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[期刊] 林业科学研究
[作者]
倪建伟 魏琦 杨秀艳 许秀玉 武海雯 张华新 刘涛
以野生唐古特白刺的茎段、叶片为外植体,研究了Na Cl O对外植体的消毒效果和激素2,4-D、NAA和6-BA对愈伤组织诱导及愈伤组织形态的影响,并利用疏松型愈伤组织建立了白刺悬浮细胞系,对其生长特征进行了分析。结果表明:对茎段和叶片用2%的Na Cl O消毒10 min最适宜,时间过长或过短均会影响成活率;3种激素对愈伤组织的相对生长量和形态均有影响,其中,2,4-D是主要影响因子,且茎段诱导出的愈伤组织相对生长量比叶片的高;根据愈伤组织的生长速度和形态,适宜用浅黄色疏松型愈伤组织构建唐古特白刺悬浮细胞系,最佳试验组合为MS+2,4-D 1.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+6...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
倪建伟 杨秀艳 张华新 武海雯 许秀玉 刘涛
以唐古特白刺悬浮细胞为研究对象,对比分析了不同盐(Na Cl)浓度(0、100、150、200、250 mmol·L-1)胁迫下细胞生长状态和可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等生理生化指标随培养时间的动态变化及其相关性。结果表明:(1)盐胁迫对白刺悬浮细胞生长状态影响明显,细胞生长符合Logistic生长曲线模型,其中,盐浓度100 mmol·L-1胁迫下白刺悬浮细胞生长速度最快,之后随着盐浓度的增加细胞生长逐渐受抑。(2)盐胁迫对白刺细胞生理生化指标影响明显,在培养初期,各指标随盐浓度的增加而增加,但随着培养时间的延长这种趋势逐渐...
[期刊] 林业科学
[作者]
刘磊 顾玉红 孟坤 王莉 黄伟
以文冠果成熟种胚诱导的愈伤组织为材料,进行悬浮培养细胞系的建立及细胞生长特性的研究。结果表明:文冠果细胞悬浮培养的初始接种量在100mL三角瓶40mL液体培养基中以2.0g为宜,最适激素浓度以2,4-D,6-BA,NAA均为0.5mg·L-1为宜,细胞活力在接种第3天时达到最大,细胞分裂指数在接种第10天时达到最大,鲜质量增长量在第14天时达到最大。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杜晓映 张振文 夏惠 徐国前
【目的】建立适合葡萄悬浮细胞系快速稳定生长的培养体系。【方法】以鲜食葡萄巨峰的果皮为材料,以B5为基本培养基,通过选择合适的激素配比及浓度、pH、蔗糖浓度等建立并优化葡萄愈伤组织培养体系及细胞悬浮培养体系。【结果】在B5+0.5 mg/L 6-BA+NAA条件下,NAA最适质量浓度为1 mg/L;在B5+0.5 mg/L 6-BA+2,4-D条件下,2,4-D最适质量浓度为1.0~2.0 mg/L;在B5+1 mg/L NAA+6-BA条件下,6-BA最适质量浓度为0.5~1.0 mg/L;在B5+2 mg/L 2,4-D+KT条件下,KT的最适质量浓度0.2 mg/L。在最佳蔗糖质量浓度30...
关键词：
巨峰葡萄 愈伤组织 悬浮细胞 培养体系
[期刊] 林业科学研究
[作者]
诸葛强 阙国宁
山杉木(Cunninghamia lanccolata Hook.)成熟种子胚在含有2.0mg/l 2,4-D、0.2mg/l KT的MS培养基上诱导愈伤组织,通过筛选继代培养,得到了生长旺盛、质地松散的愈伤组织细胞系。继代初期适当降低蔗糖浓度有助于减少愈伤组织的褐化。将5个月龄的愈伤组织转移至含1.5～2.0 mg/l 2,4-D、0.1～0.2mg/l KT、200 mg/l CH的MS液体培养基振荡培养,建立了增殖快、分散性良好的杉木悬浮细胞系。从4个月龄的悬浮细胞酶解(2％纤维素酶、0.25％果胶酶和13％甘露醇),游离得到大量的杉木原生质体,产量为9.3×10~5个/g FWW,活力...
关键词：
杉木 悬浮细胞系 原生质体的分离
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张守英 阙国宁
Callus was induced by embryos from mature seeds of Pinus serotina with MS medium contained 0.2 mg?L -1 of KT and 2.5 mg?L -1 of 2,4 D.After successive subculture and selection,six month old callus were transferred to a liquid medium with 0.2 mg?L -1 of KT and 0 5.0 mg?L -...
关键词：
晚松 悬浮细胞系 原生质体分离
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
龙炎杏 张学文 罗莎 肖楠 赵燕
为建立稳定的黄花蒿悬浮细胞系,以黄花蒿428–A植株的子叶、茎、腋芽和叶片为外植体,以MS为基础培养基,采用3因素(6–BA、NAA、2,4–D)4水平的L16(43)正交试验,优化黄花蒿愈伤组织诱导培养基,分析不同质量浓度(0、5、10、15、20、25、30 mg/L)潮霉素对黄花蒿悬浮细胞生长的影响,比较羧苄青霉素(0、100、150、200、250、300 mg/L)对农杆菌的抑制效果,并运用农杆菌介导法对黄花蒿悬浮细胞进行GUS报告基因及色氨酸单加氧酶iaaM基因的遗传转化。结果表明:黄花蒿叶片愈伤诱导率较高,叶片愈伤组织较优培养基为MS+6–BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,出愈率可达99.33%;潮霉素最适筛选质量浓度为30 mg/L,羧苄青霉素最适抑菌质量浓度为200 mg/L;转基因抗性愈伤GUS组织化学染色及PCR鉴定结果表明,外源基因iaaM已导入并整合至黄花蒿基因组中。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
何勇 田志宏 郑用琏
以马蹄金下胚轴愈伤组织为外植体,采用均匀设计探讨了不同生长调节剂和培养基对细胞悬浮培养的影响,建立了马蹄金悬浮细胞系。结果表明,不同生长调节剂组合的培养基对马蹄金悬浮细胞的干重和生长速度有显著影响,以B5培养基作悬浮培养的基本培养基效果较好,用B5+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L6-BA+0.5mg/LKT+2.0mg/Lα-NAA作为悬浮培养基,对悬浮细胞的干重增长和生长速度效果较好,经固化培养后,愈伤组织生长良好。悬浮细胞生长的时间进程是,起始培养的第6天前,细胞增殖十分缓慢;第6~12天期间生长迅速;第14天后基本停止生长。培养基的pH值迅速下降时是细胞增殖缓慢的时期;当培养基...
关键词：
马蹄金 胚性悬浮细胞 均匀设计
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张聪 蒲志刚 张婷 李明 屈会娟 谭文芳 杨松涛 王大一 阎文昭
选取8个四川主栽甘薯品种为材料,剥离茎尖诱导胚性愈伤组织,建立胚性细胞悬浮培养系。以烟草叶片和川薯20悬浮细胞为受体材料,利用农杆菌浸染方法转化抗除草剂基因EPSPS。结果表明,经PCR检测及草甘膦喷施试验后,获得了抗草甘膦阳性甘薯植株13株、阳性烟草植株25株,此实验为以EPSPS基因作为遗传转化的标记基因提供了帮助。
关键词：
甘薯 悬浮细胞 草甘膦 除草剂 遗传转化
[期刊] 西南农业学报
[作者]
周晓罡 丁玉梅 孙茂林 陈亮 苏源 张绍松 李成云
以IRR I-Japan 24个水稻抗稻瘟病单基因鉴别品系和对照普感品种丽江新团黑谷(LTH)的成熟种胚为材料诱导愈伤组织,诱导过程中发现不同基因型愈伤组织诱导能力差异极大,愈伤组织诱导率在14.3%~97.1%,将2,4-D浓度从3.0 mg/L提高到5.0 mg/L时,可提高愈伤组织诱导率。经诱导成功的水稻愈伤组织继代培养一段时间后,不同基因型的愈伤组织继代特性出现明显差异,选取生长状态良好的单株系愈伤组织建立了水稻悬浮细胞系,悬浮培养过程中对胚性悬浮系的细胞形态变化进行了观察,发现细胞的形状由开始的不规则、长条形逐渐转变成近椭圆形、椭圆形;细胞质由很淡、透明、具明显的大液泡逐渐转变成浓厚...
关键词：
愈伤组织 悬浮细胞系 单基因系 水稻
[期刊] 林业科学
[作者]
张望东 张绮纹
对群众杨首次进行了悬浮细胞培养，对悬浮细胞系的生长进行测定，同时对耐盐体细胞变异体进行了初步筛选，获得了耐３．０‰－４．０‰不同ＮａＣｌ水平的不定芽。获得适宜悬浮、松脆、易分散的愈伤组织是悬浮的关键，对不同供试脱分化激素配比的试验结果表明，诱导愈伤组织的ＭＳ＋２，４－Ｄ（０．４５ｍｇ／Ｌ）＋ＮＡＡ（０．３ｍｇ／Ｌ）＋Ｋｉｎｅｔｉｎ（０．１ｍｇ／Ｌ）为最好．合适的液体培养基成份和培养技术也是悬浮细胞培养成败的主要因素。液体培养基中附加ＮＡＡ或Ｋｉｎｅｔｉｎ，会使游离细胞中管状和液泡化成热细胞增加，同时，悬液中畸形细胞和细胞碎片也大量增加。液体培养基以Ｍｓ＋２，４－Ｄ（０．５ｍｇ／Ｌ）＋蔗糖（３０...
关键词：
群众杨,细胞悬浮培养,耐盐细胞系,不定芽
[期刊] 林业科学研究
[作者]
梁军 魏刚 吕全 贾秀贞 张星耀
研究了印楝细胞悬浮培养系的建立及印楝细胞悬浮培养的条件。结果表明,印楝细胞悬浮系的建立以B5培养基,NAA2 0～4 0mg·L-1,采用直接倾倒法作为接种方法为好;基于生物量、印楝素含量和印楝素产率综合分析认为,印楝细胞悬浮培养的最佳条件为B5培养基,NAA2～4mg·L-1,蔗糖30g·L-1,培养温度25℃,及根据培养容器的大小选择合适的转速和装液量。
关键词：
印楝 细胞悬浮培养 印楝素 植物源农药
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
徐悦 梁利群 孙博 常玉梅
为探究碱水环境中自然优势种瓦氏雅罗鱼(Leuciscus waleckii)的耐碱离子调节机制，采用胰蛋白酶消化法对其鳃细胞(Gill cells ofLeuciscuswaleckii，LWG)进行体外培养，确定该类原代和传代细胞培养的适宜条件并进行耐受实验，用以对瓦氏雅罗鱼在碱生境中的生长特性进行论证。结果表明：瓦氏雅罗鱼原代鳃细胞培养在15℃，含有10%胎牛血清(Fetal bovine serum，FBS)的DMEM培养基（Dulbecco's modified eagle medium）中可获得稳定、良好的培养效果；36 h～72 h即可传代，稳定传代后的细胞命名为：LWG细胞。传代培养过程中，36 h时LWG细胞生长代谢旺盛可用于后续实验。碱水生境中，为缓解碱离子对鱼体造成的损伤，鳃细胞将启动渗透压胁迫应答机制。本研究对LWG细胞进行碱胁迫实验并检测其细胞活性和功能后发现：LWG细胞在25～50 mmol/L NaHCO_(3)浓度下耐受3h时，增殖率约60%并初现细胞凋亡。由此推断，在25～50 mmol/L的碳酸盐碱度胁迫下，LWG细胞具有强渗透压的碱度耐受性并促使细胞发生凋亡现象。对LWG细胞原代培养条件的摸索，将为探索瓦氏雅罗鱼碱胁迫下渗透压应激响应机制和相关基因功能的验证提供相对稳定的实验材料。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张绮纹 张望东
本试验以群众杨３９号为试材，通过耐盐胁迫悬浮培养建立耐盐悬浮细胞系，经愈伤组织成功培育出耐ＮａＣｌ３．０‰～３．５‰的群众杨体细胞变异体的完整植株。实验表明，ＭＳ培养基附加０．４５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．３ｍｇ／ＬＮＡＡ和０１ｍｇ／ＬＫｉｎｅｔｉｎｅ的Ｍ４培养基能较好地获得松脆、易分散的愈伤组织。液体以ＭＳ培养基只附加０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的ＬＭ３为最好，附加氨基酸有益于悬浮细胞的正常生长。还对悬浮培养细胞的有关参数进行了测定。耐盐悬浮细胞培养实验结果表明ＮａＣｌ对细胞生长有抑制作用，并随着ＮａＣｌ升高而加强。对获得的耐３‰～６‰各水平ＮａＣｌ悬浮细胞经高密度植板，都能形成愈伤组织。耐盐愈伤...
[期刊] 华北农学报
[作者]
张楠 王保军 张秀清 张京声 孙君社
研究了元宝草悬浮细胞生长及其金丝桃素类物质(金丝桃素和假金丝桃素)的代谢规律。悬浮培养细胞的生长周期为18 d,其中4~10 d是对数期。金丝桃素类物质在10 d达到46.06μg/g(DW),其含量增加与细胞鲜质量增长相偶联。可溶性糖的消耗与细胞的生长以及金丝桃素类物质的代谢有着密切的关系,是影响细胞鲜质量和金丝桃素类物质增长的重要因素。
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