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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
冯健豪 刘怀瑾 唐梓宁 王水莲 杨闯
分别用质量浓度为20、40、60、80、100 μg/mL的铁皮石斛提取物处理小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞) 24 h，采用细胞增殖检测试剂盒(MTS)检测细胞活力；qRT–PCR检测增殖与凋亡相关基因、睾酮合成酶基因、睾酮合成酶相关转录因子及其上游调控因子的mRNA表达水平；Western blot检测凋亡相关基因、睾酮合成酶的蛋白表达水平；ELISA法检测TM3细胞睾酮分泌水平。结果表明：与不加铁皮石斛提取物的对照组比较，40 μg/mL铁皮石斛提取物处理TM3细胞，显著提高了其增殖活力；细胞增殖相关基因Ki–67和PCNA mRNA表达水平、抗凋亡基因Bcl–2 mRNA表达水平、Bcl–2蛋白表达水平、睾酮合成酶基因StAR、P450scc、3β–HSD、CYP17a1和17β–HSD mRNA表达水平、P450scc、CYP17a1和17β–HSD的蛋白表达水平、睾酮合成酶相关转录因子Nur77和SF–1 mRNA表达水平均极显著高于对照组的；BAX和Caspase–3蛋白表达水平、NF–κB mRNA和蛋白表达水平极显著低于对照组的；其上游调控因子CREB MT3细胞睾酮浓度显著高于对照组的。说明40 μg/mL铁皮石斛提取物可通过调控睾酮合成酶基因及其相关转录因子的表达促进睾酮的合成。
关键词：
铁皮石斛提取物 小鼠间质细胞 睾酮合成
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
冯健豪 刘怀瑾 唐梓宁 王水莲 杨闯
分别用质量浓度为20、40、60、80、100 μg/mL的铁皮石斛提取物处理小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞) 24 h，采用细胞增殖检测试剂盒(MTS)检测细胞活力；qRT–PCR检测增殖与凋亡相关基因、睾酮合成酶基因、睾酮合成酶相关转录因子及其上游调控因子的mRNA表达水平；Western blot检测凋亡相关基因、睾酮合成酶的蛋白表达水平；ELISA法检测TM3细胞睾酮分泌水平。结果表明：与不加铁皮石斛提取物的对照组比较，40 μg/mL铁皮石斛提取物处理TM3细胞，显著提高了其增殖活力；细胞增殖相关基因Ki–67和PCNA mRNA表达水平、抗凋亡基因Bcl–2 mRNA表达水平、Bcl–2蛋白表达水平、睾酮合成酶基因StAR、P450scc、3β–HSD、CYP17a1和17β–HSD mRNA表达水平、P450scc、CYP17a1和17β–HSD的蛋白表达水平、睾酮合成酶相关转录因子Nur77和SF–1 mRNA表达水平均极显著高于对照组的；BAX和Caspase–3蛋白表达水平、NF–κB mRNA和蛋白表达水平极显著低于对照组的；其上游调控因子CREB MT3细胞睾酮浓度显著高于对照组的。说明40 μg/mL铁皮石斛提取物可通过调控睾酮合成酶基因及其相关转录因子的表达促进睾酮的合成。
关键词：
铁皮石斛提取物 小鼠间质细胞 睾酮合成
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵洁 史陈博 杨花 王锋 张艳丽
[目的]探究lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞（LCs）睾酮分泌的影响。[方法]首先利用qRT-PCR对湖羊lncRNA-NAS进行组织表达谱分析；然后利用ELISA、Western blot、CCK-8、qRT-PCR等技术分析其干扰lncRNA-NAS对睾丸间质细胞睾酮分泌、细胞增殖和凋亡的影响；并在前期测序结果上对lncRNA-NAS可能作用的靶基因进行分析。[结果]lncRNA-NAS在湖羊心脏、肝、脾、肾、空肠、睾丸组织中均有表达，但其在睾丸中的表达量显著高于其它组织（P0.05）；相比对照组，干扰lncRNA-NAS后，睾丸间质细胞中睾酮分泌水平显著升高（P<0.05），睾酮分泌相关基因和蛋白表达量显著升高（P<0.05），细胞增殖活力增强（P<0.05）；通过分析lncRNA-NAS潜在的9个靶基因，其中有2个为未知基因，后续针对7个已知基因进行研究，当lncRNA-NAS干扰后，发现只有生殖细胞发育相关基因Nanos3表达水平发生变化，表现为显著升高（P<0.05），结果提示其可能为lncRNA-NAS作用的靶基因Nanos3。[结论]lncRNA-NAS可能通过调控靶基因Nanos3影响湖羊睾丸间质细胞睾酮的分泌。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王希春 周凡 冯士彬 孟庆娟 李玉 刘芳芳 吴金节
【目的】研究中草药单味及复方提取物对原代培养的小鼠乳腺上皮细胞增殖的影响,旨在为探明中草药治疗奶牛乳腺疾病机制提供试验依据。【方法】采用组织块种植法培养3月龄、分娩后3~5 d的昆明种远交系小白鼠的乳腺组织,采用胰蛋白酶消化法获得相对纯化的小鼠乳腺上皮细胞,并运用SDS-PAGE法进行鉴定。制备5味中草药(重楼、紫花地丁、木芙蓉、半枝莲、泽兰叶)及治疗奶牛乳房炎用中草药复方提取物,分别作用于对数生长期的乳腺上皮细胞5 d,用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)分析细胞活力。【结果】将通过组织块种植法与胰蛋白酶消化法相结合,可得到纯化的有酪蛋白分泌功能的乳腺上皮细胞;中草药重楼、紫花地丁、木芙蓉、半枝莲...
关键词：
中草药 小鼠乳腺上皮细胞 细胞培养 增殖
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
余欣 欧阳五庆 张黎 王莉
分离培养小鼠皮肤成纤维细胞,用2种富含腺嘌呤类衍生物的玉米幼芽提取物(20 mg/L)提前保护细胞后,体外构建H2O2急性氧化损伤细胞模型,应用RT-PCR对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达进行半定量检测。结果表明,损伤对照组(Ⅱ组)小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达量分别为空白对照组(I组)的24%(P<0.01)和20%(P<0.01),而药物保护组(Ⅲ组、Ⅳ组)小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA的表达量均高于损伤对照组,分别是损伤对照组的3.5倍(P<0.01)和1.8倍,Ⅲ型前胶原mRNA的表达量也均高于损伤对照组,分别是损伤对照组的4.6倍(P<0.01)...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张黎 欧阳五庆 余欣 易军 温叶飞
分离培养小鼠皮肤成纤维细胞,将传代细胞均匀分成4组:Ⅰ组为空白对照组;Ⅱ组在培养体系中加入终浓度为200μm o l/L的H2O2作用2 h,复制氧化损伤模型;Ⅲ组和Ⅳ组分别用含20 m g/L的0501和0502号玉米幼芽提取物培养液培养24 h,然后再用Ⅱ组的处理方法对细胞进行氧化损伤,研究玉米幼芽提取物对皮肤成纤维细胞体外抗氧化效应的影响。结果表明,Ⅲ组和Ⅳ组细胞凋亡率极显著低于Ⅱ组(P<0.01);扫描电镜下Ⅱ组细胞的细胞膜出现皱缩穿孔等现象,Ⅲ组和Ⅳ组细胞完整性较好,细胞联系紧密;透射电镜观察,Ⅱ组细胞粗面内质网扩张,染色质边集,细胞内出现大量空泡,Ⅲ组和Ⅳ组细胞结构清晰,出现轻度的...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
谢果珍 唐圆 宁晓妹 邱集慧 谭周进
将10只雄性KM小鼠随机分为正常组及铁皮石斛多糖组,铁皮石斛多糖组小鼠按临床等效剂量(350mg/kg)灌胃8周,每天1次,每次每只0.4 mL,正常组小鼠灌胃等体积无菌水,灌胃结束后取肠道内容物及黏膜进行16S rRNA基因测序并进行功能预测,探讨铁皮石斛多糖对正常小鼠肠道菌群的影响。结果表明:铁皮石斛多糖提高了肠腔菌群的α多样性,并显著提高了肠黏膜菌群的α多样性,但β多样性的变化无统计学意义;铁皮石斛多糖使肠腔中Diaphorobacter,肠黏膜中Muribaculaceae、Staphylococcus的相对丰度显著增加,并增加了Akkermansia、Phascolarctobacterium、Turicibacter、Faecalibacteriu、Parabacteroides、Parasutterella等短链脂肪酸产生菌及Candidatus_Arthromitus、Bifidobacterium及Prevotella_9等有益菌的相对丰度;铁皮石斛多糖使小鼠肠腔及肠黏膜菌群中辅助因子与维生素代谢和氨基酸代谢的相对丰度提高。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
谢果珍 唐圆 宁晓妹 邱集慧 谭周进
将10只雄性KM小鼠随机分为正常组及铁皮石斛多糖组,铁皮石斛多糖组小鼠按临床等效剂量(350mg/kg)灌胃8周,每天1次,每次每只0.4 mL,正常组小鼠灌胃等体积无菌水,灌胃结束后取肠道内容物及黏膜进行16S rRNA基因测序并进行功能预测,探讨铁皮石斛多糖对正常小鼠肠道菌群的影响。结果表明:铁皮石斛多糖提高了肠腔菌群的α多样性,并显著提高了肠黏膜菌群的α多样性,但β多样性的变化无统计学意义;铁皮石斛多糖使肠腔中Diaphorobacter,肠黏膜中Muribaculaceae、Staphylococcus的相对丰度显著增加,并增加了Akkermansia、Phascolarctobacterium、Turicibacter、Faecalibacteriu、Parabacteroides、Parasutterella等短链脂肪酸产生菌及Candidatus_Arthromitus、Bifidobacterium及Prevotella_9等有益菌的相对丰度;铁皮石斛多糖使小鼠肠腔及肠黏膜菌群中辅助因子与维生素代谢和氨基酸代谢的相对丰度提高。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陶正国 包鸿俊
实验设5,10,15,20,25,30 mg/kg 6个剂量组,腹腔注射环磷酰胺(Cy),进行小鼠睾丸细胞染色体畸变试验,同时测定睾丸细胞内的 cAMP、cGMP 和 Ca~(2+)含量变化。结果证实环磷酰胺(Cy)对睾丸细胞具诱变性,并存在剂量依赖关系。6个染毒组的睾丸细胞(精原、精母细胞)染色体畸变率均显著高于对照组(P<0.01,P
[期刊] 华北农学报
[作者]
尹荣焕 白文林 方和春 王健民 潘树德 刘宝山 刘金玲 姜卓
按毒理学方法给小鼠灌喂不同剂量喹乙醇,采用原位末端标记法检测该药物饲料添加剂对生精细胞凋亡作用的影响。结果表明:各试验组小鼠生精细胞凋亡指数较正常组和阴性对照组均有所增加,在不同时间,高剂量组均表现差异显著(p<0.05)或极显著(p
关键词：
喹乙醇 生精细胞 凋亡
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
张勇 朱宇旌 任慧玲 孙景霞 王蕊
为研究红三叶草异黄酮的营养免疫功能,选用80只小鼠,随机分成4组,分别给予对照(0mg·kg-1.d-1)和30mg·kg-1.d-1(A组)、90mg·kg-1.d-1(B组)、300mg·kg-1.d-1(C组)的红三叶草异黄酮灌胃处理。于试验期始末称量小鼠体重,试验期内的特定时间注射抗原诱导迟发性变态反应并测耳增厚;试验结束采血,取胸腺、脾脏、胃和小肠并称重,取腹腔液制片。结果表明:与对照组相比,30mg·kg-1.d-1处理组中雄性小鼠平均日增重提高55.56%(P<0.01),胃重提高17.65%(P<0.05);对于脾脏系数,90,300mg·kg-1.d-1两个处理组有显著提高(...
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
高杨 林韧安 袁超群 马丽娅 王佳囡 朱玉球 高燕会
为了探讨铁皮石斛Dendrobium officinale自交和杂交亲和性的生物学机制,利用荧光显微镜观察铁皮石斛自交、种内杂交后柱头性状和花粉管的生长情况。结果发现:自花授粉1 h后,花粉粒萌发,花粉管到达花柱基部接近子房处,4 h后花粉管进入子房,8 h后停止生长,72 h后子房萎缩,花粉管消失,不同的亲本间略有差别。种内杂交后的花粉管能够顺利进入子房,发育良好。由于铁皮石斛自交花粉管进入子房后停止生长,导致子房萎缩,可以认为铁皮石斛属于配子体自交不亲和。研究结果为铁皮石斛的自交不结实机理研究提供了细胞学基础,也为铁皮石斛种质资源保育、杂交育种等研究提供理论依据。
关键词：
中草药学 铁皮石斛 自交 杂交 亲和性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
蔡金霞 黄明光 胡传活 张鑫 梁莹莹 纪伟霞 冯妮 葛晨玲 陈志英 李珣 王晓晔
【目的】分析他克林对脂多糖(LPS)诱导小鼠睾丸支持细胞(TM4)炎性损伤的保护作用，从炎症角度探索他克林的功能，为动物生产过程中雄性动物生殖疾病相关抗炎药物的利用及精子质量提升提供更多药物选择。【方法】采用CCK8法检测0.01、0.10、1.00、10.00和100.00 μg/mL LPS分别诱导3.0、6.0、12.0和24.0 h对TM4的适宜损伤条件；同时分析0.01、0.10、1.00、10.00、100.00、1000.00、10000.00和100000.00 μg/mL他克林在加入LPS前预处理0.5、1.0和2.0 h或加入LPS后处理0.5、1.5、3.0、6.0、12.0和24.0 h对TM4炎性损伤的适宜保护条件。以荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测TNF-α和IL-6基因mRNA表达水平，以ELISA法进一步评价细胞上清TNF-α和IL-6蛋白表达量，以免疫蛋白印迹(WB)法分析NF-κB蛋白表达量。【结果】不同浓度不同处理时间下，LPS对TM4增殖的影响情况存在差异，其中1.00 μg/mL LPS处理12 h TM4的增殖率极显著低于空白组（P0.05）。【结论】0.01 μg/mL他克林后处理6.0 h对TM4的保护作用最佳，其机制可能与IL-6和TNF-α基因mRNA及蛋白表达量下调有关。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张德明 戴亚斌 许立华 龚远鹰 杨仁全 李刚 陈溥言
ICR小鼠用伪狂犬病毒 (Pseudorabiesvirus ,PRV)灭活苗免疫 ,同时每只分别注射 0 1,0 2 5和 1mg或口服 0 2 5mg法氏囊 (bursaoffabricius ,BF)提取物 (相对分子质量小于 10 0 0 )。对各试验组小鼠器官指数、白细胞数、淋巴细胞数、淋巴细胞非特异酯酶染色阳性数 (acidα naphthylacetatcesterase ,ANAE+ )、PRV抗体水平、脾脏组织学变化和攻毒试验结果等各种免疫学指标进行检测和比较 ,探讨法氏囊提取物对试验个体的免疫力影响。结果表明 :中等剂量 (每只0 2 5mg)的法氏囊提取物能够不同...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
阚飞 孙捷 田路旸 李超 徐明旭 房云 代陈胜 张克云
以中国药用昆虫白星花金龟(Protaetia brevitarsis)幼虫(蛴螬)为研究对象,通过匀浆、乙醇沉淀、Sevag法去除蛋白,得到蛴螬总多糖,其得率为57%。用苯酚硫酸法进行多糖浓度测定。经MTT法检测表明,终质量浓度为5和20μg.mL-1的总多糖对小鼠脾细胞的生长增殖率分别为48.8%和62.2%,对巨噬细胞生长增殖率分别为240%和516%。用DEAE-Sephadex A-25、LPLC-Sephadex G-75层析法分离纯化总多糖,得到5种蛴螬多糖,其中相对分子质量分别为42 000和26 000的2种蛴螬多糖对脾细胞生长增殖率较高,终质量浓度为5μg.mL-1的该2种多...
关键词：
蛴螬 多糖 免疫细胞增殖
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