质酮暴露极显著抑制肉鸡生长(P<0.01),且极显著增加肉鸡血清铁含量,提高了总铁结合力、不饱和铁结合力和转铁蛋白饱和度(P<0.01)及上调了肝脏转铁蛋白(TF)表达(P<0.01),但降低了肝脏铁含量(P
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王帅  贾琦珍  陈根元  王连群  张玲  
研究小花棘豆中毒对家兔睾丸生精细胞凋亡的影响,进一步探讨小花棘豆的中毒机理。将24只雄性家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30 mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60 mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含量90 mg/kg)的比例添加小花棘豆,对照组仅饲喂苜蓿干草,试验期70 d。分别于攻毒后第14、35、70天每次每组随机采集2只家兔的睾丸,通过TUNEL法定位,Hoechst 33258荧光染色细胞核,流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期。从第35天开始,试
[期刊] 中国水产科学  [作者] 刘迪秋  葛锋  陈朝银  李忠  梁宏伟  邹桂伟  
采用半定量RT-PCR分析重金属Cu、Cd在不同剂量以及不同处理时间下对鲫(Carassiusauratus)肝脏组织基因表达的影响。共检测了过氧化氢酶、热激蛋白、金属硫蛋白等17个逆境胁迫相关基因。9个Cu处理中,GSTα、GSTπ、CAT在鲫肝脏中诱导表达,其余基因的表达特性属于中间型,即在一些处理中表达上调,另一些处理中表达下调。Cd处理中,只有GSTα属于完全的诱导表达型基因。HSP30、GR以及GPx4a在Cd胁迫的鲫肝脏中表达受抑制,其余基因的表达属于中间型。虽然Cu、Cd胁迫对各基因转录水平的的影响不尽相同,多数处理中Cu诱导基因表达的程度略高于Cd。实验结果还显示,本研究设置的...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 董书伟  高昭辉  申小云  薛慧文  荔霞  
【目的】分离和鉴定纳米铜对大鼠肝脏毒性相关蛋白过氧化氢酶(catalase,CAT),探讨CAT在毒性发挥中的作用,为揭示纳米铜对肝脏毒性机制提供依据。【方法】应用2-DE技术和PDQuest 8.0软件在大鼠肝脏蛋白组中筛选纳米铜对肝脏毒性差异蛋白,经质谱鉴定后进行生物信息学分析。【结果】筛选到下调的差异蛋白点6602和7702与肝毒性相关,鉴定均为CAT蛋白;其性质稳定,有一定亲水性,无信号肽,定位于细胞质,可能属于非分泌性蛋白,含有过氧化氢酶活性位点64FDRERIPERVVHAKGAG80和过氧化氢酶亚铁血红素配合基位点354RLFAYPDTH362等功能位点;无规则卷曲、α螺旋和延伸...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈任孝  李洪琴  罗莉  郭玉阳  朱根廷  罗浩  
以血粉复合发酵蛋白(Fermented blood meal protein,FBP)分别等量替代对照组日粮中37.5%、62.5%和100%的鱼粉,研究了FBP对彭泽鲫(Carassius auratus)的生长性能和肝脏功能的影响。结果显示,随着替代比例的增加,彭泽鲫的增重率呈下降趋势,饲料系数依次上升,但替代37.5%鱼粉组的增重率和饲料系数与对照组差异不显著;肠道消化酶活性、肝脏谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性和GPT/GOP比值随替代比例的增加而下降,碱性磷酸酶活性呈上升趋势。在37.5%替代比例下,彭泽鲫肝脏抗氧化能力与对照组差异不显著。本实验说明,FBP替代鱼粉的比...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 牟玉超  梁萌青  郑珂珂  卫育良  
本研究利用低分子水解鱼蛋白设计了4组等氮等能的高植物蛋白饲料,研究不同水平低分子水解鱼蛋白对大菱鲆(ScophthalmuS maximuS l.)幼鱼[(4.16±0.01)g]生长性能、鱼体组成及肝脏中类胰岛素生长因子Ⅰ受体(inSulin-like growth factor receptor,igf-ir)表达的影响。水解鱼蛋白分别替代总蛋白的5%(uf-5)、10%(uf-10)、20%(uf-20)的鱼粉,无添加fph组为对照组(uf-0),用这4种饲料饲喂大菱鲆幼鱼84 d,结果显示,uf-0、uf-5和uf-10组的增重率、特定生长率无显著差异(p>0.05),但显著高于uf-...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 宋志东  王际英  李培玉  乔洪金  张利民  郝甜甜  
为揭示饲料中添加豆肽对星斑川鲽(Platichthys stellatus)幼鱼肝脏代谢产生的影响,利用大豆蛋白肽替代24%的鱼粉并以全鱼粉饲料为对照形成两种等氮等能的实验饲料,粗蛋白为(43.98±0.14)%、能量为(19.89±0.08)k J/g。将240尾幼鱼分为两组,每组3个平行(40尾/桶),分别投喂两种饲料50 d后,提取肝脏蛋白进行双向电泳并用PDQuest分析差异蛋白。结果显示,在p H 4-7、分子量14.4-97.4 k Da范围内,共检测到448-470个肝脏蛋白点,有14个蛋白的表达呈两倍以上的差异,其中3个为结构蛋白(中间纤维蛋白、II型细胞骨架8-样异构体X2、...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 宋爽  严亮  王宣军  郝淑美  盛军  
本文采用双向电泳技术,鉴定昆明鼠在饮用普洱茶后肝脏蛋白质组变化。结果表明,采用pH3~10胶条未达到理想的分离效果,在采用窄范围pH 4~7胶条电泳后得到16个差异蛋白,其中15个蛋白经质谱鉴定得到蛋白的信息,主要尿蛋白(Major urinary protein,MUP-1)表达显著上调,该蛋白可以作为能量代谢的生物标志物,并在近年来被证明具有调节代谢的作用。饮用普洱茶后小鼠肝脏中MUP-1上调,说明普洱茶在小鼠糖代谢中具有促进作用,这些结果从另一个角度解释过去研究中普洱茶保健作用的机理。
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