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[期刊] 林业科学
[作者]
郭红彦 彭方仁 吴青霞 白晋华
依据银杏枝条中32和36ku蛋白质含量的明显季节变化,推测它们是银杏的营养贮藏蛋白质。采用间接免疫组织细胞化学定位技术,对这2种蛋白质进行细胞化学定位。32和36ku蛋白质具有一定的免疫相关性,它们分布在一些皮层薄壁细胞和韧皮部的韧皮薄壁细胞中,存在于这些细胞的小液泡里。研究结果揭示这2种蛋白质的组织分布式样,为这2种蛋白质是银杏的营养贮藏蛋白质提供有力证据。
关键词：
银杏 营养贮藏蛋白质 免疫细胞化学定位
[期刊] 林业科学
[作者]
郭红彦 吴青霞 彭方仁
采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和电子显微镜技术,对银杏枝条营养贮藏蛋白质组分及其动态变化规律进行研究。结果表明:银杏营养贮藏蛋白质主要存在于枝条的树皮和木质部中;当年生枝条含量高于2年生枝条,树皮的含量高于木质部;枝条中营养贮藏蛋白质组分主要是分子质量为36ku和32ku的蛋白质;银杏营养贮藏蛋白质的动态变化分为积累和降解2个阶段,5月中旬新叶形成后即开始积累,12月份达到最高,翌年春季降解满足芽的萌发,至4月上旬逐渐消失。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
郭红彦 吴青霞 彭方仁
采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和电子显微技术,对银杏不同部位的营养贮藏蛋白质组分及其动态变化规律进行了研究.结果表明,银杏营养贮藏蛋白质主要存在于枝条的皮层和木质部中;当年生枝条含量高于二年生枝条,皮层的含量高于木质部;枝条中营养贮藏蛋白质组分主要为36、32、28、23、18和15kD的蛋白质;银杏营养贮藏蛋白质的动态变化分为积累和降解两个阶段,5月中旬新叶形成后即开始积累,12月份达到最高,翌年春季降解满足芽的萌发,至4月上旬逐渐消失.
[期刊] 林业科学
[作者]
彭方仁 郭红彦 吴青霞
采用光学和电子显微镜技术、SDS-PAGE技术、间接免疫酶标光镜定位和胶体金免疫电镜定位技术对银杏枝条中的营养贮藏蛋白质(VSPs)进行分离鉴定,并对其细胞学特性及动态变化规律进行初步研究。研究结果:运用制备型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离并制备银杏32和36ku2种营养贮藏蛋白质抗原,通过免疫新西兰大白兔成功获得银杏32和36ku2种营养贮藏蛋白质的多克隆抗体。银杏VSPs主要分布于落叶期当年生枝条的次生韧皮部细胞中,呈现出团块状、颗粒状和均一状3种形态。在新梢生长期,积累在枝条中的VSPs逐渐降解消失,表现出明显的季节变化。
[期刊] 林业科学
[作者]
吴彩娥 范龚健 李婷婷 吴海霞 徐文斌
为探究银杏营养贮藏蛋白质的结构与功能的关系,采用DEAE-Sepharose FF离子交换色谱和Sephadex G-75葡聚糖凝胶色谱对银杏营养贮藏蛋白进行分离纯化,得到一条36 kDa的蛋白。质谱分析结果表明:该蛋白中的2个肽段序列与大豆贮藏蛋白质(29 kDa)和薯蓣块茎贮藏蛋白质(30 kDa)的部分氨基酸序列吻合。红外光谱结果表明:β-折叠构象是银杏营养贮藏蛋白质的主要二级结构。
关键词：
银杏 营养贮藏蛋白质 分离纯化 结构鉴定
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
徐文斌 吴彩娥 李婷婷 范龚健 贾韶千 彭方仁
以蛋白质提取率为考察指标,选取不同溶液提取银杏营养贮藏蛋白质;运用均匀设计法考察提取时间,提取液pH值、浓度和液料比等对银杏营养贮藏蛋白质提取率的影响,得到了蛋白质提取率的回归模型.经优化筛选后得到如下工艺参数:提取时间为10 h,提取pH为9.0,提取液Tris-HCl浓度为0.25 mol.L-1,提取液液料比为10∶1.在此条件下蛋白质提取率为70.22%.SDS-PAGE电泳分析结果表明,该蛋白质提取液主要含有15、18、23、32、36和44 ku 6种蛋白质.
[期刊] 林业科学
[作者]
陈月异 史敏晶 田维敏
采用光学和电子显微镜技术、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术分离鉴定热带落叶树木印度紫檀营养贮藏蛋白质(VSPs),并采用免疫印迹技术分析包括印度紫檀在内的5种热带树木VSPs之间的免疫相关性。结果表明:印度紫檀VSPs包括4种蛋白质,分子质量分别为33.5、28、21和19.5ku;它们主要分布在枝条木薄壁细胞、木射线薄壁细胞、韧皮薄壁细胞和韧皮射线薄壁细胞、皮层薄壁细胞以及树干、大根的韧皮薄壁细胞和韧皮射线薄壁细胞中;它们的超微结构存在明显差异,大致可以分为电子致密的团块状、絮状和均一状3种形态,不同形态的VSPs存在于不同的贮藏蛋白质细胞中,具有细胞特异性;在新梢...
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
万柔 胡亚平 景文轩 胡博 郭起荣
【目的】倍体材料的发现及其育种基础研究一直是林木遗传育种工作的重要内容。天然银杏单倍体的发现打破了银杏只有二倍体的认识，银杏单倍体与二倍体的表型及生理差异的调控机制不清楚。蛋白质是遗传信息的执行者，本研究通过分析单倍体银杏的蛋白质组学特征，以探究其单倍体的特殊性状和机制。【方法】以二倍体银杏为对照，在8月叶片性状、功能最强时采集材料，采用DIA(Data independent acquisition)蛋白质组学定量测序，开展蛋白鉴定、差异蛋白富集、亚细胞定位、蛋白互作网络和GSEA分析，研究单倍体银杏的蛋白质组学差异。【结果】在银杏单倍体中鉴定到6 012个蛋白；获得686个表达差异蛋白，其中397个蛋白表达上调，289个蛋白表达下调。GO功能注释结果显示，差异蛋白主要富集在叶绿素代谢过程和含卟啉化合物的代谢过程；KEGG通路分析表明，差异蛋白主要参与97个代谢通路，包括代谢途径、核糖体和单萜生物合成等。亚细胞定位发现，差异蛋白在叶绿体中所占的比例最大，为37%。蛋白质网络互作的主要通路为核糖体途。GSEA分析发现，差异蛋白主要富集于代谢途径、次级代谢产物的生物合成中。【结论】银杏单倍体差异蛋白主要在代谢、叶绿体和核糖体相关蛋白中起调控作用，可能与其单倍体代谢物质含量降低，光合能力、生长势弱的性状相关。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
马启林 李阳生 田小海 鄢圣之 雷慰慈 中田升
【目的】稻米蛋白质的含量及组成是稻米品质和营养价值的重要指标,本研究旨在揭示高温胁迫对稻米贮藏蛋白质的组成和积累形态的影响。【方法】设置试验对灌浆期水稻进行高温胁迫处理,对稻米蛋白质各组分的积累动态进行分析。【结果】25℃处理在灌浆过程,籽粒单粒重和贮藏蛋白质积累过程与积累形态上都与自然生长条件下表现一致。而35℃的高温胁迫处理加速了灌浆过程,降低了籽粒单粒重。高温胁迫不仅增加了粗蛋白的含量,而且改变了贮藏蛋白质的组成和积累形态,如使醇溶蛋白的相对含量较对照降低了7.5%。高温处理虽然没有改变主要贮藏蛋白质谷蛋白的相对含量,却导致谷蛋白的两个亚基的相对含量较对照降低了12.7%,同时使57kD...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张艳 李欣 李铮 李蒙 刘永峰 张德权
【目的】通过测定冰温贮藏及冷藏过程中肌肉肌浆蛋白与肌原纤维蛋白的磷酸化水平，分析冰温贮藏对蛋白质磷酸化水平的影响，为肉类冰温贮藏品质调控提供理论依据。【方法】选取大尾寒羊与小尾寒羊杂交公羊的背最长肌于冷藏和冰温条件下成熟，分别在０．５ ｈ、１２ ｈ、２４ ｈ、３ ｄ、５ ｄ、９ ｄ取样测定蛋白激酶活性、肌浆蛋白与肌原纤维蛋白的磷酸化水平。采用蛋白激酶活性测定试剂盒、运用酶联免疫的方法检测各处理组蛋白激酶的活性随贮藏时间的变化；通过ＳｄＳ－ＰＡＧＥ电泳、荧光染色的方法得到全蛋白染色与磷酸化染色的肌浆蛋白与肌原纤维蛋白条带，运用ＱｕＡｎｔｉｔｙ ＯｎＥ软件分析各处理组各处理时间的肌浆蛋白及肌原纤维．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王静凤 刘扬 赵芹 逄龙 薛长湖
采用链霉亲合素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫细胞化学染色技术,利用兔抗哺乳动物生长抑素血清对牙鲆(Paralichthys olivaceus)消化道(包括食道、胃、幽门垂、肠道全长及肛门)、肝胰脏、肾脏、脾脏以及生殖腺等器官的生长抑素(SS)分泌细胞进行定位和鉴别。结果表明,生长抑素分泌细胞仅存在于胃和胰岛中,其他检测部位均未见分布。在胃中,生长抑素分泌细胞主要散在分布于胃黏膜上皮、胃小凹底部上皮和胃腺的颈部周围。在胃的不同部位,生长抑素分泌细胞的分布密度存有差异,以胃体部数量最多,贲门部次之,幽门部最少。参照消化道内分泌细胞与胃肠腔或腺腔有无直接联系,以及基部有无胞质突起的分类...
[期刊] 水产学报
[作者]
张红杰 赵永强 李来好 杨贤庆 郝淑贤 魏涯 岑剑伟 李娜
为研究臭氧减菌化处理罗非鱼片在冰温贮藏过程中蛋白质生化特性变化规律,本研究对冰温贮藏过程中经臭氧处理罗非鱼片肌原纤维蛋白盐溶性、Ca2+-ATPase活性、表面疏水性和巯基及羰基含量变化进行了评价。结果显示,在冰温贮藏过程中,臭氧处理组和对照组罗非鱼片蛋白质均发生了不同程度的变性,表现为随贮藏时间的延长,肌原纤维蛋白盐溶性、Ca2+-ATPase活性及巯基含量均呈下降趋势,而肌动球蛋白表面疏水性和羰基含量则呈上升趋势;冰温贮藏20 d后,臭氧处理组罗非鱼片肌原纤维蛋白盐溶性、Ca2+-ATPase活性和巯基含量分别下降了76.57%、89.76%和66.72%,而对照组则分别下降了69.05%...
关键词：
罗非鱼片 臭氧减菌化 冰温贮藏 生化特性
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
王一然 丁瑞雪 耿丽娟 刘显琦 毛晋春 杨梅 陈旭 武俊瑞
巴氏杀菌乳因最大限度地保留了乳的营养物质和风味,深受国内外消费者的普遍青睐,然而,因其杀菌温度低、货架期很短,大大限制了大规模生产、远距离销售。其中,在贮运期间发生的蛋白质腐败性变质,是导致巴氏杀菌乳在贮运期间品质劣变的主要原因之一。在前期研究的基础上,结合蛋白质含量与氨基酸含量的分析,利用傅里叶变换红外光谱技术(FT-IR)分别对采集的不同贮藏温度和时间条件下的巴氏杀菌乳样品的蛋白质二级结构进行测定,并对不同巴氏杀菌乳样品的蛋白及其酰胺Ⅰ带及酰胺Ⅲ带进行了拟合,对不同贮藏温度和时间条件下的巴氏杀菌乳的蛋白质二级结构的变化规律进行进一步研究。结果表明:贮藏温度和时间对巴氏杀菌乳中蛋白质二级结构具有显著的影响,其中,在0℃和4℃贮藏条件下,巴氏杀菌乳乳清蛋白中的α-螺旋结构所占比例显著降低,无规卷曲结构所占比例显著上升,β-折叠、β-转角结构所占比例趋于稳定。而在15℃和25℃贮藏条件下α-螺旋结构的比例先下降后上升,总体来看,乳清蛋白二级结构随着贮藏时间的增加,由有序向无序转变。该结果表明了在不同贮藏条件下巴氏杀菌乳中蛋白质二级结构由有序向无序变化,二级结构的变化降低了巴氏杀菌乳在贮藏期间的营养价值。从蛋白质二级结构的角度来看,4℃的贮藏条件能更好保持巴氏杀菌乳的营养品质。
关键词：
FT-IR 蛋白质二级结构 巴氏杀菌乳
[期刊] 中国水产科学
[作者]
赖晓健 洪万树 王桂忠 马细兰 张其永 王琼
为了进一步探讨中华乌塘鳢[Bostrichthys sinensis(Lacépède)]感受性信息素(17α-P和17α,20β-P)的作用机制,以免疫细胞化学(SABC)法进行中华乌塘鳢嗅觉系统孕酮受体的免疫定位和数量分析。结果显示,孕酮受体免疫阳性细胞在性成熟中华乌塘鳢的嗅上皮、嗅神经和嗅球上均有分布,免疫阳性细胞数量由高到低依次为:嗅上皮、嗅球、嗅神经。半定量分析结果表明,中华乌塘鳢嗅觉系统的孕酮受体免疫阳性细胞的数量与其性腺发育程度有关。性成熟雄鱼和雌鱼嗅上皮的免疫阳性细胞数量分别显著或极显著(P<0.05或P<0.01)高于性未成熟雄鱼和雌鱼;性未成熟鱼嗅神经上未发现孕酮受体免疫阳...
[期刊] 水产学报
[作者]
黄辉洋 叶海辉 李少菁 王桂忠
为探讨5-羟色胺和神经肽Y在锯缘青蟹脑内的存在与否和分布状况,应用免疫细胞化学技术,在光学显微镜下观察5-羟色胺和神经肽Y阳性细胞和神经髓质的形态和分布。结果表明:在锯缘青蟹脑中共12个胞体群和11个神经髓质中,前脑和中脑中有4个细胞群和6个神经髓质检出5-HT免疫阳性反应;中脑和后脑中有7个细胞群和3个神经髓质具有NPY免疫阳性反应。5-羟色胺和神经肽Y在锯缘青蟹脑内的特异性分布,为其参与神经生理活动提供了形态学证据。
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