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[期刊] 中国水产科学
[作者]
韦柳枝 高天翔 张秀梅
采用水平淀粉凝胶电泳技术对金乌贼(Sepia esculenta)同工酶的组织特异性及其山东日照近海群体的遗传结构进行研究。对金乌贼眼、鳃、肌肉、口球、肝脏、鳃心6种组织的19种同工酶进行分析,检测出PGDH、GPI、MPI、IDHP、SOD、ME、AAT、DIA、MDH、LDH、G3PDH、PGM共12种同工酶在几种组织中有较稳定而清晰的表达。结果表明,金乌贼同工酶的表达有明显的组织特异性。选择金乌贼3种组织(眼、口球、鳃心)进行同工酶分析,共记录了18个基因座位,其中3个基因座位LDH-2*、G3PDH-1*、PGM*呈多态,其多态座位比例为0.166 7(P0.99)和0.055 6(P...
关键词：
金乌贼 同工酶 组织特异性 遗传结构
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
项子龙 刘长琳 张金勇 胡鹏 何暮春 柳淑芳 庄志猛 薛同明
本研究从金乌贼(Sepia esculenta)转录组中筛选出疑似TERT (Telomerase reverse transcriptase)基因序列,通过系统进化和同源序列分析,鉴定出该基因为金乌贼TERT基因,序列长度为2415 bp。采用实时荧光定量PCR技术,检测和分析金乌贼TERT基因在不同组织、不同发育时期和不同性别的相对表达量差异。结果显示,与产卵期相比,濒死期的心、肝、胰、鳃、性腺、食道上神经团(除去视腺和视叶后的脑组织)等6个组织的TERT基因表达量呈显著下调趋势,推测与濒死期的器官组织分裂和增殖能力下降有关。TERT基因在金乌贼不同组织中具有明显的组织特异性,说明金乌贼各组织器官的衰老状态并不一致。本研究结果可为深入研究头足类生殖与衰老等生命过程的端粒酶调控机制提供基础数据。
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
韦柳枝 高天翔 韩志强 柳志强 金显仕
对金乌贼 (SepiaesculentaHoyle)的腕式及其在分类学中的应用进行了探讨。研究结果表明 :金乌贼不同时期的不同个体出现了不同的腕式。Duncan多重比较分析表明 ,腕式依个体、大小、左右和性别不同而有差异。当一个种雌性及雄性样本左、右腕的腕式都一致时 ,可以认为是该种的腕式。否则 ,需指出性别、大小、左右等前提。建议在金乌贼研究中慎重使用腕式。
[期刊] 水产学报
[作者]
郝振林 张秀梅 张沛东 董晓煜 卞晓东
建立一种简单实用的标志方法,对更好地评价金乌贼增殖放流效果和渔业资源现状非常重要。以金乌贼为实验对象,利用荧光物质—茜素络合指示剂(Alizarin Complexone,ALC)浸泡金乌贼幼体,对其内壳进行标志,所用荧光染色剂浓度为(6.0～8.0)×10-3%,浸泡染色时间24h。将标志组和对照组的金乌贼幼体分别暂养于1.5m×1.5m×1.5m水泥池30d,后将暂养的幼体放养于面积为2667m2的室外土池,并在60d后,将平均胴背长达91.4mm(对照组)、87.6mm(标志组)金乌贼幼体移入室内水泥池越冬,整个实验历时210d。实验期间,分别在标志后15、30、45、60、90、210...
关键词：
金乌贼 标志 荧光染色剂 保持率
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘长琳 邹健 刘君刚 庄志猛 陈四清 刘春胜 孙建明 王晓华
应用扫描电镜和透射电镜观察了金乌贼精子的超微结构。结果表明,精子全长为191.84μm(n=10),由头部和尾部组成。其中,头部主要由顶体和细胞核组成,尾部分为中段、主段和末段3个部分。头部顶体为呈倒"U"字形的囊状体,亚顶体腔呈∩形。细胞核细长,呈圆柱状,稍弯曲,为高电子密度的均质结构。核后窝偏离细胞核中心位置。尾部中段较长,由线粒体距及其不完全包围的鞭毛组成。线粒体距分为上段和下段,上段含较多线粒体,下段无线粒体。尾部鞭毛主段细长,由"9+2"结构的轴丝及外围9束粗纤维组成,构成典型的"9+9+2"结构。
关键词：
金乌贼 精子 超微结构
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘长琳 刘思玮 赵法箴 陈四清 刘春胜 燕敬平
采用生化方法测定了金乌贼（Ｓｅｐｉａ ｅＳｃｕｌｅｎｔａ）不同发育阶段的受精卵以及０–１０日龄幼体的胰蛋白酶、胃蛋白酶、碱性磷酸酶、脂肪酶和谷丙转氨酶５种酶比活力的变化。结果显示，可溶性蛋白浓度总体呈先上升后下降再上升的变化趋势，其中，在囊胚和原肠期（Ⅱ）最高，在初孵幼体（Ⅶ）中最低，含量分别为８１．５０ ｍｇ／ｇ和４．２４ ｍｇ／ｇ。胰蛋白酶、胃蛋白酶和谷丙转氨酶比活力的变化趋势相近，总体呈先上升后下降再上升的变化趋势，其中，在胚胎发育阶段均能检测出这３种酶的活性，说明主要自母体获得，但活力相对较低；在初孵幼体中，这３种酶活性均显著升高，比活力分别为０．５１ ｕ／ｇ、１．６８ ｕ／ｍｇ和３７．．．
关键词：
金乌贼 胚胎发育 可溶性蛋白 消化酶
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张金勇 何暮春 项子龙 柳淑芳 庄志猛
以金乌贼(Sepia esculenta)转录组测序获得的177,951条Unigene为对象，采用Micro Satellite (MISA)软件检测及分析其中的简单重复序列(Simple sequence repeat, SSR)位点信息。结果显示，在金乌贼转录组中共检测出161,327个SSR位点，分布在64,933条Unigene中，SSR位点发生频率为36.49%，出现频率为90.66%。其中，最主要的重复类型为单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸，分别占SSR总数的46.00%、39.93%和9.48%。SSR所包含的重复基元中，A/T是单核苷酸的优势重复基元，AT/AT和AC/GT是二核苷酸的优势重复基元类型。有66,004个重复基元长度≥20 bp，占SSR总数的40.91%，且其中含有低级重复基元(二、三核苷酸重复)SSR位点数量占优。以上结果表明，金乌贼转录组中SSR位点出现频率较高且类型丰富、多态性潜能较高，研究结果可为更好地开发金乌贼SSR分子标记、种质资源保护利用、遗传多样性评价和分子标记辅助育种等提供参考。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
周敏华 张虎 刘必林
为进一步掌握江苏近海金乌贼（Sepia esculenta）种群生活史特征，根据在江苏沿海港口所采集的样本，利用碳氮稳定同位素分析法对金乌贼的摄食生态及营养生态位进行研究。结果表明，金乌贼雌、雄群体间δ13C和δ15N值均不存在显著性差异；金乌贼的δ13C值与胴长之间相关性不显著，δ15N值与胴长之间存在显著相关性；雄性金乌贼营养生态位宽度（SEAc=0.57‰~2）与雌性（SEAc=0.63‰~2）无明显差异，雌性略大于雄性，且两者高度重叠（0.62）。同位素聚类分析显示，可将金乌贼个体分为75～114 mm、115～184 mm和185～204 mm等3个胴长组；185～204 mm胴长组营养生态位宽度最大（SEAc=1.77‰~2）,75～114 mm胴长组营养生态位宽度最小（SEAc=0.39‰~2）；仅75～114 mm和115～184 mm胴长组间生态位重叠率为中度重叠（0.34），其余胴长组间生态位重叠率低。分析认为，金乌贼δ13C值的变化主要受同位素基线值和金乌贼洄游模式影响，而δ15N值的变化主要受金乌贼摄食作用影响；雌性和雄性金乌贼群体之间食物资源和栖息地利用高度相似；不同发育阶段的金乌贼在营养生态位上具有明显差异。
关键词：
金乌贼 江苏近海 稳定同位素 营养生态位
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
李达 刘长琳 李昂 杜腾飞 柳淑芳 庄志猛
为揭示金乌贼(Sepia esculenta)早期发育阶段内壳生长发育规律和形态学特征,本研究采集其红珠与黑珠期、心跳期、出膜期、初孵化幼体、5日龄、10日龄6个时期的金乌贼,分别测量其胴腹长(DML)、胴宽(MB)、体重(BW)、壳长(CL)、壳宽(CB),壳重(CW)、生长纹数(LN)7项指标,进行内壳形态学的主成分分析。结果显示,红珠与黑珠期、出膜期和10日龄时期各生长指标间均呈显著性正相关,心跳期、初孵化幼体期和5日龄时期部分生长指标间相关性不显著。主成分分析显示,红珠与黑珠期、心跳期的第1主成分
关键词：
金乌贼 生长性状 内壳 主成分分析
[期刊] 水产学报
[作者]
金洋 薛张芝 张洪超 宋正规 朱仁义 步婷婷 李和生
为了提取纯化金乌贼肌肉中的三甲胺脱甲基酶(TMAOase),本研究采用含有0.1 mol/L NaCl、pH 7.0、浓度为20 mmol/L的三羟甲基氨基甲烷(Tris)-醋酸缓冲液提取粗酶液,经透析、浓缩处理后,通过DEAE-52阴离子交换柱层析和Sephacryl S-300柱层析得到了纯化的TMAOase,并对其酶学性质进行了研究。结果显示,经Sephacryl S-300柱层析的TMAOase相比粗酶纯化了209.54倍;粗酶和纯化酶的最适温度分别为55和50°C,当温度高于最适温度时,酶活性开
[期刊] 中国水产科学
[作者]
牛超 杨超杰 黄玉喜 张秀梅
2015年6—7月和2016年6—7月在青岛金沙滩水产有限公司室内产卵池中开展了不同材料、不同颜色、不同水深金乌贼(Sepia esculenta)产卵附着基附卵效果对比实验,以及柽柳附卵器对附卵效果的影响实验。实验用产卵附着基为0.33 m×0.33 m×0.33 m的十字形可折叠钢丝框架,上覆黑白2种聚乙烯网衣材料;每个产卵池中金乌贼亲体数量约35只,雌雄比约为1∶1,胴长(139.2±1.1)mm,体重(435.9±8.5)g。同时选用等比例放大的1.0 m×1.0 m×1.0 m钢筋框架与不同颜色
关键词：
金乌贼 产卵附着基 附卵效果 产卵场修复
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘长琳 赵法箴 边力 葛建龙 谭杰 陈四清
采用组织学和电镜技术对金乌贼(Sepia esculenta)成体副缠卵腺的结构进行了研究。结果显示,(1)解剖结构显示,副缠卵腺呈耳状,下端呈‘M’型与缠卵腺紧密连接,颜色为白色并夹杂着橙黄色;(2)显微结构显示,副缠卵腺由腺壁、腺体小管和结缔组织构成,腺壁由外向内依次为外膜层和肌肉层,其中,外膜层由单层柱状上皮细胞组成;腺体小管数量较多,平均直径为70μm,内腔表面可见微绒毛层,管腔内含有大量的分泌物质;结缔组织具有集中分布的血管和肌肉纤维;(3)超微结构显示,上皮细胞细胞质中含有数量较多且分布集中的囊泡,部分囊泡中含有分泌球状体;微绒毛分布面积较广且排列密集,而纤毛一部分集中分布,另一部分呈单行排列,着生不连续;腺体小管管腔内具有大量的共生菌,绝大部分为球菌,且在管腔中具有较多的分泌球状体。研究表明,金乌贼副缠卵腺是一种起分泌作用的腺体,存在的共生菌据认为在胚胎发育阶段的病害防治方面具有一定作用。
关键词：
金乌贼 副缠卵腺 超显微结构 共生菌
[期刊] 中国水产科学
[作者]
柏青青 张东雪 王林龙 王展 李文涛 张秀梅
为探讨不同规格雄性金乌贼(Sepia esculenta)在求偶交配过程中的竞争及优势等级,采用实验生态学方法,在室内可控条件下分别设置1L1S组、1L2S组和1L4S组(L和S分别表示大规格雄性和小规格雄性,数字表示实验中雄性金乌贼数量),连续摄像观察和记录金乌贼的繁殖行为。结果显示:(1)繁殖过程中金乌贼具有明显的领域行为和护卫伴游行为。(2)随着群体中小规格雄性比例的增加,处于优势地位的大规格雄性个体的优势等级发生变化,主要表现为大规格雄性护卫伴游时间、成功交配次数逐渐减少,而小规格雄性护卫伴游时间、成功交配次数逐渐增多。(3)当群体中小规格雄性较少时,大规格雄性常常主动攻击小规格雄性,而当小规格雄性数量远大于大规格雄性时,小规格雄性主动向其他雄性发起攻击,以争取护卫权和交配权。研究表明,雄性金乌贼的规格和数量对于求偶竞争以及交配行为具有显著影响。随着繁殖群体中小规格雄性增多,大规格雄性成功交配次数逐渐降低。1L4S组成功交配次数稍高于1L2S组,显著高于1L1S组(P<0.05)。人工苗种繁育过程中选择合适规格的雄性亲体和合理的雌雄比例,对提高金乌贼繁殖效率具有重要意义。
[期刊] 水产学报
[作者]
王展 王林龙 李文涛 张秀梅
为揭示金乌贼精子进入纳精囊及产卵过程中的精子利用方式,丰富金乌贼繁殖生物学研究内容,本研究利用实验生态学和组织切片技术,检测了交配后不同时间段雌性口膜表面精子囊和纳精囊中精子数量的变化,观察分析了雌性金乌贼纳精囊的组织结构。结果显示,金乌贼纳精囊位于繁殖期雌性个体口膜腹面的突起处,共1对。纳精囊开口于口膜内表面,通过一根中央管连通整个纳精囊。中央管内壁含有大量褶皱和纤毛。在中央管两端,有12～20个储精小囊与之相连。储精小囊四周具有发达的环肌,其中储存有大量精子,并且大部分精子头部均朝向腔室内壁。完成一次交配后,雌性金乌贼对精子囊和纳精囊中精子的利用可以分为三个阶段,主要利用精子囊中的精子(交配后1～2 d);由利用精子囊中的精子向纳精囊中的精子过渡(交配后2～3 d);主要利用纳精囊中的精子(交配后3 d以上)。研究表明,从精子囊释放出的精子进入雌性口膜表面的褶皱中,通过自身运动到达纳精囊。进入纳精囊的精子通过自身运动及中央管内壁纤毛的摆动进入储精小囊,其中大部分精子头部朝向储精小囊内壁有规律地分布。在产卵过程中,雌性优先利用精子囊中的精子,而在精子囊中精子不足时,纳精囊通过肌肉收缩以及纤毛摆动将其中的精子逐渐释放出来,卵子在雌性口膜附近完成体外受精。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
陈四清 刘长琳 庄志猛 贾文平 孙建明 于广成 刘克奉 王晓华
对人工孵化条件下金乌贼的胚胎发育进行了观察。刚产出的卵子,均重0.99g/粒(n=100),长轴为11～24mm,短轴为8～15mm,卵黄如鸡蛋状,梨形,长径5～6mm,短径3～4mm,外包三级卵膜。三级卵膜在胚胎发育过程中经历一个柔软-定形-缩小-膨大的变化过程。受精卵在20～25℃水温下孵化,经过26d幼体陆续脱膜孵出。根据胚胎发育的外部形态及典型特征将金乌贼胚胎发育过程划分为细胞分裂期、囊胚期、原肠期、器官发育期、出膜期5个典型时期。在胚胎发育过程中,眼的形态变化比较大,且经历一个无色、红色再到黑色的变化过程。
关键词：
金乌贼 胚胎发育
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