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[期刊] 水产学报
[作者]
谭洪亮 郁迪 王斌 胡发远 马剑茵
为制备金枪鱼鱼骨胶原肽,并对其抗氧化活性进行研究,利用酶解、超滤、凝胶色谱和反相高效液相色谱制备抗氧化胶原肽,采用氨基酸序列分析仪测定其氨基酸序列,利用质谱(ESIMS)确定其分子量,采用羟自由基、DPPH自由基、ABTS自由基和超氧阴离子自由基清除实验和脂质过氧化抑制实验对胶原肽抗氧化能力进行评价。结果显示,金枪鱼鱼骨胶原蛋白经胃蛋白酶和胰蛋白酶2步酶解和分离纯化得到1个十肽(TFCH-P2),经氨基酸序列分析和质谱(ESIMS)确定其氨基酸序列为Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Glu-Gln-Gly(GPAGPAGQEG),分子量为839.87 u([M+H]+84...
关键词：
金枪鱼 鱼骨 多肽 抗氧化活性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
洪惠 罗永康 吕元萌 刘栋 尤娟
以鲽鱼骨为原料,采用酶法制备鲽鱼骨胶原多肽螯合钙,优化鲽鱼骨胶原多肽螯合钙合成工艺参数。分析pH与酶解时间对鲽鱼骨胶原多肽功能特性的影响,在单因素试验的基础上采用正交试验,以螯合率为指标,研究多肽液与骨粉酸解液体积比、pH、反应温度和反应时间对骨胶原多肽与鲽鱼骨粉酸解液螯合反应的影响。结果表明:采用碱性蛋白酶为酶制剂,pH为8,温度60℃条件下酶解1h所得的骨胶原多肽具有良好的溶解性、热稳定性和乳化性。采用体积比为3∶1的多肽液与骨粉酸解液为螯合反应液,pH 8,反应温度40℃,螯合40min得到的产品螯合率最高,为98.64%。
关键词：
鲽鱼 胶原多肽 多肽螯合钙 螯合率
[期刊] 水产学报
[作者]
杨勤子 陈丽丽 张照森 吴思雨 汪冰涛 赵利
为提高鳙鱼骨的高值化利用，实验以鳙鱼头骨粉为原料，胶原多肽得率为指标，筛选最佳水解蛋白酶，进行鳙鱼头骨胶原多肽的工艺优化，并对骨胶原多肽的氨基酸组成、相对分子质量、粒径、电位、显微结构等理化性质进行分析。结果显示，胰蛋白酶为最佳水解酶，骨胶原多肽的最佳酶解工艺为：初始pH 8，酶添加量2.5%，酶解时间5 h，酶解温度50°C，料液比1∶10 (g/mL)，胶原多肽得率为52.19%。骨胶原多肽水解后含有17种氨基酸，总含量为76.15 g/100 g，其中酸性氨基酸含量较高。鳙鱼头骨胶原多肽相对分子质量主要在5 000 u以下，占比高达97.81%，表明主要为小分子肽，其平均Z-粒径为(399.90±2.70) nm，多分散指数(PDI)为0.40±0.01，表明物质分布较均匀，并且骨胶原多肽粒子表面呈负电荷状态，具有疏松多孔的结构。研究表明，鳙鱼头骨胶原多肽营养物质较丰富，其小分子肽易于人体吸收，疏松多孔的结构也有利于肽钙螯合物的制备。本研究不仅为鳙鱼骨类产品的精深加工提供理论依据，也为新型钙制剂的制备提供优良原料。
关键词：
鳙 鱼骨 胶原多肽 氨基酸 显微结构
[期刊] 水产学报
[作者]
陆剑锋 孟昌伟 李进 宫子慧 林琳 叶应旺 姜绍通
以斑点叉尾鱼骨酶解胶原多肽液和氯化钙为原料,螯合率为指标,在一定条件下制备胶原多肽螯合钙,并考察温度、pH、时间、多肽与钙的质量比对螯合率的影响。在单因素实验结果的基础上,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳螯合工艺条件为温度60℃、pH 5.4、时间1.5 h、质量比2∶1,此条件下,螯合率达82.53%。紫外吸收和傅里叶变换红外光谱扫描的结果表明,骨胶原多肽与钙形成了螯合物,且其氨基酸组成符合典型的胶原样蛋白特征。
关键词：
斑点叉尾 鱼骨 胶原多肽 钙 螯合率
[期刊] 水产学报
[作者]
曾名湧 郭瑶 刘尊英 董士远 赵元晖 崔文萱
采用菠萝蛋白酶和Alcalase酶依次对尼罗罗非鱼皮胶原进行复合酶解。研究了该酶解产物的体外抗氧化活性。实验表明,该酶解产物具有较强的超氧阴离子/羟基自由基清除活性和还原能力。采用不同截留分子量的超滤膜将该酶解物分离成5个组分,即TGH-Ⅰ(>10ku),TGH-Ⅱ(10~5 ku),TGH-Ⅲ(5~3 ku),TGH-Ⅳ(3~1 ku)和TGH-Ⅴ(10 ku)。其中TGH-Ⅴ组分显示出最强的超氧阴离子自由基清除活性,因此采用凝胶过滤、离子交换和反向高压液相色谱技术对该组分进一步分离纯化。纯化得到的肽具有很强的超氧阴离子自由基清除活性,其IC50值为4.6μg.mL-1。通过质谱分析可知,该...
关键词：
尼罗罗非鱼 胶原蛋白 酶解 游离基清除肽
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
冯瑞方 邹潇潇 王凯 刘怀高 洪惠 罗永康 谭雨青
为了开发牛骨胶原蛋白肽(BBP)的抗疲劳功能，对BBP的氨基酸组成和肽段序列进行表征；选取16只7周龄、SPF级的Balb/c小鼠并随机分为2组，包括对照组(生理盐水)和肽干预组(w(BBP)=200 mg/kg)),每日定时灌胃。BBP干预4周后，测定小鼠的负重游泳时间和运动后血清代谢积累物含量。BBP干预18周后，测定血清氧化因子、炎症因子含量和肠道菌群组成。结果表明：1)BBP疏水性氨基酸比例为61.37%,大部分肽段来源于蛋白P02453(I型胶原蛋白的α1链)。2)BBP干预后小鼠负重游泳时间显著提高，且运动后血氨浓度显著降低、谷胱甘肽浓度显著升高(P<0.05),表明了BBP潜在的抗疲劳能力。3)BBP干预后，在非运动状态下小鼠血清SOD和GSH-Px显著升高，MDA浓度显著降低(P<0.05),表明了BBP潜在的抗氧化能力；在免疫方面，BBP干预后小鼠血清抗炎因子IL-10和促炎因子IL-6、TNF-α浓度均显著下降(P<0.05),主要的免疫器官胸腺指数显著下降(P<0.01),脾指数显著上升(P<0.05);在粪便中，潜在的有益菌Akkermansia、Lactococcus在肽干预后上调。综上，BBP具有潜在的抗疲劳作用，这种作用可能是通过调节体内抗氧化能力以及肠道菌群结构实现的。
关键词：
肽 抗疲劳 抗氧化 炎症 肠道菌群
[期刊] 水产学报
[作者]
杨帆 栗丽 陈荫 王斌 王加斌
以孔鳐软骨为材料,采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀,制备孔鳐软骨蛋白;以DPPH·和HO·清除活性为导向,采用胰蛋白酶酶解、膜超滤、DEAE-52阴离子交换层析、Sephadex G-15凝胶层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等技术,制备抗氧化肽,并对其活性进行系统评价。结果显示,孔鳐软骨蛋白经胰蛋白酶酶解和分离纯化得到2个抗氧化肽RCPE-A和RCPE-B,经氨基酸序列分析确定其序列分别为Gly-Glu-Glu-Gly-ProArg-Gly (GEEGPRG)和Gly-Glu-Glu-Gly-Thr-Met-Gly-Leu (GEEGTMGL),质谱(ESI-MS)测定其分子量分别为700.71和792.87 u。体外自由基清除实验结果显示,RCPE-A与RCPE-B对DPPH·(EC50 2.94和1.16 mg/mL)、HO·(EC_(50) 0.34和0.54 mg/mL)、ABTS~+·(EC_(50) 0.34和0.10mg/mL)和O_2~-·(EC_(50) 0.11和0.03 mg/mL)具有良好的清除作用,RCPE-A与RCPE-B亦显示出较强的脂质过氧化抑制作用。研究表明,孔鳐软骨蛋白酶解物及制备多肽可用于抗氧化相关的功能食品开发,也可以用作抗氧化剂延长相关产品的货架期。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈思远 刘永祥 曹小舟 张逸婧 陈海娟 沈新春
【目的】探究能有效地从小麦胚芽清蛋白二步双酶酶解物中分离得到高活性抗氧化肽的工艺。【方法】以小麦胚芽清蛋白为原料，ＤＰＰＨ自由基清除率和Ｆｅ～（２＋）螯合能力为抗氧化活性的评价指标，通过胰蛋白酶进行酶解，依次采用超滤膜和凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－７５）对酶解产物进行分离纯化，筛选出活性较高的组分；采用碱性蛋白酶对获得的活性较高组分进行酶解，通过凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－１５）和反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）分离纯化其酶解产物；采用质谱技术（ｅＳＩ－ＴＯＦ ＭＳ／ＭＳ）对抗氧化活性最高的组分进行结构鉴定。【结果】分离得到３个活性组分（峰）Ｐ＿ａ、Ｐ＿ｂ、Ｐ＿Ｃ，采用ＤＰＰ．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
牛瑞 孙谧 于建生 郑媛 王海英
以扇贝(Chlamys farreri)裙边为研究对象,通过海洋碱性蛋白酶水解获得抗氧化肽。研究酶解温度、pH值、固液比、加酶量、酶解时间对酶解效果的影响。在单因素实验的基础上选取实验因素和水平,采用L16(45)正交试验,根据Box-Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,对酶解条件进行优化研究。结果表明,最佳酶解条件为:固液比1:3.26(m/V),加酶量0.44%(W/V),温度31.20℃,pH值为9.0,酶解时间为1 h,羟自由基清除率为83.78%,与预测值的相对误差为0.29%,理论值与预测值基本一致,预测模型能较好地反映实际情况。本研究旨在为今后扇贝裙边蛋白的开发...
关键词：
扇贝裙边 抗氧化肽 酶解 响应面分析
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
张元元 汪之和 陈敏 施文正
本文研究了３种不同的蛋白酶（木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶）分别水解南极磷虾得到多肽的体外抗氧化活性，以清除超氧阴离子、羟自由基和ＤＰＰＨ的能力为指标。结果表明，木瓜蛋白酶水解制备的多肽抗氧化活性比较好，其次是碱性蛋白酶。用响应面法优化木瓜蛋白酶水解南极磷虾制备多肽的工艺参数，经凝胶电泳测定其分子量，显示该多肽有３个明显条带，其分子量大多位于３～７ ｋｕ。将上述多肽溶液脱氟后经超滤系统分离，按分子量（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇＨｔ，ｍｗ）大小分为ｍｗ≥１０ ｋｕ，５～１０ ｋｕ，ｍｗ≤５ ｋｕ的３种多肽，并比较其抗氧化活性的强度。在本实验体系浓度范围内，３种不同分子量的多肽对超氧阴离子、羟．．．
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
武少兰 张芳艺 罗小芳 李昕霖 吴敏文 郑舒桓 杨成龙 江玉姬
以多肽得率为指标，酶解秀珍菇蛋白质制备多肽，通过正交试验优化制备工艺.正交试验结果表明，酶解各因素对秀珍菇多肽得率影响程度的大小为：pH>时间>温度>酶浓度；确定的最佳酶解工艺参数为：pH 11、时间1.5 h、温度55℃、碱性蛋白酶浓度6 000 U·g~(-1),制备的多肽得率为70.96%;体外抗氧化能力测定结果表明：2.5 mg·mL~(-1)秀珍菇多肽对DPPH、ABTS~+和羟基自由基的清除率分别为81.57%、99.81%、98.84%;SDS-PAGE检测结果表明，秀珍菇多肽的分子质量约为5.8 ku;氨基酸分析结果表明，秀珍菇多肽含有8种必需氨基酸，占氨基酸总量的43.2%.综上，在最佳酶解工艺下制备的秀珍菇多肽具有分子质量低且抗氧化能力强的特点.
关键词：
秀珍菇多肽 蛋白质酶解 抗氧化性
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
周杏子 王子娜 曾红胜 夏尔东 陈林 任迪峰 鲁军
核桃粕作为核桃油加工的副产物,含有丰富的蛋白质、脂肪和维生素等营养物质。通过对核桃粕的预处理、菌种驯化、稳定性研究以及发酵工艺的优化,确定核桃粕乳酸菌发酵乳的最优制备工艺,并通过体外试验确定其抗氧化活性。结果表明:核桃粕预处理适宜料液的体积比为1∶10,打浆温度为80℃,蔗糖酯添加量为0.3%;乳酸菌经渐进驯化法驯化培养后,产酸量比驯化前提高了50%,活菌数比驯化前提高约17倍;核桃乳在115℃、15 min的杀菌条件下稳定性较高,为最适杀菌条件;相对于羧甲基纤维素钠和卡拉胶,蔗糖酯对核桃乳具有很好的稳定作用,其适宜添加量为0.3%;核桃乳发酵的最优接种量为3%,发酵温度37℃,发酵时间10 ...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李晓娇 段绍丽 曹凯红 宋志姣
【目的】建立硒化铁皮石斛多糖(Selenium-containing Dendrobium officinale polysaccharide， Se-DCP)的最佳制备工艺，并探究Se-DCP对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、羟基（OH）和超氧离子（O_(2)~(-)）自由基的清除能力，为铁皮石斛的深入开发提供理论基础和试验依据。【方法】硒化：以云南龙陵铁皮石斛为试材，采用微波辅助-浸提法提取铁皮石斛多糖（Dendrobium officinale polysaccharide， DCP），以亚硒酸钠为硒化剂，冰乙酸为催化剂对DCP进行硒化修饰获得Se-DCP；结构表征：通过电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）法测定Se-DCP中的硒含量，由傅里叶变换红外光谱(FTIR)法对Se-DCP的官能团进行表征；工艺优化：以硒含量为指标，考察亚硒酸钠用量、硒化时间、硒化温度和冰乙酸用量对硒化的影响，通过正交试验优化硒化反应条件；抗氧化试验：以VC为阳性对照，测定Se-DCP对·DPPH、·OH和O_(2)~(-)·的清除能力。【结果】Se-DCP的最佳制备工艺为：亚硒酸钠用量为1∶0.5（DCP∶亚硒酸钠），硒化时间为24 h，硒化温度为80 ℃，冰乙酸用量为0.6 mL，在此条件下产物Se-DCP的硒含量为2.35 mg/g；红外光谱结果表明，Se-DCP结构中存在Se=O键和Se-O键，为DCP的亚硒酸酯；抗氧化试验中，当Se-DCP的浓度大于1.4 mg/mL，Se-DCP对·DPPH 和 O_(2)~(-)·的清除率均大于90%（高于Vc），对·OH的清除率大于88%（与Vc相当）。【结论】Se-DCP的制备工艺简单，硒含量较高，且有较好的抗氧化活性，因此可作为理想的有机硒食品原料。
关键词：
铁皮石斛 硒多糖 抗氧化活性
[期刊] 海洋渔业
[作者]
唐鹏杰 吴雪 董婷婷 杨升平 郭锐华 马明 包春玲 包斌
以印度洋鸢乌贼(Symplectoteuthis oualaniensis)胴体分离蛋白为原料,基于分子量分布和营养价值分析,优化制备抗氧化肽的酶解工艺参数。碱溶酸沉法从鸢乌贼胴体提取分离蛋白;以底物浓度、酶底比、酶解时间等3个因素为单因素实验;Box-Behnken中心法则设计响应面实验;DPPH自由基清除率结合水解度为响应指标。鸢乌贼胴体分离蛋白相对分子量分布在30～240 kDa;必需氨基酸占总氨基酸42.56%;最佳酶解工艺参数是底物浓度4%、酶底比9 U·mg~(-1)、酶解时间4 h。5 mg·mL~(-1)的鸢乌贼胴体分离蛋白酶解物的DPPH自由基清除率为55.60%,羟自由基清除率为53.21%,ABTS自由基清除率为40.12%。鸢乌贼胴体分离蛋白符合FAO/WHO世界卫生组织提出的理想蛋白营养价值模式,鸢乌贼胴体能制备出营养价值高和抗氧化活性强的海洋功能蛋白肽。
关键词：
鸢乌贼 分离蛋白 响应面设计 抗氧化肽
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
牛瑞 孙谧 于建生 郑媛 王海英
以扇贝裙边抗氧化肽为研究对象,制备纳米柔性脂质体,考察其主要影响因素。采用薄膜-超声分散法,以包封率为指标,分别考察卵磷脂与胆固醇的质量比、不同温度、不同样品浓度、不同pH值、不同转速、不同超声时间等对脂质体的影响,在此基础上采用L9(34)正交设计对条件进行优化。制得的纳米脂质体为单室脂质体,平均粒径为255±60nm,包封率为58.39%±0.34%,4℃下粒径稳定性无明显变化。因此,抗氧化肽脂质体包封率和稳定性较高,重现性好。
关键词：
抗氧化肽 脂质体 包封率
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