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[期刊] 林业科学研究
[作者]
程华 李琳玲 许锋 王燕 程水源
利用RACE技术从银杏中克隆到过氧化氢酶基因(GbCAT1)的cDNA全长。进化树分析结果表明:GbCAT1和其他物种的CAT源自于相同的祖先。Southern杂交显示:GbCAT1属于1个小的多基因家族。实时定量RT-PCR分析表明:GbCAT1在银杏的根、茎、叶和果中都有表达,在叶中的相对表达量最高,其次为果、茎和根。GbCAT1的转录受到ABA、渗透压、紫外、低温和高温胁迫的诱导。水杨酸处理下,GbCAT1相对表达量迅速降低。CAT1基因在逆境条件下的相对表达变化与环境胁迫有关。
关键词:
银杏 CAT1基因 表达分析
[期刊] 水产学报
[作者]
黄永欢 刘志鸿 吴彪 周丽青 孙秀俊 杨爱国 李东明
采用RT-PCR和C DNA末端快速扩增技术(RAPiD AmPlifiCATioN of C DNA eNDs,RACe)克隆出魁蚶过氧化氢酶(sb CAT)基因C DNA全长序列,该基因全长为2181 bP,包括1431 bP的开放阅读框(oPeN ReADiNg fRAme,oRf),96 bP的5'端非翻译区(UTR)和654 bP的3'-UTR。其中oRf编码477个氨基酸,预测分子量为54 kU,理论等电点为8.03。sb CAT氨基酸序列与其他所选动物的氨基酸序列具有较高的相似性,其相似度为68%~96%,sb CAT氨基酸具有CAT基因家族的特征性序列,包括CAT活性位点,1个...
[期刊] 水产学报
[作者]
仵燕青 肖海东 许凯 徐燕 纪德华 陈昌生 谢潮添
过氧化氢酶(CAT)是植物细胞抗氧化酶的主要成员,在逆境胁迫下的活性氧(ROS)清除中发挥着重要的作用。本研究采用RACE扩增技术克隆获得了坛紫菜CAT基因的全长,被命名为PhCAT(GEnbAnk收录号:kM655303)。该基因全长1983 bP,可编码包含542个氨基酸的多肽,与条斑紫菜CAT基因的序列相似性为83.08%。多序列比对和系统进化树分析结果确认PhCAT属于CAT基因家族。PhCAT基因定量分析结果显示,失水胁迫条件下,PhCAT的基因表达水平只在失水率≥60%时才显著上调;不同时间水平的高温胁迫条件均可诱发PhCAT基因的上调表达。而CAT酶活测定结果却显示,各种水平的失...
关键词:
坛紫菜 过氧化氢酶 基因克隆 表达分析
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘洋 姚艳丽 胡小文 徐磊 邢淑莲 张树珍
斑茅是栽培种甘蔗最重要的近缘物种之一,具有抗逆性强等特点。本文以高粱过氧化氢酶基因(NCBI登录号为XM002437586.1)C DNA序列为探针,对甘蔗属EST数据库进行同源检索、筛选和拼接,后经基因组PCR、分子克隆、序列分析验证成功分离了1个斑茅过氧化氢酶基因DNA序列(EA CAT-1A,GEN BANk登录号为kF864223)。该序列全长3831 BP,包含8个外显子和7个内含子,C DNA序列长为1532 BP,包含10 BP的5’非翻译区(UTR)和43 BP的3’UTR,以及一个1479 BP的开放读码框,编码492个氨基酸,此蛋白序列具有过氧化氢酶保守结构域,属于CAT家...
关键词:
斑茅 过氧化氢酶 基因克隆 同源进化分析
[期刊] 水产学报
[作者]
乔晓静 张卫卫 邵铱娜 赵雪琳 李成华
过氧化氢酶(catalase, CAT)是抗氧化酶体系的主要成员,在维持机体氧化还原平衡、抵御病原感染过程中具有重要作用。为研究CAT基因在软体动物应答病原胁迫过程中的作用,本研究采用RACE技术通过克隆和序列拼接获得了缢蛏CAT基因的全长cDNA序列,并命名为ScCAT。ScCAT基因全长为2840 bp,编码508个氨基酸。序列分析表明ScCAT蛋白含有1个CAT核心结构域(25-410),1个保守的酶活性位点(_(61)FNRERIPERVVHAKGAGA_(78))和1个亚铁血红素结合位点(_(351)RLFSYPDTH_(359))。多序列比对和系统进化树分析结果表明ScCAT属于CAT基因家族,且与无脊椎动物文蛤的亲缘关系最近。组织分布表明ScCAT在所有检测的组织中均能表达,其中在肝胰腺中表达量最高,鳃中次之,血细胞中的表达量最低,分别为闭壳肌的85.67倍(P < 0.01)、50.09倍(P < 0.01)和0.76倍。副溶血弧菌胁迫下,ScCAT在缢蛏肝胰腺中的表达明显上升,且在12 h达到最高值,为对照组的3.56倍(P < 0.01);酶活测定表明副溶血弧菌胁迫显著诱导缢蛏肝胰腺和鳃组织中的CAT活性,为进一步探讨ScCAT的蛋白功能,构建ScCAT原核表达质粒,通过诱导、纯化后发现ScCAT重组蛋白具有显著的CAT酶活性。本研究结果表明ScCAT作为一类重要的抗氧化酶参与了缢蛏体内的免疫应答。
关键词:
缢蛏 过氧化氢酶 基因克隆 表达分析
[期刊] 水产学报
[作者]
严林飞 安昕 包苗苗 何建瑜 吴常文 刘慧慧
为探究过氧化氢酶(catalase,CAT)对大黄鱼机体的保护作用,实验基于大黄鱼基因组序列数据库克隆获得CAT基因1584 bp的完整开放阅读框(GenBank登陆号:KKF-14425.1),该序列编码527个氨基酸残基,包含与其他动物高度保守的酶活性中心序列FDRERIPERVVHAKGA、亚铁血红素结合信号序列RLFSYPDTH、3个催化位点残基His75、Asn148和Tyr358,以及12个NADPH结合位点等,理论分子量为59.98 ku,等电点为8.37。多序列比对显示,大黄鱼CAT氨基酸
[期刊] 华北农学报
[作者]
程华 李琳玲 王燕 程水源
利用RACE技术从银杏中克隆到过氧化物酶基因(GbPOD1,FJ599670)的cDNA全长。GbPOD1基因编码序列为1 092 bp,编码一条长为329Aa的成熟阴离子POD蛋白,预测成熟蛋白分子量为35.8 kDa,等电点为8.10。Southern杂交及进化树分析结果表明,GbPOD1和其他物种的POD源自于相同的祖先,属于植物类型III的POD同工酶编码基因,为多基因家族。RT-PCR分析表明,GbPOD1在银杏的根、茎、叶和果中都有表达,在茎中的相对表达量最高,其次为根和果,而叶部位表达水平最低。植物激素MeJA、金属离子Cu和Cd以及MV和WOU的处理能显著诱导GbPOD1基因的...
关键词:
银杏 POD1基因 表达分析
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
陈颖 杨华 乐利 林芳芝 罗永亚 王俊霖 曹福亮
以银杏悬浮细胞为研究材料,通过向液体培养基中添加0~20.0 m M的H2O2,探讨H2O2处理下银杏细胞黄酮代谢、抗氧化酶及活性氧之间的相互关系。主要结果有:1外源H2O2处理限制了悬浮细胞的生长,但提高了苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性(20 m M第6 d除外)和总黄酮的合成,最高达18.8 mg/g DW(10.0 m M处理)。2低浓度(0.5~1.0 m M或0.5~5.0 m M)的H2O2能够激活SOD和CAT酶,而高于5 m M以上抑制两酶活性,POD活性在10~20 m M较高。0.5~1.0 m M外源H2O2对细胞内源H2O2和MDA(第6 d的20m M除外)的积累影响不...
关键词:
银杏 悬浮细胞 过氧化氢 黄酮 抗氧化酶
[期刊] 华北农学报
[作者]
谷建田 范双喜 宋学锋 欧阳新星
本试验以中蔬5号番茄种子为材料,研究不同老化程度下,种子萌发初期的CAT活性与种子活力的关系。试验结果表明,活力指数与种子内CAT活性显著相关,r=0.995。同时,CAT标准液催化反应速度曲线显示,在有充足的H2O2时,酶活性与O2产量(记录笔走纸高度)之间有极好的线性关系,r=0.997。因此,测定种子萌发初期的CAT活性,是间接评判种子活力的一种可靠方法。
关键词:
番茄种子,过氧化氢酶,种子活力
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
彭道林 谢达平 任文辉 汤剑峰
为了探索酶活性测定的新方法 ,降低酶活性常规测试中干扰因素的影响 ,提高酶活性测定的准确性 ,利用低电势电位差计及热电偶换能器检测过氧化氢酶活性 .结果表明 ,测定时的 H2 O2 质量分数以 9.6 %为好 ,可以用于酶活性从 0 .5 u至 3.5 u酶活力的检测 ;当 H2 O2 质量分数在 2 .4 %~ 7.2 %时 ,酶反应速率与底物浓度有线性关系 ;当底物质量分数超过 9.6 %时 ,酶反应速率显现底物抑制的动力学特征
关键词:
热电偶 过氧化氢酶 反应抑制
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵士诚 孙静文 马有志 汪洪 梁国庆 周卫
【目的】研究镉胁迫对玉米(ZeaMays)幼苗活性氧代谢,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性及其基因表达的影响。【方法】用营养液培养的方法研究了不同镉浓度(0﹑5﹑20和100μmol·L-1)和处理时间(12﹑24﹑48﹑96和168h)下玉米幼苗内活性氧代谢、SOD和CAT活性及其基因表达的变化。【结果】镉处理后植株内超氧自由基(O2-)产生速率迅速升高,24h(叶)或48h(根)后又逐步下降;H2O2随镉浓度和处理时间的增加而大量积累。镉处理的植物SOD活性开始随镉浓度升高,48h后被消耗和抑制逐步下降,但后期100μmol·L-1镉处理的活性仍显著高于其它处理;CAT...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
罗相忠 梁宏伟 李晓晖 周同 张春燕 邹桂伟 崔峰
鲢(Hypophthalmichthys molitrix)是中国特有主要淡水养殖鱼类之一,产量位居淡水鱼类第二位;但鲢喜跳跃,应激反应强烈,操作与运输较为不便。本研究的目的是确定苯唑卡因对鲢麻醉的合适浓度;并在合适浓度下探索鲢肝肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)酶活及部分免疫基因表达特征的影响。实验方法是将鲢放入不同浓度的苯唑卡因溶液中麻醉,确定合适的麻醉浓度,并测定此浓度下鲢肝脏和肾脏中总SOD和CAT活力的变化,以及IL-10、TNF-α、INF-γ、IgM等免疫基因表达的变化。结果表明:苯唑卡因麻醉鲢的合适浓度为28 mg/L。与对照组相比,鲢肝脏中的IL-10基因表达量在麻醉12 h和复苏6 h实验组中显著上升;TNF-α基因表达量在复苏1 h实验组中显著上升;INF-γ基因表达量分别在鲢麻醉6、9、24 h及复苏3 h和6 h实验组中显著变化;IgM基因表达量分别在鲢麻醉9、12、18、24 h及复苏6 h实验组中显著上升。鲢肾脏中的IL-10、TNF-α和INF-γ基因表达量在鲢麻醉组和复苏组中均显著下降;IgM基因表达量在鲢复苏3 h实验组中显著上升。鲢肝脏和肾脏中的T-SOD活力及CAT活力在麻醉组和复苏组中均有显著变化。在鲢肝脏和肾脏中,T-SOD活力呈先下降后上升趋势;在鲢肝脏中CAT活力呈先上升后下降趋势,在鲢肾脏中则呈现先下降后上升趋势,表明苯唑卡因对鲢不同组织酶活反应的特异性。本项研究为鲢麻醉运输、麻醉时鲢肝肾组织抗氧化酶酶活及部分免疫基因表达提供了理论依据。
[期刊] 水产学报
[作者]
施兆鸿 张晨捷 彭士明 王建钢 高权新
将银鲳幼鱼置于盐度14、25、36的海水中96 h,检测不同盐度下银鲳幼鱼血清渗透压、过氧化氢酶(CAT)以及鳃泡膜质子泵(VHA)、Ca2+-ATP酶、碳酸酐酶(CA)活力随着时间推移而变化的情况。结果显示,血清渗透压变化和盐度呈正相关,并出现波动变化,变化范围为271~379 mOsm/kg,96 h时各盐度组血清渗透压均有恢复正常的趋势。高盐度(36)和低盐度(14)组CAT活力都显著升高而后逐渐恢复(P
关键词:
银鲳 盐度 渗透压 ATP酶 碳酸酐酶
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