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[期刊] 中国农业科学
[作者]
王宝维 陈苗璐 王秉翰 张名爱 葛文华 程凡升 岳斌
【目的】研究不同水平锌对5—15周龄鹅免疫抗氧化功能与金属硫蛋白-Ⅰ(MT-I)mRNA表达量的影响及相互关系,以科学地确定鹅饲粮中锌的需要量。【方法】试验随机选用29日龄体重相近的青农灰鹅360只(P
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王明发 田亚东 钟翔 康相涛 冯培刚 王恬
为了研究肉鸡肝脏中金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量和MT mRNA表达水平作为评定锌源生物利用率的有效性,在固始鸡和AA肉鸡饲料中添加不同水平的饲料级硫酸锌(ZnSO4·H2O)、氧化锌(ZnO)和氨基酸络合锌(ZnAA),分别测定了2、3、4、5和6周龄末肝脏中MT含量和MT mRNA的表达水平。结果表明:品种间肝脏中MT含量和MT mRNA表达水平差异极显著,固始鸡高于AA肉鸡。锌源和锌添加水平对所测定指标产生显著影响,氨基酸络合锌显著高于硫酸锌,这两种锌源极显著高于氧化锌;随着锌添加水平增加,肉鸡肝脏中MT含量和MT mRNA表达水平提高,锌水平之间差异极显著。4周...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
栾新红 孙长勉 曹中赞 刘梅 曹敏建
通过检测鹅血清部分抗氧化指标,探讨玉米蛋白多肽对鹅抗氧化功能的影响。选择1日龄昌图豁鹅240只,采取单因子完全随机设计,随机分为4组,分别按每kg饲料添加500,300,100mg玉米蛋白多肽设置高、中、低剂量3个剂量组,不添加玉米蛋白多肽设置为对照组。饲养30,60d,采集鹅血,制备血清,采用紫外分光光度法检测鹅血清中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果表明:随着日龄的增加,呈现鹅血清T-AOC水平和SOD活性增加、MDA含量减少的趋势。鹅饲料中较长时间(60d)添加玉米蛋白多肽可使其血清T-AOC水平增加,且与添加剂量正相关;而低剂量水平(1...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王顺才 梁东 马锋旺
【目的】克隆平邑甜茶金属硫蛋白(metallothionein,MT)基因,探讨该基因对逆境的响应机理,为苹果抗逆分子育种提供依据。【方法】采用电子克隆和RT-PCR技术从平邑甜茶叶片中克隆MhMT2基因,利用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推测氨基酸序列进行分析,通过定量PCR技术研究在胁迫条件和激素处理下该基因在叶片中的表达模式。【结果】平邑甜茶MhMT2基因cDNA全长534 bp,具有1个243 bp的完整开放阅读框,编码含80个氨基酸的多肽,其分子量为7.87 kD。同源性比对显示,MhMT2编码的氨基酸序列与其它植物的MT2蛋白有很高的相似性,其中与小金海棠的同源性最高,达到9...
关键词：
平邑甜茶 金属硫蛋白基因 克隆 表达
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
魏华 佟金凤 赵莹莹 李晓东
为系统研究重金属离子(镉和锌)诱导的金属硫蛋白在中华小长臂虾(Palaemonetes sinensis)不同组织(肝胰脏、肌肉)中的表达,采用水相暴露法对中华小长臂虾进行镉(0,0.05,0.08,0.10和0.15mg·L~(-1))与锌(0,5,8,15和18mg·L~(-1))的急性染毒试验。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法分析不同浓度的镉、锌离子在不同染毒时间下(0,24,48和96h),诱导金属硫蛋白(metallothionein,MT)在中华小长臂虾不同组织中的表达差异。结果表明:镉和锌诱导中华小长臂虾MT的表达存在组织差异性和时间效应关系。在肌肉中镉离子和锌离子不能诱导MT的表达。在肝胰脏中,0.05mg·L~(-1)的镉离子可诱导MT的表达,而5mg·L~(-1)的锌离子才能达到相同的效果。两种离子相比较,镉对中华小长臂虾的MT诱导能力更强。时间效应表现为染毒48h肝胰脏中MT表达量最高,诱导表达量随暴露时间的增加而加大,但达到一定程度后即呈下降至稳定趋势。两种重金属对中华小长臂虾肝胰脏MT的诱导能力:Cd~(2+)>Zn~(2+);MT在中华小长臂虾不同组织中的分布顺序为:肝胰脏>肌肉。染毒后中华小长臂虾肝胰脏中MT的表达有一定的时间效应关系,48h的表达量最高。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
秦平伟 段明革 孙文婷 李名扬 徐晶
金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含Cys,能够结合重金属的低分子量蛋白质,广泛分布于生物界。在构建好的蜡梅花cDNA文库并进行EST分析的基础上,通过随机克隆测序得到了1个蜡梅金属硫蛋白的cDNA,命名为CpMetallothionein(CpMT)。CpMTcDNA全长为1083bp,基因内部含有一长度为240bp的开放阅读框,可编码79个氨基酸残基。将CpMT插入原核表达载体pET-32a,并转化Origami2感受态细胞。诱导表达产物经SDS-PAGE结果显示,目的蛋白约为30kD。表达的融合蛋白以包涵体和可溶性蛋白2种形式存在,用His-Bind蛋白纯化回收试...
关键词：
金属硫蛋白 克隆 序列分析 原核表达
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
田丽丽 罗颉 杨鸣琦 王久涛 史嘉瑜
【目的】研究鹿茸对小鼠脑组织抗氧化指标和凋亡相关蛋白表达的影响,为鹿茸的抗氧化和抗凋亡作用研究提供资料。【方法】选用48只6周龄雌性昆明小鼠,随机分为正常组(灌胃生理盐水,n=12)和高、中、低剂量鹿茸冻干粉组(分别灌胃鹿茸冻干粉1,3和5g/kg,n=12)。各组分别灌胃63d,第64天处死小鼠并取材。用试剂盒检测小鼠脑组织匀浆液中单胺氧化酶(Monoamine oxidase,MAO)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的...
[期刊] 水产学报
[作者]
郑金仙 周东生 魏山山 熊云凤 孔有琴 张易祥 赵建华 刘艳 戚常乐 丁志丽
为探讨动植物蛋白对日本沼虾生长、肌肉组成、抗氧化、TOR信号通路及食欲调节相关基因表达的影响，实验配制了3组等氮等能饲料，分别为鱼粉组(FM)、混合植物蛋白组(豆粕，菜粕，玉米蛋白粉)(PPB)和混合植物蛋白添加氨基酸组(PPB/Aa)，投喂饲养日本沼虾8周。结果发现，PPB和PPB/Aa组日本沼虾增重率和摄食率显著低于FM组，而饲料系数显著高于FM组，各组之间成活率和肌肉必需氨基酸组成无显著差异；FM组肝胰腺丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著低于PPB组和PPB/Aa组，各组谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)无显著差异，PPB与PPB/Aa组血清碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和ALT的活性均显著高于FM组；与FM组相比，PPB与PPB/Aa组显著降低了雷帕霉素靶蛋白(TOR)、核糖体蛋白S6激酶(S6K)及神经肽(NPY)基因的表达，但各组瘦素(leptin)基因的表达无显著差异。研究表明，鱼粉与混合植物蛋白对日本沼虾肌肉中氨基酸组成无显著影响，但混合植物蛋白源降低了虾的生长和抗氧化能力及TOR信号通路与NPY基因表达，且添加氨基酸不能缓解混合植物蛋白所引起的生长抑制、氧化应激及蛋白质合成和食欲相关基因表达的降低。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘明美 齐斌 占今舜 陈银岳 赵国琦
为研究大豆低丰度蛋白提取物对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响,选用21日龄断奶ICR雄性仔鼠180只,随机分为5组,每组36只,试验期28d,每天灌胃大豆低丰度蛋白提取物200μL(以提取物中蛋白含量计,分别为0、0.5、1.0、2.0、4.0mg)。结果表明:1)试验第7天时,处理组小鼠的白细胞、淋巴细胞和中性粒细胞数目均高于对照,且D_(4.0mg)组极显著高于对照(P<0.01)。2)试验第7和28天时,D_(4.0mg)组小鼠的脾脏指数均高于其他试验组;第7天的处理组小鼠脾脏IL-2、TNF-α基因
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
范秋丽 陈志龙 谭淑君 王君雁 茅沈丽 林泽铃 蒋守群
为研究小麦-豆粕-花生粕型基础饲粮中添加不同水平单宁复合蛋白对1～48日龄黄羽肉鸡生长性能、血浆生化指标、免疫功能、抗氧化能力以及脂代谢的影响，540只初始体重为(40.33±0.05) g且健康状况良好的1日龄快大型麻黄肉公雏按照体重一致原则随机分为对照组(基础饲粮),单宁复合蛋白1组(基础饲粮添加300 mg/kg单宁复合蛋白),单宁复合蛋白2组(基础饲粮添加500 mg/kg单宁复合蛋白)共3个处理组，每组6个重复，每个重复30只鸡。试验期48 d。结果表明：1)不同处理组之间肉鸡生长性能差异不显著(P>0.05)。2)与对照组相比，单宁复合蛋白1、2组血浆中谷丙转氨酶(ALT)活性和尿酸(UA)含量均显著升高(P<0.05),且单宁复合蛋白2组血浆中葡萄糖(GLU)含量显著降低(P<0.05),单宁复合蛋白1组血浆中总胆红素(TBIL)含量显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比，空肠黏膜中白细胞介素6(IL-6)含量在单宁复合蛋白1组中显著降低(P<0.05)。4)与对照组相比，单宁复合蛋白2组血浆中微量丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),同时，肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量均显著升高(P<0.05)。5)与对照组相比，肝脏中雌二醇(E2)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量以及脂肪合成酶(FAS)活性在单宁复合蛋白1、2组中均显著降低(P
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
程杰 吕子豪 林同
为阐明硫氧还蛋白过氧化物酶Tpx基因的表达模式并研究温度胁迫对其表达的影响,从黄野螟(Heortia vitessoides)成虫转录组文库中筛选获得黄野螟硫氧还蛋白过氧化物酶Tpx基因全长cDNA,命名为HvTpx(GenBank:MF521978)。序列分析显示,该序列开放阅读框长度为588bp,共编码195个氨基酸。HvTpx属于典型2-Cys类Tpx。HvTpx的氨基酸序列与棉铃虫(Helicoverpa armigera)同源性最高,为87%,与其他昆虫的同源性在75%以上。黄野螟与棉铃虫处在系
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
齐丽娜 蒋静乐 陶生祥 张婧菲 张莉莉 王恬
[目的]本试验旨在探讨宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation, IUGR)对猪胎盘细胞增殖、凋亡及抗氧化基因和蛋白表达的影响。[方法]从刚分娩的母猪中选择正常初生重(normal birth weight, NBW)和IUGR仔猪对应的胎盘各5个,分为对照组和宫内发育迟缓组。采用免疫组化法检测胎盘细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,采用TUNEL法检测胎盘细胞凋亡,采用荧光定量PCR检测胎盘NRF2、HO-1、NQO1、SOD1、SOD2、GCLC和GCLM基因的表达,用Westen blot(WB)检测胎盘抗氧化蛋白NRF2和HO-1的表达。[结果]对照组可以观察到较强的PCNA染色,宫内发育迟缓组PCNA染色较弱。IUGR组和对照组凋亡细胞指数分别为19.63%与12.56%,IUGR组细胞凋亡率明显高于对照组(P0.05)。WB结果显示,对照组与宫内发育迟缓组NRF2和HO-1蛋白表达量差异不显著(P>0.05)。[结论]IUGR会降低猪胎盘细胞增殖,增加猪胎盘细胞凋亡且降低猪胎盘抗氧化基因的表达。
关键词：
宫内发育迟缓 胎盘 增殖 凋亡 抗氧化
[期刊] 水产学报
[作者]
刘波 明俊超 谢骏 戈贤平 徐跑 何义进 周群兰 潘良坤 周传朋
将罗氏沼虾随机分成5组,每组3个平行,每个平行1000尾,第1组为对照组,投喂基础日粮;另外4组为试验组,在基础日粮中分别添加0.05%、0.1%、0.2%、0.4%大黄蒽醌提取物。饲养10周后,对罗氏沼虾进行连续35℃高温应激48h,测定肝胰腺总抗氧化能力、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、丙二醛、一氧化氮以及应激蛋白70的mRNA相对含量变化。结果表明:应激前,0.05%组显著提高了肝胰腺过氧化氢酶活性、超氧化物歧化酶活性,显著降低了肝胰腺丙二醛含量;0.2%试验组显著增加了肝胰腺总抗氧化能力、一氧化氮浓度,显著降低了肝胰腺丙二醛含量;0.10%、0.2%试验组显著增加HSP70mRNA的相对含...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
周一凡 孙存鑫 刘波 周群兰 李正中 徐骁迪 王爱民
为探究饲料中茶树油与虾青素对克氏原螯虾(Procambarusclarkii)生长性能、抗氧化能力及免疫相关基因表达的影响,设计了6组等氮等能饲料,分别为基础饲料组(CT)、50 mg/kg虾青素组(AS50)、50 mg/kg虾青素与50 mg/kg茶树油组(AS50+AST50)、50 mg/kg虾青素与100 mg/kg茶树油组(AS50+AST100)、50 mg/kg虾青素与200 mg/kg茶树油组(AS50+AST200)、50 mg/kg虾青素与400 mg/kg茶树油组(AS50+AST400),进行了8周的养殖实验。添加了虾青素后,AS50组与CT组相比,饵料系数显著降低(P0.05),血淋巴及肠道中总抗氧化能力(T-AOC)显著提高(P<0.05),肠道丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),Crustin、Astacidin、CuZnSOD以及HSP70基因表达显著升高(P<0.05)。添加了虾青素与茶树油后,AS50+AST100组末均重,增重率,特定生长率,总抗氧化能力(T-AOC)均显著高于AS50和CT组(P<0.05),肠道丙二醛含量显著低于AS50组和CT组(P<0.05)。HSP70表达量随茶树油含量的提高与对照CT组差异显著(P
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王娟 王桂萍 张红生 夏妍 沈振国
为研究耐铜植物海州香薷的金属硫蛋白(EhMT1)的结构与功能,运用分子生物学方法构建了pGEX-2T-EhMT1重组表达载体,经转化大肠杆菌BL21(DE3)后表达得到大小为33×103左右的融合蛋白GST-EhMT1,与预期结果一致。对融合蛋白诱导表达的温度、时间、IPTG诱导浓度等条件进行了优化,成功构建了能大量表达可溶性GST-EhMT1的优良原核表达体系。诱导表达的融合蛋白经GST-Sepharose亲和层析纯化后,每升菌液获得的可溶性融合蛋白高达70mg。用纯化的融合蛋白免疫新西兰雄兔,制备的抗血清经间接ELISA检测到较高的多克隆抗体效价。蛋白质印迹结果显示,纯化的蛋白质与兔抗血清...
关键词：
金属硫蛋白 原核表达 融合蛋白 抗血清
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