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[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
卢磊 赵敏 赵丽艳 梁书诚 李泰仑 杜美惠
为了研究血红密孔菌漆酶重组表达后的酶学性质和染料脱色效果,利用超滤、阴离子交换层析和凝胶层析从毕赤酵母发酵液中纯化出重组漆酶。结果表明:重组漆酶分子质量为62.8kD,氧化底物2,2′-连氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、丁香醛连氮和2,6-二甲氧基苯酚的最适pH分别为2.2、4.2和4.0,动力学常数Km分别为20.73、48.48和1252.39μmol/L;该漆酶在有机溶剂中的活性稳定性:甲醇>乙醇>丙酮>二甲基亚砜;在铜离子和铝离子中酶活比较稳定,汞离子对酶活有较强的抑制作用;纯化的重组漆酶在无介体时可有效脱色RB亮蓝,但对靛红和结晶紫的脱色较为缓慢;当添加介体ABTS...
关键词：
漆酶 酶学性质 介体 染料脱色
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
韩旭 赵敏 卢磊
疣孢漆斑菌代谢产生的胆红素氧化酶在环境保护等领域有较大的应用潜力。为了提高胆红素氧化酶的产量,采用单因素试验和正交试验相结合的方法,研究培养基中C、N、金属离子及诱导剂对疣孢漆斑菌3.2190产酶的影响。结果表明,在产酶培养基中,葡萄糖和大豆蛋白胨为最适C源和N源,添加2mmol/L铜离子和0.1mmol/L的诱导剂均可以提高发酵液的酶活。正交试验得到的优化组合为:葡萄糖10g/L,大豆蛋白胨7.5g/L,CuSO41mmol/L,没食子酸0.1mmol/L,优化后发酵液酶活提高了3倍。初步纯化的胆红素氧化酶最适反应温度为40℃,最适pH值为7.5。在1000U/L的酶活下,只需50min就可...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
赵丽艳 赵敏 卢磊 王天女
本文通过一色齿毛菌LS0547漆酶粗酶液与紫脲酸(VA)或乙酰丁香酮(Ace)组成的漆酶--介体系统对结晶紫、靛红、活性黑KN--B染料进行脱色试验,探索pH、温度、染料浓度和漆酶浓度等条件对其脱色效果的影响。结果表明:在介体乙酰丁香酮(Ace)作用下,漆酶脱色靛红和活性黑KN--B效率高;在介体紫脲酸(VA)作用下结晶紫脱色效果好。pH4.0、50℃结晶紫的脱色率为95.42%,40℃靛红脱色率为99.86%,且基本不受pH限制;pH6.0、40℃活性黑KN--B脱色率达92.38%,表明一色齿毛菌漆酶在介体参与下可有效用于工业染料废水的处理。
关键词：
一色齿毛菌 漆酶 介体 染料 脱色
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
汪春蕾 李凡姝 孙海琼 赵敏 苏秋钰 亓旭辉
利用含铜离子的富集培养基，从东北林业大学实验林场蒙古栎林下的土壤中筛选出具有较高漆酶活性的１株细菌，采用形态学、生理生化反应以及１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列同源性分析等方法，鉴定其为芽孢杆菌属细菌，命名为ＢＡｃｉｌｌｕＳ Ｓｐ．５｀ＭＳ。以丁香醛连氮为底物，以芽孢干重计算，其芽孢漆酶的活性高达５６．７３ ｕ／ｇ。菌株５｀ＭＳ芽孢漆酶的最适ｐＨ值为６．６，最适反应温度为７０℃。在１００℃条件下，该芽孢漆酶反应活性仍可达最适条件下的３４．６１％。当染料脱色体系中添加介体乙酰丁香酮时，菌株５｀ＭＳ芽孢漆酶１ Ｈ内对活性黑、靛红及结晶紫的脱色率均达９２％以上，４ Ｈ内对活性蓝的脱色率达８２．８％。
关键词：
芽孢杆菌属 芽孢漆酶 染料脱色
[期刊] 林业科学
[作者]
张玉龙 池玉杰 冯连荣
【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条带切割,采用Nano液相色谱-电喷雾串联质谱法联用(Nano LC-ESI-MS/MS)多肽测序技术对蛋白氨基酸序列进行测定。利用该SDS-PAGE图谱,建立蛋白分子量与迁移率的标准直线,从标准直线上求出MnP纯酶样品的表观分子量;参照酶活测定方法检
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
栗君 李国富 卢磊 潘俊波 赵敏 王天女 徐腾飞 王靖瑶
解淀粉芽孢杆菌LC03的芽孢漆酶具有较好的稳定性,通过制备具有漆酶活性的芽孢悬液,研究了芽孢漆酶对4种合成染料RB亮蓝、活性黑、靛红和结晶紫的脱色效果,并筛选出促进染料脱色的漆酶介体,同时考察了酶浓度、介体浓度对模拟染料废水脱色的影响。结果表明:RB亮蓝﹑活性黑和靛红在无介体时不能被脱色,在乙酰丁香酮(ACE)介导下的脱色率都超过了60.00%;在pH9.0时,芽孢漆酶-介体系统对模拟染料废水脱色的酶浓度和介体浓度分别为88.64U/L和0.5mmol/L时,2h后脱色率可超过80.00%,表明该芽孢漆酶在染料废水的处理上具有较好的应用前景。
关键词：
解淀粉芽孢杆菌 漆酶 介体 染料脱色
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
郭瑶 董旭杰 曹福祥 龙绛雪
为探讨白腐真菌对偶氮类、三苯甲烷类、醌胺类等染料的脱色降解作用,用Fomes lignosus对偶氮类染料中的刚果红、醌亚胺类中的结晶紫和三苯甲烷类中的中性红的脱色作用进行了研究。结果表明:木质层孔菌对各种染料均有降解作用,而对醌亚胺类染料结晶紫的脱色率最高为55.27%(12 h),最佳添加时间为第4 d,最佳温度为35℃,脱色时间在32 h时脱色率达到75%以上。
关键词：
木质层孔菌 染料 脱色降解
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
于存 池玉杰
为进一步鉴定试验菌株及明确一色齿毛菌CB1(Cerena unicolor CB1)对活性染料的脱色效果,在对该菌株ITS序列克隆的基础上,进行了其对活性黑和活性红2种活性染料脱色条件的研究。结果表明,C.unicolor CB1与17个同种其他菌株的ITS序列相似性为93%~99%,说明试验菌株为一色齿毛菌。染料脱色结果表明,250 mg/L的活性黑对C.unicolor CB1的脱色产生明显的抑制,而500 mg/L的活性红对该菌株的脱色抑制不明显。C.unicolor CB1对活性黑和活性红的脱色最适碳源分别是果糖和葡萄糖;最适氮源分别是尿素和硝酸铵;最适Cu2+和Mn2+添加浓度都为0...
关键词：
一色齿毛菌 ITS序列 活性染料 脱色
[期刊] 林业科学
[作者]
于存 池玉杰
锰过氧化物酶(MnP)是白腐菌分泌的一种能有效降解木质素及多种异生物质的过氧化物酶。首先对一色齿毛菌在初始条件下进行培养,获得其产生MnP的活性规律曲线,进而进行最佳碳源和最佳氮源的筛选及2次正交试验对一色齿毛菌产MnP的培养条件进行优化;然后对优化后的胞外酶液进行5种染料的脱色研究。结果表明,一色齿毛菌产MnP的最优组合为:果糖10 g·L-1、硝酸铵0.2 g·L-1、Mn2+2.67 mmol·L-1、pH 5.5、250 mL三角瓶70 mL装液量、150 r·min-1摇瓶培养、接种=8 mm的菌片9片、在34℃下培养7天后MnP活性高达95.47 U·L-1,是初始培养条件最高酶...
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
陈梦扬 姚泽秀 李永春 吴涵韬 徐秋芳 魏健 秦华
应用平板分离培养和内转录间隔区（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ ｓｐａｃｅｒｓ，ｉｔｓ）序列分析的方法，筛选鉴定集约栽培雷竹ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ ｖｉｏｌａｓｃｅｎｓ林土壤中染料降解真菌菌株，并通过摇瓶发酵研究其染料脱色效果。结果表明：土壤样品中分离频次最高的真菌种类为木霉菌属ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ，对５株接种到苯胺蓝平板上能形成明显水解圈的真菌分离物，测试它们对偶氮和三苯甲烷类染料的降解能力。综合脱色效果较好的菌株为ｐ７－２－３和ｐ１２－２－４，ｉｔｓ序列比对和形态学观察表明菌株分别是卷枝毛霉ｍｕｃｏｒ ｃｉｒｃｉｎｅｌｌｏｉｄｅｓ和木霉菌ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｓｐ．，接种．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吕莹果 张晖 马晓博 姚惠源
【目的】分离纯化米胚芽谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD),并对其酶学性质进行研究。【方法】通过(NH4)2SO4分级沉淀、DEAE-Sephrose FF离子交换色谱、Superdex 200凝胶过滤色谱和Glu SephroseCL 4B亲和色谱等分离纯化技术,对米胚芽GAD进行分离纯化。用体积排阻高效液相色谱测定米胚GAD的相对分子质量,SDS-PAGE测定其亚基的相对分子质量。测定米胚GAD的最适温度和pH,通过酶动力学试验测定其动力学常数(Km)和最大反应速度(Vmax),并测定KCl和MgSO4等化学物质对酶活性的影响。【结果】分离纯化得到了米胚G...
关键词：
米胚芽 谷氨酸脱羧酶 酶学性质分析
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
苗雪霞 李喜梅 王金荣 贾新成
根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｓｐ．）ＭＲ０２０菌株所产胞外植酸酶，经硫酸铵分级沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－ｃｅｌｕｌｏｓｅ离子交换层析，获得了２种植酸酶同工酶，其相对分子质量分别为３４０００和４００００，等电点分别为３．４８和３．８５。二者作用的最适温度均为５５℃；最适ｐＨ分别为２．６和４．６。Ｃａ２＋、Ｆｅ２＋和Ｍｇ２＋对酶有激活作用，Ｃｕ２＋和ＮＢＳ２＋对酶有抑制作用
关键词：
植酸酶 根霉 纯化
[期刊] 林业科学
[作者]
孙世娜 池玉杰 于存 李月
【目的】对转入猴头菌ＭｎＰ１和ＭｎＰ２基因的２个构巢曲霉转化子菌株Ｔｎ０２Ａ７－Ｈｅ－ＭｎＰ１和Ｔｎ０２Ａ７－ＨｅＭｎＰ２产ＭｎＰ的初始培养条件进行优化，然后用优化后的酶液对３种染料进行脱色研究，以期提高锰过氧化物酶（ＭｎＰ）活性。【方法】采用单因素试验进行最适产酶温度的筛选；正交试验检测血红素浓度、Ｍｎ～（２＋）浓度、ＰＨ值和转速４个因素在３个水平下对酶活性的影响，并通过优化培养验证试验检测酶活性；吸光度法检测优化后的酶液对３种染料的脱色率。【结果】菌株Ｔｎ０２Ａ７－Ｈｅ－ＭｎＰ１产Ｔｎ０２Ａ７－Ｈｅ－ＭｎＰ１最适培养条件为：在ＭＭＰＧＲＴ培养基的基础上，加入２ Ｇ青杨木屑作为产酶底物，Ｍｎ．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
孙海琼 汪春蕾
从土壤中筛选出１株具有较高漆酶活性的菌株，经分子生物学方法鉴定，该菌株为芽孢杆菌属细菌，将其命名为Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．４Ｂｓ。菌株４Ｂｓ的最适生长温度和ｐＨ分别为３７℃和７．０，其在６％（ｗ／ｖ）Ｎａ ｃｌ溶液中能够正常生长，在含有２．０ ｍｍｏｌ／ｌ ｃｕ～（２＋）的培养基中仍生长旺盛。以丁香醛连氮为底物，菌株４Ｂｓ的芽孢漆酶活性为３５．６６ｕ／ｇ（干重），其芽孢漆酶最适反应温度为８０℃，最适反应ｐＨ值为６．８；０．１ ｍｍｏｌ／ｌ的半胱氨酸、二硫苏糖醇和叠氮化钠抑制其活性，１０ ｍｍｏｌ／ｌ的Ｎａ～＋， Ｋ～＋， ｃｕ～（２＋）和ｌｉ～＋能够增强其活性。在ｐＨ ６．８的体系中，菌株４Ｂ．．．
关键词：
细菌漆酶 芽孢杆菌 染料脱色 铜抗性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张舒平 周鹏 苏春元 江正强 闫巧娟
研究嗜热枯草芽孢杆菌壳聚糖酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及其重组酶的纯化和性质。该基因序列全长723bp,编码240个氨基酸。根据基因同源性分析,该壳聚糖酶与枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168的壳聚糖酶前体基因的同源性最高,为98%。粗酶液经Ni-IDA亲和层析得到电泳级纯酶,比活力高达1 051.8U/mg。经测定,该酶反应最适温度为45℃,最适pH为6.0,在40℃和pH 4.5～8.0下稳定。该酶为内切壳聚糖酶,能够高效降解壳聚糖,生成一系列的壳寡糖,在壳寡糖的制备生产方面具有广阔的应用前景。
关键词：
枯草芽孢杆菌 壳聚糖酶 纯化 酶学性质
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