将10只雄性KM小鼠随机分为正常组及铁皮石斛多糖组,铁皮石斛多糖组小鼠按临床等效剂量(350mg/kg)灌胃8周,每天1次,每次每只0.4 mL,正常组小鼠灌胃等体积无菌水,灌胃结束后取肠道内容物及黏膜进行16S rRNA基因测序并进行功能预测,探讨铁皮石斛多糖对正常小鼠肠道菌群的影响。结果表明:铁皮石斛多糖提高了肠腔菌群的α多样性,并显著提高了肠黏膜菌群的α多样性,但β多样性的变化无统计学意义;铁皮石斛多糖使肠腔中Diaphorobacter,肠黏膜中Muribaculaceae、Staphylococcus的相对丰度显著增加,并增加了Akkermansia、Phascolarctobacterium、Turicibacter、Faecalibacteriu、Parabacteroides、Parasutterella等短链脂肪酸产生菌及Candidatus_Arthromitus、Bifidobacterium及Prevotella_9等有益菌的相对丰度;铁皮石斛多糖使小鼠肠腔及肠黏膜菌群中辅助因子与维生素代谢和氨基酸代谢的相对丰度提高。

将10只雄性KM小鼠随机分为正常组及铁皮石斛多糖组,铁皮石斛多糖组小鼠按临床等效剂量(350mg/kg)灌胃8周,每天1次,每次每只0.4 mL,正常组小鼠灌胃等体积无菌水,灌胃结束后取肠道内容物及黏膜进行16S rRNA基因测序并进行功能预测,探讨铁皮石斛多糖对正常小鼠肠道菌群的影响。结果表明:铁皮石斛多糖提高了肠腔菌群的α多样性,并显著提高了肠黏膜菌群的α多样性,但β多样性的变化无统计学意义;铁皮石斛多糖使肠腔中Diaphorobacter,肠黏膜中Muribaculaceae、Staphylococcus的相对丰度显著增加,并增加了Akkermansia、Phascolarctobacterium、Turicibacter、Faecalibacteriu、Parabacteroides、Parasutterella等短链脂肪酸产生菌及Candidatus_Arthromitus、Bifidobacterium及Prevotella_9等有益菌的相对丰度;铁皮石斛多糖使小鼠肠腔及肠黏膜菌群中辅助因子与维生素代谢和氨基酸代谢的相对丰度提高。

为探究苦参碱灌胃和腹腔注射不同给药途径对肠道菌群的影响,将昆明小鼠随机分为4组,分别为生理盐水腹腔注射组(NCip)、生理盐水灌胃组(NCig)、苦参碱腹腔注射组(MTip)及苦参碱灌胃组(MTig),连续给药5d后,收集各组粪便,进行小鼠肠道微生物α多样性指数分析和β多样性分析,利用LEfSe和Metastats分析不同组间肠道菌群的差异。结果表明:灌胃和腹腔注射苦参碱的不同给药方式对小鼠肠道菌群的α多样性指数及β多样性的影响差异不显著(P>0.05);LEfSe分析发现,与灌胃苦参碱相比,腹腔注射苦参碱组的小鼠肠道有益菌拟杆菌目(Bacteroidales)、调节机体代谢的另枝菌属(Alistipes)丰度显著增加(P<0.05);Metastats分析发现,与灌胃苦参碱相比,苦参碱腹腔注射组的小鼠肠道与结肠炎相关的脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、[Eubacterium]_fissicatena_group丰度显著降低(P<0.05)。综上,不同给药途径会引起肠道菌群的差异,相比于灌胃给予苦参碱,通过腹腔注射给予苦参碱更有利于优化肠道菌群的结构及功能。

利用PCR-DGGE和Illumina测序技术研究了罗非鱼(Oreochromisniloticus)肠道菌群结构及饲喂鲍内脏多糖后罗非鱼肠道菌群的动态变化。在罗非鱼肠道中检测到13个门的细菌,其中梭杆菌门(Fusobacteria,77.84%)为优势菌门,拟杆菌门(Bacteroidetes, 8.59%)、衣原体门(Chlamydiae, 6.18%)、变形菌门(Proteobacteria, 5.84%)和放线菌门(Actinobacteria, 1.20%)为次优势菌门,还检测到Saccharibacteria等8个菌门和一些未知类群。在属的水平上,优势菌属为鲸杆菌属(Cetobacterium)、Neochlamydia、邻单胞菌属(Plesiomonas)和不动杆菌属(Acinetobacter),分别占77.84%、5.796%、2.64%和1.13%,还有一个紫单胞菌科(Porphyromonadaceae)的未知属,占8.29%。此外还有分枝杆菌属(Mycobacterium)等6个菌属和一些未知属。投喂添加鲍多糖的饲料对罗非鱼肠道微生物的构成造成了明显影响,饲喂鲍多糖的处理组和饲喂普通饲料的对照组样品分别聚为两大类。投喂添加鲍多糖饲料后,放线菌门、Saccharibacteria、疣微菌门和TM6_Dependentiae的丰度显著下调;在属的水平上,邻单胞菌属、鲸杆菌属的丰度上调;Neochlamydia、不动杆菌属、分枝杆菌属、Alsobacter、Aquicella、假单胞菌属、气单胞菌属、Alpinimonas等属的丰度下调。其中分枝杆菌属、Alsobacter、Aquicella和邻单胞菌属的丰度与对照差异显著(P<0.05),而鲸杆菌属等有益菌的丰度上调。本研究从肠道微生物的角度来研究鲍内脏多糖对宿主的影响,为海洋生物活性物质的功效评价提供了新思路,也为鲍内脏活性物质的开发利用、益生元的研制等奠定理论基础。

【目的】研究溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构的影响,为溶葡萄球菌素的食用安全性评估提供参考。【方法】将24只7周龄ICR小鼠随机分为3个试验组和对照组,3个试验组分别提供溶葡萄球菌素含量为1μg/mL(低剂量)、5μg/mL(中剂量)和15μg/mL(高剂量)的饮水10mL/(只.d),于饮用第0(饮用前),1,3,7,14,21天以及停饮第3,7,14天采集小鼠新鲜粪便样品,采用PCR-DGGE技术检测小鼠肠道菌群结构变化。【结果】DGGE图谱显示,各组小鼠试验前后不同时间肠道内的优势菌种相似;经UPGMA聚类分析,与对照组相比,低、中剂量溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构影响较小,高剂量溶葡萄球...

采用SPF小鼠动物模型研究了低剂量恩诺沙星对肠道菌群细菌数量、细菌耐药性和定植抗力的影响。连续饮水给药(1、10和100mg·L-1)48d后,恩诺沙星对SPF小鼠肠道菌群的主要影响为:10和100mg·L-1恩诺沙星可抑制部分需氧和兼性厌氧菌的生长(P<0.05或P<0.01);100mg·L-1恩诺沙星可抑制肠球菌和部分拟杆菌的生长(P<0.05或P<0.01);1、10和100mg·L-1恩诺沙星使需氧和兼性厌氧菌对环丙沙星的耐药率增加(P<0.05或P<0.01);100mg·L-1恩诺沙星使拟杆菌对环丙沙星的耐药率增加;1、10和100mg·L-1恩诺沙星可降低部分SPF小鼠肠道菌群...

为分析发酵乳对肥胖小鼠肝脂代谢和肠道菌群的影响，本研究将60只C57BL/6小鼠随机分为5组：正常对照组（CON）、模型组（MD）、易善复组（YG）、低浓度发酵乳干预组（LFG）和高浓度发酵乳干预组（HFG）。肥胖模型造模成功后进行为期6周的灌胃，试验结束测量小鼠的空腹体重和身长，计算LEE’S指数，采血检测生化指标，采集肝脏组织观察病理变化；采集小鼠盲肠内容物进行肠道菌群测序。结果表明：1）与CON相比，MD小鼠体重、LEE’S指数、ALT和AST均极显著提升（P<0.01），表明肥胖模型建立成功。2）与MD相比，发酵乳干预组小鼠体重、LEE’S指数、ALT和TC均极显著下降（P<0.01），其中AST和TG显著下降（P<0.05），同时发酵乳和易善复组小鼠肝组织脂肪变性有明显好转，基本没有明显的脂肪空泡。表明发酵乳可以抑制肥胖小鼠体重的增加，改善肥胖小鼠的肝脂代谢功能。3）与MD相比干预组小鼠肠道菌群的多样性水平有一定程度的恢复，尤其是厚壁菌门和拟杆菌门。表明发酵乳对于小鼠肠道菌群多样性的恢复有一定的作用。综上，本研究阐明了发酵乳对肥胖小鼠肝脂代谢和肠道菌群的影响，为功能型发酵乳的开发提供理论依据。

为了研究3种不同海洋脂质——二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)、二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid, DPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠及其肠道菌群的影响,本实验采用葡聚硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)诱导的C57BL/6小鼠为UC模型,以小鼠的体质量减少量、疾病活动指数、结肠表观、结肠长度、结肠的重量与长度比、苏木精-伊红染色结肠组织切片的显微观察及组织学损伤评分为指标评价3种海洋脂质对UC小鼠的干预效果,采用16S rDNA高通量测序的方法研究了3种海洋脂质对小鼠肠道微生态的影响。结果显示,3种海洋脂质均可以有效抑制UC小鼠体质量的下降、疾病活动指数的升高、结肠长度的缩短及组织损伤评分的升高,其中DPA在抑制体质量下降、疾病活动指数升高以及组织损伤评分升高方面的干预效果显著优于其他二者。16S r DNA高通量测序的结果显示,3种海洋脂质可以有效抑制UC小鼠肠道内拟杆菌属、脱硫弧菌属、肠球菌属、埃希菌属/志贺氏菌属、乳球菌属、普雷沃菌属和毛螺旋菌属丰度的增加,阿克曼氏菌属、理研菌属、双歧杆菌属、布劳特氏菌属、丁酸杆菌属、真杆菌属和颤螺旋菌属丰度的降低,其中DPA对阿克曼氏菌属、理研菌属、丁酸杆菌属和埃希菌属/志贺氏菌属具有更加显著的调控作用。本研究表明,EPA、DPA和DHA这3种海洋脂质可以显著缓解UC小鼠的病症,并且可以显著改变UC小鼠肠道菌群的结构和组成,说明这3种海洋脂质对UC的管控作用或与其对肠道特定微生物的调控作用相关。本研究为海洋脂质,尤其是DPA的生物学效应研究提供了参考,并为膳食管控慢性疾病提供借鉴。

【目的】比较铁皮石斛原球茎多糖与野生铁皮石斛多糖的抗菌及体外抗氧化活性，为铁皮石斛组织培养物的应用提供依据。【方法】以大肠杆菌（ＥｓｃｈＥｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、金黄色葡萄球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒＥｕｓ）、枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕＢｔｉｌｉｓ）、白色念珠菌（ｃａｎｄｉｄａ ａｌＢｉｃａｎｓ）为供试菌，用抑菌圈法测定２种铁皮石斛多糖对目标菌的抗菌活性；分别用羟自由基（·ｏｈ）、超氧阴离子自由基（ｏ－·２）、１，１－二苯基－２－三硝基苯肼自由基（ｄｐｐｈ·）法和硫代巴比妥酸法（ｔＢａ法）结合分光光度法检测２种铁皮石斛多糖清除·ｏｈ、ｏ－·２和ｄｐｐｈ·及抗脂质过氧化．．．

采用稀释滴种的细菌定量方法,研究了日粮中添加不同比例的羊草对成年产蛋五龙鹅肠道的4个部位(十二指肠、空肠、回肠、盲肠)内容物中正常菌群的数量变化,并初步探明鹅肠道微生物区系.结果显示:双歧杆菌数量最高(8.12±0.8),其次是梭菌和乳酸杆菌(分别为7.98±0.4,7.33±0.4).盲肠内细菌数高于其他肠段(P<0.01).各肠段内细菌总数高纤维组高于低纤维组(P<0.01),公鹅高于母鹅(P<0.05).双歧杆菌、乳酸杆菌和梭菌的数量极显著地高于其他菌类(P<0.01),为成年产蛋鹅肠道中的优势菌群.

将用链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型大鼠,连续灌胃高、中、低剂量的武夷岩茶和生理盐水,30 d后,采用高通量测序技术对大鼠的肠道菌群进行分析,探讨武夷岩茶对糖尿病大鼠肠道菌群的影响.结果表明:与正常对照组相比,模型对照组大鼠肠道菌群的多样性明显增多(P<0.05),而武夷岩茶可以有效抑制这一趋势,其中以武夷岩茶高剂量组的抑制效果最为显著(P<0.05);与正常对照组相比,模型对照组大鼠肠道菌群从门到属均发生显著变化,其中,拟杆菌门的比例显著下降(P<0.05),变形菌门的比例显著上升(P<0.05).灌胃武夷岩茶后,拟杆菌门的比例上升,变形菌门的比例下降,且调节效果与武夷岩茶的剂量呈正相关.提示武夷岩茶具有改善糖尿病大鼠肠道菌群结构的作用.

分别用质量浓度为20、40、60、80、100 μg/mL的铁皮石斛提取物处理小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞) 24 h，采用细胞增殖检测试剂盒(MTS)检测细胞活力；qRT–PCR检测增殖与凋亡相关基因、睾酮合成酶基因、睾酮合成酶相关转录因子及其上游调控因子的mRNA表达水平；Western blot检测凋亡相关基因、睾酮合成酶的蛋白表达水平；ELISA法检测TM3细胞睾酮分泌水平。结果表明：与不加铁皮石斛提取物的对照组比较，40 μg/mL铁皮石斛提取物处理TM3细胞，显著提高了其增殖活力；细胞增殖相关基因Ki–67和PCNA mRNA表达水平、抗凋亡基因Bcl–2 mRNA表达水平、Bcl–2蛋白表达水平、睾酮合成酶基因StAR、P450scc、3β–HSD、CYP17a1和17β–HSD mRNA表达水平、P450scc、CYP17a1和17β–HSD的蛋白表达水平、睾酮合成酶相关转录因子Nur77和SF–1 mRNA表达水平均极显著高于对照组的；BAX和Caspase–3蛋白表达水平、NF–κB mRNA和蛋白表达水平极显著低于对照组的；其上游调控因子CREB MT3细胞睾酮浓度显著高于对照组的。说明40 μg/mL铁皮石斛提取物可通过调控睾酮合成酶基因及其相关转录因子的表达促进睾酮的合成。

分别用质量浓度为20、40、60、80、100 μg/mL的铁皮石斛提取物处理小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞) 24 h，采用细胞增殖检测试剂盒(MTS)检测细胞活力；qRT–PCR检测增殖与凋亡相关基因、睾酮合成酶基因、睾酮合成酶相关转录因子及其上游调控因子的mRNA表达水平；Western blot检测凋亡相关基因、睾酮合成酶的蛋白表达水平；ELISA法检测TM3细胞睾酮分泌水平。结果表明：与不加铁皮石斛提取物的对照组比较，40 μg/mL铁皮石斛提取物处理TM3细胞，显著提高了其增殖活力；细胞增殖相关基因Ki–67和PCNA mRNA表达水平、抗凋亡基因Bcl–2 mRNA表达水平、Bcl–2蛋白表达水平、睾酮合成酶基因StAR、P450scc、3β–HSD、CYP17a1和17β–HSD mRNA表达水平、P450scc、CYP17a1和17β–HSD的蛋白表达水平、睾酮合成酶相关转录因子Nur77和SF–1 mRNA表达水平均极显著高于对照组的；BAX和Caspase–3蛋白表达水平、NF–κB mRNA和蛋白表达水平极显著低于对照组的；其上游调控因子CREB MT3细胞睾酮浓度显著高于对照组的。说明40 μg/mL铁皮石斛提取物可通过调控睾酮合成酶基因及其相关转录因子的表达促进睾酮的合成。

壳寡糖（Oligochitosan，OCS），作为绿色饲料添加剂，具有许多重要的生物活性功能，如促进生长、抗氧化等，但对石斑鱼免疫调控机制的研究还未解读。本试验通过在基础试验饲料中添加0（对照组）、100、200、400、800、1600 mg/kg的壳寡糖，配制出5种试验饲料并投喂虎龙斑（Epinephelus fuscoguttatus ♀× Epinephelus lanceolatu ♂）4周后，分析饲料中添加壳寡糖对虎龙斑的生长、非特异性免疫、肠道菌群多样性以及抗病力的影响。结果显示：（1）壳寡糖能显著提高石斑鱼的增重率、降低饲料系数，但对肥满度和存活率无显著影响。（2）采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术对虎龙斑中肠的免疫基因表达进行检测，结果显示壳寡糖可显著提高免疫相关基因表达水平（p < 0.05），激活炎症因子TNF-α、IL-1β、TGF-β1、TOR、TLR3的表达，提高GPx、CAT、MnSOD的表达来改善抗氧化能力，并增加紧密连接蛋白ZO-1、ZO-2、ZO-3、Claudin-3α的表达。（3）通过微生物组高通量测序来揭示壳寡糖投喂石斑鱼的肠道微生物群落结构，结果表明，实验组和对照组肠道细菌优势类群丰度和α多样性无显著差异（p > 0.05）；但是800 mg/kg组的益生菌所占丰度增加，细菌群落β多样性差异明显，可改变其群落组成结构。（4）哈维弧菌（Vibrio harveyi）攻毒7天后，800 mg/kg组的累积死亡率显著低于对照组和其他实验组（p < 0.05），并显著改善肠道形态。研究表明：饲料中添加适量的壳寡糖能促进虎龙斑的生长、提高免疫力、改善肠道菌群及增强抗病力。

为研制新型微生态制剂，从试验小鼠中分离出１株肠道酵母菌，采用形态学、生理生化、基因测序和系统发育树分析等方法对其进行鉴定。结果显示，该菌菌落呈白色、圆形，在显微镜下细胞呈椭圆形，出芽生殖；该菌能发酵葡萄糖、蔗糖和Ｄ–甘露醇，能够同化蛋白胨和硝酸钾，不能耐受高浓度乙醇，脲酶试验结果为阴性。序列分析结果表明，该菌株１８ＳｒＤＮＡ（登录号为ＫＣ５３４８４３）与汉逊德巴利酵母（ＤｅｂＡｒｙｏｍｙＣｅＳ ｈＡＮＳｅＮｉｉ）１８ＳｒＤＮＡ（登录号为Ａｂ０１３５６７）的同源性达９９％，２６ＳｒＤＮＡ（登录号为ＫＣ５３４８４２）与汉逊德巴利酵母（ＤｅｂＡｒｙｏｍｙＣｅＳ ｈＡＮＳｅＮｉｉ）２６ＳｒＤＮＡ（登录．．．