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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张楠 胡佩文 郭双铭 王莹 杨红
[目的]本文旨在建立一种光电化学（PEC）可视化双信号检测方法，实现铜离子（Cu~(2+)）的直观、灵敏检测。[方法]以具有高光电活性的CdS QDs/TiO_(2) NPs电极为工作电极，具有电致变色性能的普鲁士蓝（PB）电极为对电极，构建PEC-可视化检测平台；含有Cu~(2+)的样品滴加在CdS QDs/TiO_(2) NPs电极上，通过滴加后电极光电流强度和PB电极的颜色变化，实现对Cu~(2+)的双信号检测。[结果]Cu~(2+)浓度的增加，PEC信号降低，PB颜色加深。该方法的检测范围为10~(-7)mol/L～10~(-3)mol/L，PEC信号和可视化信号与Cu~(2+)浓度的线性相关系数分别为0.992和0.994；稻田水样品中Cu~(2+)的添加回收实验中，平均回收率92.3%～103.5%，相对标准偏差（RSD）4.7%～6.5%。[结论]基于PEC-可视化检测平台可以同时得到可视化信号和PEC信号，其中可视化信号作为直观的快速判断依据，PEC信号提供精确的检测结果，可以满足不同检测场景的需要，实现Cu~(2+)浓度的直观、灵敏检测。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
梁华 戴可 田强 戴学志 李宗臣
该文设计了以新型螺吡喃分子NSP为化学传感器、用于重金属铜离子可视化检测的精细化工综合实验。研究了NSP的聚集诱导发光特性，采用荧光和紫外-可见光谱法测试了NSP对铜离子的识别能力，利用扫描电镜研究了NSP结合铜离子前后的形貌变化，并对传感器在各类真实水体中检测铜离子的能力进行了测试和评价。该实验综合性和应用性较强，既有助于学生综合能力提升，又能强化学生的环保意识和社会责任感。
关键词：
人才培养 实验教学 螺吡喃 铜离子
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
焦岩 张嘉琪 郭欣蕊 张言 高超
基于差分脉冲伏安法和线性扫描伏安法检测重金属原理,结合LabVIEW虚拟仪器技术,自主开发了重金属在线检测系统。该系统主要由电化学检测系统、溶液搅拌系统、自动滴加系统、清洗系统以及LabVIEW应用软件操作系统5部分组成。使用步进电机控制搅拌系统确保溶液搅拌速度的稳定性,其一致性结果要高于普通磁力搅拌器;用注射泵向电解池内滴加缓冲液和标准液。对样品镉离子检验中,相关系数达到了0.9998,结果满足现场检验的稳定性和准确性的要求。该系统操作界面简单、自动化程度高,适用于低成本的现场检测与数据分析。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
亓文宝 李芳 李华楠 黄丽红 和君 穆光慧 罗开健 廖明
【目的】H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,该亚型病毒为H7N9亚型和H10N8亚型流感病毒提供了6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS),并且一直处于动态重组过程中。因此,建立针对H9亚型禽流感的型特异性电化学发光免疫的高通量快速检测方法,加强H9亚型流感的监测,具有重要意义。【方法】用钌联吡啶标记H9亚型AIV的单克隆抗体,用MPI-E型电致化学发光分析系统评价钌标单抗标记效率;用生物素标记H9亚型AIV的多克隆抗体,HABA法检测抗体生物素化的效率;待测抗原与钌标单抗作用1 h后,将此抗原-抗体复合物与通过生物素-链霉亲和素系统固定在磁微球表面的多克隆抗体反应,最后加入反...
[期刊] 海洋渔业
[作者]
于劼豪 黄郁葱 孙良娟 钟键 鲁义善 简纪常 蔡双虎
为加强对哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）早期快速诊断，本研究探究建立一种基于环介导等温扩增（LAMP）技术的可视化快速检测方法。基于环二聚体磷酸二酯VieA基因序列在哈维氏弧菌中的保守性，将其作为靶基因设计引物并初步建立LAMP反应体系，对LAMP反应体系中各反应物浓度、内外引物比例、反应时间和反应温度进行优化，并对优化后的LAMP反应的特异性和灵敏度进行检测；分别在优化后的LAMP反应体系中加入SYBR Green I、钙黄绿素-锰离子或羟基萘酚蓝作为指标剂对LAMP反应产物进行可视化判别，从而建立了一种针对哈维氏弧菌的LAMP可视化检测方法。研究表明该LAMP反应体系最佳反应温度60℃、反应时间60 min、Mg~(2+)浓度1.2 mmol·L~(-1)、dNTPs浓度0.64 mmol·L~(-1)、甜菜碱浓度0.25 mmol·L~(-1)及内外引物比例16:1；该反应体系能特异性检测到哈维氏弧菌，且灵敏度为3.4×10~(-6 )ng·μL~(-1)。可视化指标剂钙黄绿素-锰离子的添加比例为12:1或羟基萘酚蓝的添加浓度为390 μmol·L~(-1)时LAMP反应结果的可视化效果最好，临床应用表明该LAMP可视化技术能准确并特异性地检测到珍珠龙胆石斑鱼和凡纳滨对虾组织中感染的哈维氏弧菌。本研究提供了一种简单、快速和结果可视化的哈维氏弧菌LAMP检测方法，可以为水生动物哈维氏弧菌的现场检测和弧菌病的早期诊断提供技术支持。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
惠媛媛 彭海帅 王毕妮 张富新 刘玉芳 贾蓉 任荣
由于食品的多样性和食品基质的复杂性,食品安全问题已成为全社会共同关注的热点问题,其中微生物引起的食源性疾病居全球食品安全问题之首。食源性致病菌的检测是食源性疾病预防与控制的关键环节。平板计数法被评为微生物检测的金标准,但在致病菌检测过程中信号的放大需要通过单个细胞生长成菌落来实现,因此检测周期较长(3—7 d)。此外,现有的准确检测致病菌的技术有聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)等,但由于预处理时间长、操作复杂、检测结果存在假阳性等问题,不适合对致病菌进行现场快速有效的检测。核酸适配体是利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)从核酸分子文库中得到的寡核苷酸片段,具有良好的特异性、稳定性、易于修饰和亲和力高等特点,在毒素、抗生素、重金属和致病菌等其他小分子的检测中有很大的潜力。目前,国内外学者已开发了各种基于适配体的检测方法。本文综述了食品中常见的食源性致病菌及其传统的检测方法和近十年来用于致病菌检测的光学和电化学适配传感器,涵盖每种方法的检测策略、检测时间、检测范围和检测限等信息,也提出了适配体传感器在食品安全检测中存在的主要问题,并对其未来研究的发展趋势进行了展望,这些将为今后的研究工作提供一定的基础。
关键词：
食源性致病菌 适配体 快速检测 食品安全
[期刊] 中国农业科学
[作者]
黄娇玲 谢芝勋 谢丽基 滕丽琼 黄莉 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 范晴 罗思思
【目的】构建一种用于检测禽呼肠孤病毒(ARV)的新型电化学免疫传感器。【方法】将石墨烯(G)和甲壳胺(Chi)分散在乙酸溶液中得到均匀的混合物后,加入HAuCl4溶液于80℃还原成金纳米粒子(AuNPs),得到石墨烯-甲壳胺-金纳米粒子(G-Chi-AuNPs)纳米复合物。将石墨烯(G)和甲壳胺(Chi)分散在乙酸溶液中得到均匀的混合物后,先加入AgNO3溶液于80℃还原成银纳米粒子(AgNPs),再加入禽呼肠孤病毒单克隆抗体(ARV-MAb),得到石墨烯-甲壳胺-银纳米粒子-禽呼肠孤病毒单克隆抗体(G-Chi-AgNPs-ARV-MAb)纳米复合物。将G-Chi-AuNPs纳米复合物修饰金电...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
车勇良 陈如敬 王隆柏 江斌 吴学敏 刘玉涛 严山 庄向生 周伦江
【目的】建立一种可快速检测副猪嗜血杆菌的环介导等温扩增(LAMP)方法。【方法】根据GenBank中副猪嗜血杆菌肽聚糖相关脂蛋白(PalA)基因序列,在其保守区域设计外引物、内引物和环引物用于LAMP检测。优化副猪嗜血杆菌LAMP检测的反应体系,在反应产物中加入SYBR GreenⅠ,对检测结果进行肉眼判定,建立副猪嗜血杆菌可视化LAMP检测方法,评价该检测方法的特异性、敏感性。用建立的副猪嗜血杆菌可视化LAMP检测方法对临床分离的8株不同血清型副猪嗜血杆菌进行检测。从疑似患副猪嗜血杆菌病的猪体内采集10种体液,用所建立的可视化LAMP检测方法进行检测。【结果】建立了副猪嗜血杆菌可视化LAMP...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘宁宁 易萍 郭爱珍 胡长敏 陈颖钰
为建立一种能够快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica）的可视化LAMP检测法，利用LAMP引物设计软件，以溶血性曼氏杆菌保守基因lktC序列设计内引物、外引物及环引物，对其反应温度、Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度等条件进行优化，并检测了方法的敏感性、特异性及实用性。结果显示，该方法在68.2℃、6 mmol/L Mg~(2+)、1.6 mmol/L dNTPs条件下达到最佳，40 min内完成检测并可通过肉眼判定结果，对细菌的最低检测限为6.7×10~(-1) cfu/μL，对lktC重组质粒的最低检测限为7.9×10~2 copies/μL，敏感性高；与15种病原均不发生交叉反应，特异性好；对背景清晰小鼠肺组织样本检测结果显示该方法实用性良好，且优于普通PCR方法。表明该方法可快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
赖多 王德林 邵雪花 秦健 庄庆礼 肖维强
【目的】建立余甘子果实斑点病菌快速、便捷、灵敏、可视的环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）检测方法,为该病害的风险预判和科学防治提供依据。【方法】以余甘子果实斑点病致病菌间座壳菌（Diaporthe phoenicicola）的翻译延伸因子EF-1α基因为靶序列,设计LAMP特异性扩增引物;以余甘子间座壳菌DNA为模板,优化反应温度、反应时间、d NTPs浓度、Mg2+浓度和内外侧引物浓度比,建立LAMP检测最佳反应体系,测试其特异性和灵敏性,并对余甘子发病果实进行实际检测。【结果】适用于余甘子果实斑点病LAMP检测的最佳引物为引物组合4（EF4-F3/EF4-B3和EF4-FIP/EF4-BIP）;LAMP检测最佳反应条件为d NTPs浓度1.0 mmol/L,Mg2+浓度4 mmol/L,内外侧引物质量比6∶1,反应温度63℃,反应时间50 min。优化后的LAMP检测方法可特异性地检出余甘子间座壳菌（D. phoenicicola）,检测灵敏度可达0.01 ng/μL,且在实际应用中准确率高达100%。【结论】首次建立了余甘子果实斑点病致病菌间座壳菌LAMP可视化快速检测方法,该方法特异性强、灵敏度高,操作简单,可用于田间余甘子果实斑点病菌的快速检测。
[期刊] 中国科学技术大学学报
[作者]
康阳 刘鑫 汪丹浩 方师 罗远旻 孙海定
紫外光探测在光通信、化学与生物相关传感应用中发挥着重要作用。基于氮化镓纳米线的光电化学光探测器以其自供能、环境敏感等特性受到广泛关注。然而，氮化镓纳米线在光电化学环境中易受到光腐蚀，极不稳定。为了提高氮化镓纳米线在光电化学环境中的稳定性，在研究了氮化镓纳米线的光电化学光探测性质的基础上，提出一种利用原子层沉积技术在纳米线表面均匀包覆一层超薄的（～4 nm）二氧化钛保护层，以改善氮化镓纳米线的光电化学稳定性的方法。实验结果表明，相较于未被包覆的氮化镓纳米线，被二氧化钛保护层包覆的氮化镓纳米线在365 nm紫外光照下的光电流密度在2 000 s的测试时间内的衰减程度有所下降。具体而言，未被包覆的氮化镓纳米线的光电流衰减系数高达85%；而包覆了二氧化钛保护层的氮化镓纳米线的光电流衰减系数可降至49%。该研究成果为构建长期稳定的氮化镓纳米线基光电化学型光探测器提供了参考。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
曹英丽 杨勇 陈春玲 许童羽
提高间谐波检测精度的一个关键问题是如何减少谐波频谱泄漏对其造成的影响。提出一种新的"双阶段"间谐波检测方法,第一阶段基于加窗插值FFT方法检测谐波分量,并将其从原信号中滤除掉;第二阶段以固定的采样频率对保留的样值信号进行FFT分析,在没有谐波频谱泄漏干扰的前提下提取间谐波分量。仿真结果表明:该方法不需要同步处理,计算量小,检测精度高,适于对间谐波的快速检测。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
徐连应 王毕妮 张富新
【目的】沙门氏菌是食品中致病菌检测的一项重要指标。本研究拟构建一种实用性更强的用于沙门氏菌检测的新型电化学适配体传感器,以克服各种沙门氏菌传统检测方法的缺陷。【方法】通过混合还原氧化石墨烯(rGO)溶液与甲苯胺蓝(Tb)溶液制得Tb-rGO复合物,再将此复合物分散于纳米金(Au NPs)溶胶中得到Au NPs-Tb-rGO复合物。最后将Au NPs-Tb-rGO复合物与带有氨基的DNA链(S1)孵育得DNA-复合纳米材料(S1-Au NPs-Tb-rGO)。通过金硫键将沙门氏菌适配体互补链(S2)修饰在金
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
江吉周 王海涛 邹菁 陈伟 袁华 余军霞 孔海霞
该文设计了一个抗坏血酸改性MXene-Ti_3C_2(MXene/VC)制备及其电化学检测对硝基酚综合研究型实验。首先通过酸刻蚀碳化铝钛(Ti_3AlC_2)中的Al物质,合成MXene-Ti_3C_2样品,然后使用抗坏血酸(VC)作为修饰剂,对MXene-Ti_3C_2进行VC的改性处理,制得MXene/VC,再对MXene/VC进行红外光谱、扫描电镜和X-射线光电子能谱表征,最后采用差分脉冲伏安(DPV)测试法对MXene/VC电化学检测对硝基酚活性进行系统分析。实验过程包括文献调研、材料制备、微观表征、电化学传感性能测试和实验报告撰写等多个环节,有利于学生综合素质的提升。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
赵晓蒙 苏松坤
建立同时测定蜜蜂脑部神经物质左旋多巴（ｌ－ＤＯＰＡ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）、３，４－二羟基苯乙酸（ＤＯＰＡＣ）、多巴胺（ＤＡ）、５－羟吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）、高香草酸（ＨＶＡ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）的高效液相色谱—电化学检测（ＨＰｌＣ－ＥＣＤ）法．采用ＡＣＣｌＡＩｍ Ｃ１８色谱柱，以磷酸二氢钠、辛烷磺酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸及乙腈的混合液为流动相，流速０．２ ｍ ｌ·ｍＩＮ－１，进样量１０μｌ，柱温３８℃，检测电压３００ ｍ Ｖ．蜜蜂脑组织样品经高氯酸、焦亚硫酸钠和乙二胺四乙酸混合溶液去除蛋白，再由０．２２μｍ滤膜过滤后上样检测．结果表明：脑组织中各待测神经物质线性回归方程相关系数均大于．．．
关键词：
神经递质 液相色谱 电化学 蜜蜂 脑
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