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[期刊] 中国水产科学  [作者] 刘迪秋  葛锋  陈朝银  李忠  梁宏伟  邹桂伟  
采用半定量RT-PCR分析重金属Cu、Cd在不同剂量以及不同处理时间下对鲫(Carassiusauratus)肝脏组织基因表达的影响。共检测了过氧化氢酶、热激蛋白、金属硫蛋白等17个逆境胁迫相关基因。9个Cu处理中,GSTα、GSTπ、CAT在鲫肝脏中诱导表达,其余基因的表达特性属于中间型,即在一些处理中表达上调,另一些处理中表达下调。Cd处理中,只有GSTα属于完全的诱导表达型基因。HSP30、GR以及GPx4a在Cd胁迫的鲫肝脏中表达受抑制,其余基因的表达属于中间型。虽然Cu、Cd胁迫对各基因转录水平的的影响不尽相同,多数处理中Cu诱导基因表达的程度略高于Cd。实验结果还显示,本研究设置的...
[期刊] 海洋水产研究  [作者] 刘伟成  李明云  黄福勇  竺俊全  崔云  
研究了在重金属镉胁迫条件下,大弹涂鱼(Boleophthalmuspectinirostris)肝脏黄嘌呤氧化酶活性的变化。重金属镉胁迫12h时0·5mg/LCd2+组XOD酶活性和对照组比较显著升高(P<0·01)。在镉胁迫解除5d时,3个浓度组的酶活性均极显著降低(P0·...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张文旭  王宝维  葛文华  张名爱  李文立  
【目的】探讨胆碱对青农灰鹅体内脂质转运、代谢的作用及脂肪酸合成酶FAS(fatty acid synthase)基因表达的影响,确定鹅日粮中胆碱的最适添加量。【方法】将180只1日龄青农灰鹅随机分为6个处理组,每处理组3个重复,每个重复10只。试验在玉米-豆粕型饲粮的基础上各组的胆碱添加量分别为0、600、1 200、1 800、2 400和3 000 mg.kg-1,试验期15周。屠宰后测定肝脏和血清总胆固醇、甘油三酯,血清低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖、胰岛素、胰高血糖素水平,肝脏脂蛋白酯酶、肝脂酶及血清胆碱酯酶活性和肝脏脂肪酸合成酶(FAS)基因表达量。【结果】①4周龄时...
[期刊] 水产学报  [作者] 孙君君  卢荣华  杨峰  秦超彬  杨丽萍  王俊丽  孔祥会  李学军  聂国兴  
固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控糖脂代谢相关基因表达的关键核转录因子。为获知草鱼SREBP-1基因的序列及其在肝脏中的表达规律,本实验采用同源克隆和RACE方法获得了草鱼SREBP-1基因的部分cDNA序列,并通过生物信息学方法对该基因及所编码蛋白的结构特征进行了分析;采用实时荧光定量PCR技术,对SREBP-1基因在8种不同组织的表达规律及低糖(糖含量24%)和高糖(糖含量42%)投喂条件下肝脏中的表达水平进行了研究。结果显示,所克隆到的草鱼SREBP-1基因cDNA长4 760 bp,其中包括开放读码框3 426bp,编码1 141个氨基酸;草鱼SREBP-1具有一个典型的碱性螺...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李英奇  梁雅旭  高霄霄  万珍  张国敏  王锋  
[目的]本试验旨在探讨高能饲粮对湖羊肝脏组织细胞增殖、能量代谢和脂代谢相关基因表达的影响。[方法]选取36只体况良好、体质量相近的3月龄湖羊公羔,随机分为正常日粮组(CON)和高能日粮组(HE),每组3个重复,每个重复6只。CON组和HE组个体饲喂日粮的能量水平分别为10和11 MJ·kg~(-1)。预饲14 d后正式饲喂60 d,试验结束后屠宰并采集肝脏组织,用于H&E染色、免疫组化检测和荧光定量PCR(qPCR)、Western blot检测。[结果]H&E染色显示HE组湖羊肝脏组织中出现轻度空泡样变性;免疫组化发现PCNA蛋白主要表达于肝细胞核中,mTOR和LXRα蛋白主要定位在肝细胞质中。高能饲粮饲喂显著提高肝脏组织PCNA和SREBP-1c的mRNA与蛋白表达水平(P<0.05),显著降低肝脏组织LKB1和AMPK的mRNA与蛋白的表达水平(P<0.05),显著降低肝脏组织PGC-1α和SIRT1的蛋白表达水平(P0.05)。[结论]提高湖羊的日粮能量水平能增强湖羊肝脏组织的细胞增殖及脂肪合成能力。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王文涛  
为了研究Cst B基因在大白猪、野猪及野家杂交猪肝脏组织中表达情况,采用RT-PCR技术对不同品种猪只进行检测,结果表明,肝脏中Cst B基因的表达在90,180,360日龄的大白猪表达量较低,其他个体表达量相对较高。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 常振宇  董海龙  张笑冰  吴庆侠  
[目的]探究不同用量纳米氧化铜(nano-CuO)对藏鸡生产性能及肝组织原癌基因(c-Myc)表达的影响。[方法]取14日龄藏鸡120羽,随机分为空白对照组和低、中、高不同剂量nano-CuO组,每组设置3个重复,空白对照组藏鸡饲喂基础日粮,nano-CuO低、中、高剂量组藏鸡分别饲喂添加5,50和100 mg/kg nano-CuO的基础日粮,试验为期14 d。试验开始和结束时分别称量试鸡初始体质量和终末体质量,试验期间统计采食量,测算每组试鸡的平均日增质量、平均日采食量和饲料转化率等生产性能指标。28日龄时采集试鸡肝脏、肾脏样品,检测其金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量,用HE染色法检测肾脏的病理学变化,用免疫组化法检测肝组织c-Myc蛋白表达水平,用RT-PCR法测定肝组织c-Myc mRNA表达水平的变化。[结果]与对照组相比,添加5~50 mg/kg的nano-CuO能显著提高藏鸡的体质量和平均日增质量(P0.05),4组藏鸡的平均日采食量和饲料转化率无显著差异(P>0.05),随nano-CuO添加水平的增加,不同组织中的金属硫蛋白(MT)含量逐渐升高,且肾组织更容易受到nano-CuO添加水平的影响。5 mg/kg nano-CuO组试鸡肾小球结构清晰;50 mg/kg nano-CuO组肾小球毛细血管充血,周围可见少量血细胞;100 mg/kg nano-CuO组肾小球破裂、萎缩,肾小管可见上皮细胞脱落,淋巴细胞浸润。100 mg/kg nano-CuO组试鸡肝组织c-Myc蛋白表达水平高于5和50 mg/kg nano-CuO组,而其c-Myc mRNA表达水平较5和50 mg/kg nano-CuO组极显著升高(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王明发  田亚东  钟翔  康相涛  冯培刚  王恬  
为了研究肉鸡肝脏中金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量和MT mRNA表达水平作为评定锌源生物利用率的有效性,在固始鸡和AA肉鸡饲料中添加不同水平的饲料级硫酸锌(ZnSO4·H2O)、氧化锌(ZnO)和氨基酸络合锌(ZnAA),分别测定了2、3、4、5和6周龄末肝脏中MT含量和MT mRNA的表达水平。结果表明:品种间肝脏中MT含量和MT mRNA表达水平差异极显著,固始鸡高于AA肉鸡。锌源和锌添加水平对所测定指标产生显著影响,氨基酸络合锌显著高于硫酸锌,这两种锌源极显著高于氧化锌;随着锌添加水平增加,肉鸡肝脏中MT含量和MT mRNA表达水平提高,锌水平之间差异极显著。4周...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 苏胜彦  李齐发  陈睿  曾怡  祝红生  张翔  王艳平  谢庄  吴松青  刘玉弟  
【目的】筛选影响朗德鹅肥肝性状的候选基因,为朗德鹅肥肝性状的早期选择提供依据。【方法】气相色谱测定朗德鹅肝脏脂肪酸组分,H.E染色观察肝细胞形态,CT测定活体朗德鹅肝脏脂肪沉积状况,荧光实时定量PCR检测填饲对脂生成相关基因mRNA表达的影响。【结果】填饲朗德鹅的肝重、肝重指数显著增加(P<0.01),血清谷丙转氨酶、胆碱脂酶、甘油三酯和H-胆固醇显著提高(P<0.05),肝脏组织中A...
[期刊] 水产学报  [作者] 陈彩芳  沈伟良  霍礼辉  刘浩明  林志华  
研究了镉(Cd)的各个不同暴毒浓度(5,15,45,90μg/L)对泥蚶鳃和肝脏组织显微结构的影响,及高浓度暴毒情况下对泥蚶鳃和肝脏组织超微结构的影响。实验处理时间为96 h。结果发现,随着暴毒浓度的升高,鳃丝内腔隙肿胀,内有血细胞堆积,最后鳃丝出现断裂融合,其上的呼吸上皮细胞脱落,超微结构发现鳃上皮细胞中出现黑色嗜锇性物质,且次级溶酶体和线粒体数量都增加,最后细胞内出现空泡现象;Cd对肝脏显微结构的影响不大,仅出现了黄色沉积物,超微结构表明,肝细胞内亦出现了嗜锇性物质,次级溶酶体亦大量增加,这些现象与鳃丝内出现的情况一致,且肝细胞核还出现变形皱缩,甚至产生空泡,细胞出现了不可逆的损伤。最为敏...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 梁雅旭  邓凯平  张真  高霄霄  王智博  王锋  樊懿萱  
[目的]本试验旨在探究日粮中添加富含多不饱和脂肪酸的15%紫苏籽(PFS)对湖羊肝脏自噬和凋亡的影响。[方法]选取30只体重相近且健康状况良好的2月龄湖羊公羔,随机分为2组,分别饲喂含0%(对照)和15%PFS的日粮。饲养84 d后,每组随机选择5只羊屠宰,采集肝脏组织。通过qPCR和Western blot等技术检测肝脏中自噬、凋亡及LKB1-AMPK-MTOR信号通路相关基因与蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,15%PFS显著上调PPARGC1A、BECN1、ATG5、ATG7基因和PPARGC1A、BECN1蛋白表达水平(P0.05);15%PFS组肝脏组织中LKB1-AMPK-MTOR通路关键基因LKB1、AMPK和MTOR mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05)。[结论]紫苏籽可能通过调控LKB1-AMPK-MTOR信号通路和自噬相关基因与蛋白的表达水平,进而调控湖羊肝脏自噬进程。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 梁雅旭  邓凯平  张真  高霄霄  王智博  王锋  樊懿萱  
[目的]本试验旨在探究日粮中添加富含多不饱和脂肪酸(polyunsaturatedfatty acids, PUFA)的15%紫苏籽(perilla frutescens seed, PFS)对湖羊肝脏自噬和凋亡的影响。[方法]选取30只体重相近且健康状况良好的2月龄湖羊公羔,随机分为两组,分别饲喂含0%和15% PFS的日粮。饲养84 d后,每组随机选择5只羊屠宰,采集肝脏组织。通过qPCR和Western blot等技术检测肝脏中自噬、凋亡及LKB1-AMPK-MTOR信号通路相关基因与蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,15% PFS显著上调PPARGC1A、BECN1、ATG5、ATG7基因和PPARGC1A、BECN1蛋白表达水平(P < 0.05),对凋亡相关基因的表达水平无显著影响(P > 0.05);15% PFS组肝脏组织中LKB1-AMPK-MTOR通路关键基因LKB1、AMPK和MTOR mRNA表达水平显著高于对照组(P < 0.05)。[结论]紫苏籽可能通过调控LKB1-AMPK-MTOR信号通路和自噬相关基因与蛋白的表达水平,进而调控湖羊肝脏自噬进程。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 陈璐  杨臻  徐锦华  乔璐  宋金龙  孙慧武  穆迎春  
除虫脲(diflubenzuron, DFB)是一种常用的杀虫剂,其代谢物残留会威胁水生动物及人体健康。为探究水产动物响应DFB胁迫的分子机制,本研究以鲤(Cyprinus carpio)为对象,选定0.1 mg/L和1.0 mg/L的药浴浓度对鲤进行15 d暴露实验。采用RNA-Seq技术对肝脏开展转录组测序,以P_(adj)
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 魏周文  孙超  姜东凤  侯增淼  刘春伟  
【目的】探讨二十二碳六烯酸(DHA)对小鼠脂肪组织和肝脏生脂相关基因过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)、固醇调节元件结合蛋白-1c基因(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶基因(FAS),及脂解相关基因激素敏感脂酶基因(HSL)和甘油三酯水解酶(TGH)时序表达的影响。【方法】用不同浓度DHA(6.25和12.5 g/kg)灌胃小鼠,分别于0,1,2,4,8,16和24 h处死,取脂肪组织和肝脏,提取总RNA,半定量(semi-quantitative,SQ)RT-PCR方法检测生脂及脂解基因PPARγ、SREBP-1c、FAS,及脂解相关基因HSL和TGH的时序表达规律。【结果】脂肪组织中...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张国敏  程春雨  刘建玲  安世钰  张婷婷  王子玉  孟繁星  樊懿萱  雷治海  王锋  
[目的]本试验旨在探究早期能量限饲与后期能量补偿对湖羊生长性能、肝脏组织中Hippo信号通路核心基因和AMPK蛋白表达的影响。[方法]选择32只系谱背景清楚、体质量相近的3月龄雄性湖羊羔羊,随机均分为对照组和补偿生长组。试验分为能量限饲(60 d)和补偿(90 d)2个阶段,能量限饲阶段对照组和试验组饲喂日粮的代谢能分别为11.64和6.84 MJ·kg~(-1),在能量补偿阶段日粮的代谢能均为12.86 MJ·kg~(-1)。饲养结束后屠宰,测定,再通过RT-qPCR和Western blot检测肝脏组织中Hippo通路核心基因和AMPK蛋白的表达变化。[结果]在能量限饲阶段,与对照组相比,能量限饲显著降低了补偿组湖羊的肝脏质量和体质量(P<0.05),湖羊肝脏组织中Hippo通路核心基因和YAP1蛋白的表达量显著降低(P<0.05),而AMPK的mRNA和蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05)。在能量补偿阶段,补偿组湖羊的肝脏质量和体质量、湖羊肝脏组织中Hippo通路核心基因(除YAP1外)的表达量和AMPK蛋白的磷酸化水平均与对照组差异不显著。[结论]湖羊在适当水平的能量限饲后进行补偿处理具有补偿生长现象,Hippo通路和AMPK蛋白可能共同参与不同营养水平下对湖羊肝脏发育的调节。
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