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[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 田艳伶  李志辉  杨模华  张斌  
本研究以钩栗叶片为实验材料,采用单因素和L16(45)正交实验探讨了DNA模板用量、Mg2+浓度、引物用量、Taq DNA聚合酶、d NTP用量以及不同退火温度对钩栗ISSR-PCR扩增的影响,建立了钩栗ISSR-PCR反应体系。研究结果显示,优化后的最佳反应体系为,20μL反应总体系中,含30 ng模板DNA,3 mmol/L Mg2+,0.4 mmol/L d NTPs,0.75 U Taq DNA聚合酶,0.3μmol/L引物;对钩栗DNA样品材料进行ISSR-PCR扩增体系的检测结果显示,该优化体系扩增的产物条带清晰,稳定性高,本研究为钩栗种质ISSR分子标记遗传结构分析提供技术基础。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 田艳伶  李志辉  杨模华  张斌  
摘 要:本研究以钩栗叶片为实验材料,采用单因素和 L16(45) 正交实验探讨了 DNA 模板用量、Mg2+浓度、引物用量、Taq DNA 聚合酶、dNTP 用量以及不同退火温度对钩栗 ISSR-PCR 扩增的影响,建立了钩栗 ISSR-PCR反应体系。研究结果显示,优化后的最佳反应体系为,20 μL 反应总体系中,含 30 ng 模板 DNA,3 mmol/LMg2+,0.4 mmol/L dNTPs,0.75 U Taq DNA 聚合酶,0.3 μmol/L 引物;对钩栗 DNA 样品材料进行 ISSR-PCR 扩增体系的检测结果显示,该优化体系扩增的产物条带清晰,稳定性高,本研究为钩栗种...
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