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[期刊] 中国农业科学
[作者]
岳海林 邓秀新 彭抒昂
【目的】通过研究钙调素mRNA在梨(Pyrus pyrifolia NaKai)子房和幼果中的表达特性,探讨其在盛花后子房和幼果发育中的生理作用。【方法】以10年生黄花梨盛花前后子房和幼果为试材。Northern杂交检测钙调素基因表达水平。mRNA原位杂交进一步检测钙调素mRNA在梨子房和幼果发育过程中组织特异性表达。【结果】Northern杂交结果表明,钙调素基因在梨子房和幼果中的表达水平,花前逐渐上升,至盛花时最高,花后又下降。mRNA原位杂交结果表明,钙调素mRNA在梨果中的表达多集中于果皮、果肉、胚珠和果肉微管组织,而在果心的表达较少,且表达水平为果皮>果肉>果心,珠心>胚囊>珠被。在...
关键词：
钙调素mRNA 原位杂交 子房/幼果 梨
[期刊] 华北农学报
[作者]
周硕 刘永伟 董福双 杨帆 赵和 柴建芳 吕孟雨 孙果忠 王海波
为了研究小麦类钙调素基因的功能和在植物逆境响应中的分子机制，以电子克隆结合ＲＴ－ＰＣＲ的方法，在小麦中克隆到一个类钙调素基因ＴａＣＭＬ７９。该基因的开放阅读框长度为５８８ｂＰ，编码的蛋白长度为１９５个氨基酸，推测的分子量为２０．４５ｋＤａ，等电点为４．６，属于酸性蛋白，具有２个典型的和一个不完整的ＥＦ－ｈａｎＤ结构域。多序列比对和系统进化树分析表明，ＴａＣＭＬ７９与野生稻的ＯｂＣＭＬ３５和水稻的ＯｓＣＭＬ１０亲缘关系较近，相似性分别为８４．６％和８６．８％。该基因的表达在根和地上部分受到热激、ｎａＣＬ、渗透和冷胁迫的诱导或抑制，初步推断该基因可能与植物抗逆有密切的关系。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
王保明 谭晓风 胡孝义 石明旺 莫华
在构建油茶近成熟种子cDNA文库的基础上,分离鉴定了油茶钙调素基因CoCaM1、CoCaM2的cDNA序列(Gen Bank登录号:EU856536和FJ649316),它们的长度分别为953 bp和1024 bp,均含有447 bp的开放读码框,编码的149个氨基酸完全相同;它们编码区的核苷酸序列高度一致,仅有25个碱基替代,证实了"多个基因编码一种蛋白"的假设。该蛋白含有19种氨基酸,属于酸性亲水性蛋白,理论等电点4.10,相对分子量16.83 kDa;它含有EF-手臂、半胱氨酸等结构域。该蛋白的亲水性/疏水性、柔性、抗原性具有较好的一致性,并表现高度的柔性。Blast及遗传进化分析表明:该蛋白的氨基酸序列与其它植物钙调蛋白的氨酸序列同源性较高。油茶CoCaM1在花芽到子房形成中的表达量较高;而CoCaM2在果实形成、膨大、油脂积累过程中的表达量较多,而在叶片和成熟种子中较少。这表明它们在花芽发育、果实形成、种子油脂合成积累中发挥着不同的调控作用。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王文雅 吕静 朱本忠 常世敏 翟百强 罗云波
为了研究CaM和Ca2+在调控乙烯生物合成和信号转导组分基因表达中的相互关系,利用272 mmol/L CaCl2及272 mmol/L CaCl2+100 μmol/L W5(或W7)处理绿熟期番茄果实圆片,然后采用无菌培养的方法在20℃的 条件下进行培养。结果表明:CaCl2处理能够抑制番茄果实圆片的乙烯生成,抑制LeACO1,NR,LeERF2基因的表达, 而CaCl2+W5(或W7)能消除Ca2+对果实圆片乙烯生成及LeACO1,NR,LeERF2基因的表达的抑制作用,但CaCl2和 CaCl2+W5(或W7)处理均对LeACS2基因表达影响不明显。以上研究结果表明外源钙处理对乙烯生物...
关键词：
钙调素 钙 乙烯 基因表达
[期刊] 华北农学报
[作者]
贾伟哲 焦博 王娇 陈文烨 杨帆 刘永伟 董福双 赵立群 周硕
为挖掘小麦抗逆基因，研究类钙调素基因在植物抗逆反应的分子机制，利用电子克隆结合RT-PCR的方法克隆小麦类钙调素基因TaCML8-A。生物信息学分析显示，该基因的CDS区全长为519 bp,编码172个氨基酸，包含PTZ00184和FRQ1超家族，含有4个EF-hand结构域，其中包含4个钙离子结合位点；编码蛋白质分子质量为18.31 ku,等电点为4.54,属于酸性蛋白质。亚细胞定位结果显示，TaCML8-A蛋白质在细胞核和细胞膜中均有分布。核苷酸序列比对发现，TaCML8-A与水稻OsCML14亲缘关系最近，相似性为79.17%。qRT-PCR结果显示，在盐、渗透和冷胁迫处理中，TaCML8-A基因在小麦地上部分和根中的表达均上升，表明植物可能通过提高TaCML8-A基因的表达来响应盐、渗透和冷胁迫；热激时TaCML8-A基因在根和地上部分分别受到诱导和抑制，从而发挥不同的功能。从小麦中成功克隆出类钙调素基因TaCML8-A,并进行表达分析，初步推测该基因可能参与调控植物的非生物胁迫，其结果可为后续研究其生物学功能提供基础理论支撑。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
彭抒昂 罗充 章文才
以梨为试材 ,对成花过程中CaM和核酸的含量进行了分析测定 ,结果表明 :短枝芽的CaM含量在成花的发端期成倍增加形成高峰 ,而新梢芽却一直保持较低的水平 ;短果枝叶的CaM与新梢叶有着相近的变化趋势 ,但在成花前后 ,短果枝叶的CaM含量要明显高于新梢叶的 ;短枝芽所含核酸、尤其是RNA开始回升时与CaM的峰值相吻合 ,并且在整个成花期间都呈上升的趋势。就成花过程中的CaM与核酸的关系及作用进行了讨论
关键词：
钙调素 核酸 梨 花芽分化
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘嘉斐 张璐 孟永娇 段莉莉 罗雨薇 李季 陈劲枫
[目的]钙调素类似蛋白(calmodulin-like protein,CML)是一类含有EF-hand结构域的钙受体蛋白,与植物细胞的分裂及形态建成密切相关。本文基于前期克隆的一个黄瓜果实特异性表达基因CML25-like,研究其调控单性结实的机制。[方法]采用RT-qPCR方法研究CML25-like表达的时空特点;构建植物表达载体pLP100-35S-CML25-like,利用农杆菌介导子叶节法转化黄瓜自交系CCMC,并研究转基因植株的表达特点;观察转基因植株的表型,采用RT-qPCR方法检测其坐果期激素相关基因的表达变化。[结果]CML25-like在黄瓜幼叶和雌花中表达量最高,在雄花中表达量最低,而且CML25-like在果实发育过程中上调表达,在果实败育过程中下调表达;性状统计发现过表达CML25-like植株的单性结实率最高可达到98.25%,比对照CCMC提高了86%,而且单性结实果实与对照授粉果实的长度和横径均无明显差异。RT-qPCR检测结果显示,在转基因植株坐果期22个激素相关基因中有16个显著上调表达。[结论]CML25-like基因的活跃表达与果实发育密切相关,而且CML25-like能够诱导黄瓜单性结实,促进果实膨大,推测CML25-like通过上调弱单性结实黄瓜子房中激素相关基因表达而诱导单性结实。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
徐亮 刘振宇 吕全 梁军 张星耀
松材线虫病是由松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)侵染引起的严重病害,引起重大的经济和生态损失。钙调素(CaM)是真核生物中Ca2+主要传导蛋白,本研究采用RT-PCR方法,首次从马尾松中克隆获得CaM,命名为pmCaM,并检测了其响应松材线虫侵染的表达特征。序列分析表明:pmCaM完整的开放阅读框核苷酸序列为450bp,编码149个氨基酸的蛋白质;该蛋白含有4个EF-hand结构域,具有钙调素的典型特征,与其它植物的CaM蛋白均有较高同源性。实时荧光定量PCR分析显示:接种松材线虫后30 180 min时间段,马尾松苗根、茎、叶器官中的pmCaM均下调表达,但不同...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
沙琴 蒋明义 林凡 王金香
以玉米(Zea maysL.)为材料,探讨了水分胁迫下玉米钙调素(CaM)基因CaM1、CaM2和CaM3在叶片中转录水平的变化;并对水分胁迫下脱落酸(ABA)积累和H2O2产生与CaM基因表达的关系进行了研究。结果表明,25%PEG 6000模拟的水分胁迫能够诱导上述玉米CaM基因在叶中的表达,其中对CaM1和CaM3的影响较为显著,3个基因具有各自不同的表达模式。外源ABA处理也能显著诱导这3个基因的表达,施用ABA合成抑制剂FLU明显抑制了水分胁迫下CaM基因表达,暗示水分胁迫下CaM基因表达增强依赖于ABA的积累。外源H2O2处理下3个CaM基因均出现2次表达增强的情况,ROS抑制剂或...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张红艳 彭抒昂
以贮藏性有明显差异的黄花梨和湘南梨为试材 ,研究果实发育过程中钙调素 (CaM )含量的变化。结果表明 :梨果实生长曲线为非典型的S型 ,湘南梨果肉CaM在果实发育前期含量较高 ,果实迅速膨大期CaM降至果实发育的波谷 ,果实采收前CaM出现峰值 ,采收时又下降。在果实迅速膨大期前 ,黄花梨果肉整体水平低于湘南梨 ,果实膨大期降到波谷 ,成熟前迅速升到峰值。梨种子发育曲线为典型的S型 ,盛花后 5 0d左右 ,种子即将进入迅速生长期 ,CaM含量出现峰值 ,2个品种峰值差异大。
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙琪 丛霞 索佳佳 曹荣峰 姜忠玲 崔凯 高善颂 田文儒
为证实热休克小鼠胎儿成纤维细胞中钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)对热休克蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)基因表达的影响及其作用机理,将体外培养的小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblasts,MEF)随机分为39℃和41℃热处理组(分别处理0.5,1,1.5,2 h)和常温对照组(37℃),测定各组细胞CaMKⅡ和HSF1 mRNA的量。此外,将培养的细胞分为37℃和39℃CaMKⅡ特异性抑制剂(myr-AIP)处理组和相应的空白对照组,分别测...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈贵林 贾开志
以耐热性不同的农友茄和二苠茄幼苗为材料,研究了钙、钙调素拮抗剂三氟拉嗪(TFP)和W7[N-(6-aminohexyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide]预处理对高温胁迫下(40℃/40℃,昼/夜)茄子幼苗丙二醛(MDA)、超氧阴离子(O2·)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽(GSH)和脯氨酸(Pro)-含量的影响。结果表明,随着高温胁迫时间的延长,TFP和W7浸种处理显著提高了茄子幼苗MDA含量和O2·产-生速率,同时,对SOD和POD活性产生抑制作用,加剧了GSH的破坏和Pro的积累;而Ca2+处理显著降低了高温胁迫下茄子幼苗M...
[期刊] 华北农学报
[作者]
周人纲
大量证据证明钙-钙调素(Ca2+ CaM)信号系统参与植物的热激信号转导。用激光共聚焦扫描显微镜研究小麦胞内Ca2+浓度的变化,37℃热激可引起小麦胞内自由Ca2+浓度的迅速提高。在Ca2+存在条件下,热激也引起小麦CaM基因CaM1-2的表达及细胞内CaM蛋白含量的提高。用CaCl2处理小麦幼苗明显提高小麦热激基因hsp26和hsp70的表达和热激蛋白的合成,而Ca2+的螯合剂EGTA,Ca2+通道阻断剂异博定和LaCl3、CaM抑制剂W7、TFP和CPZ明显降低了热激基因hsp26和hsp70的表达和热激蛋白的合成。EGTA、易博定、TFP或CPZ的处理也阻止小麦耐热性的获得。小麦CaM基...
[期刊] 华北农学报
[作者]
黄国存 周洪显 崔四平 马春红 魏建昆
０．５ＭＰａＰＥＧ－６０００胁迫２４ｈ明显刺激三叶期玉米幼苗，第三叶质膜ＡＴＰａｓｅ活性提高，并且Ｖｍａｘ增加近一倍，而Ｋｍ值却降低；水分胁迫下渗透调节因子脯氨酸累积，Ｋ含量则呈现先上升后下降的趋势，渗透调节的起动与质膜ＡＴＰａｓｅ活性上升可能无直接关系。实验也表明质膜ＡＴＰａｓｅ活性被三氟拉嗪（ＴＦＰ）促进而受钙调素抑制，由此推断质膜ＡＴＰａｓｅ在钙调素参与的磷酸化后活性降低。
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