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[期刊] 中国水产科学
[作者]
汪涛 曾庆祝 叶于明
以聚砜中空纤维为膜材料的超滤装置对扇贝边酶解液进行分离,分析酶解液超滤分离过程中的影响因素,如操作压力、温度、料液pH、体积浓度比率(VCR)等因素对膜透过速率的影响。结果表明,控制操作压力在0.05～0.10MPa,温度40～43℃,料液pH7.0左右,并在超滤过程中采用间断循环清洗的方法,可提高膜分离效率。经超滤的酶解透过液在色泽、风味、澄清度等方面均理想,营养成分保持较好,氨基酸态氮保存率较高,可达92.2%。
关键词：
超滤 膜分离 扇贝边 酶解液
[期刊] 中国水产科学
[作者]
曾庆祝 汪涛 叶于明
研究了混合酶水解扇贝边蛋白质的技术条件 ,并和单酶水解情况进行了比较。结果表明 ,混合酶水解可提高水解液中氨基酸态氮 (AAN )含量 ,同时改善了水解液风味。本文引进二次正交旋转组合试验设计方案 ,系统地研究了影响混合酶水解效果的相关因素 ,得出了扇贝边水解液中氨基酸态氮生成量的变化规律—回归模型。应用该模型可对水解液中AAN生成量进行预测 ,也可进一步优化选择扇贝边的酶解条件。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
牛瑞 孙谧 于建生 郑媛 王海英
以扇贝(Chlamys farreri)裙边为研究对象,通过海洋碱性蛋白酶水解获得抗氧化肽。研究酶解温度、pH值、固液比、加酶量、酶解时间对酶解效果的影响。在单因素实验的基础上选取实验因素和水平,采用L16(45)正交试验,根据Box-Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,对酶解条件进行优化研究。结果表明,最佳酶解条件为:固液比1:3.26(m/V),加酶量0.44%(W/V),温度31.20℃,pH值为9.0,酶解时间为1 h,羟自由基清除率为83.78%,与预测值的相对误差为0.29%,理论值与预测值基本一致,预测模型能较好地反映实际情况。本研究旨在为今后扇贝裙边蛋白的开发...
关键词：
扇贝裙边 抗氧化肽 酶解 响应面分析
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
焦奎 高翔 于佳 魏玉西 高洁 张雪梅 王金梅 李钰金
扇贝裙边富含蛋白质、脂质等营养成分。为了高值化利用扇贝裙边,本研究选用中性蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶5种酶,以酶解液中游离氨基酸态氮为考察指标,对扇贝裙边进行酶解工艺条件探讨。首先,将5种酶制成复合蛋白酶进行正交实验,确定最佳酶解时间、温度、pH及加酶量,经检验,氨基酸转化率为77%;然后,通过实验确定CaCl_2为最适钙源,以贝壳为原料,通过水飞法和酸法转化可制得贝壳源CaCl_2。将扇贝裙边酶解液中复合氨基酸与来源于贝壳的钙螯合制备复合氨基酸螯合钙,以正交实验筛选出最佳螯合条件。经检验,该螯合反应螯合率达92%。
[期刊] 水产学报
[作者]
贲月 郝振林 丁君 常亚青
在实验室内检测了虾夷扇贝对高温突变的耐受能力及在不同高温水平下的存活与相关免疫酶活力。实验分两个阶段:实验Ⅰ,15℃暂养的虾夷扇贝分别被驯化到20、22、24及26℃,检测虾夷扇贝的存活及相关免疫指标。结果表明,15～22℃处理组虾夷扇贝存活率均大于85.21%,且组间无显著差异(P>0.05),26℃处理组存活率最低,为26.33%。随温度升高,虾夷扇贝体腔液中T-AOC和MDA含量变化显著(P0.05),CAT活力随温度升高呈先下降后上升趋势。实验Ⅱ,15℃暂养的虾夷扇贝分别被放到20、22、24及26℃,并在1、2、4、8、12、24、48和96 ...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王俊 姜祖辉 唐启升
自青岛近海扇贝养殖区取栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)暂养 2周 ,壳长达 2 5 .0 1～ 73.92mm。实验前停食 2 4h ,实验温度梯度为 8、13、18、2 3、2 8℃ ,其间投喂不同密度的小球藻 (Chlorellaspp .) ,静态实验。结果显示 ,栉孔扇贝的滤食率与温度和体重成正比 ,且与体重呈幂函数关系。在实验的温度范围内栉孔扇贝滤食率为 1.0 7～ 11.6 6mg/ (ind·h) ,2 3℃时达到最高值 ,2 8℃时开始下降。随饵料密度的增加 ,栉孔扇贝的滤食率增加 ,同化率下降 ,且同化率与饵料质量成正相关关系。同化率与温度和体重的关系不明显
关键词：
栉孔扇贝 滤食率 同化率
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
陈维 魏守祥 李禹含 潘鲁青
采用匀浆、差速离心、镜检和标志酶测定等方法,研究了栉孔扇贝(Chlamys farreri)消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术。结果显示,经Hoechst33258染色,在匀浆2min对照组中,观察到大量栉孔扇贝消化盲囊完整细胞,呈圆形或椭圆形,细胞膜完整,荧光强度较高;在匀浆3、4、5 min实验组中,完整细胞数目逐渐减少,且出现许多形态较小、荧光强度弱、轮廓模糊的细胞碎片。通过血球计数板法得到的细胞破碎结果与上述染色结果一致,随着匀浆时间(2～5 min)的增加,细胞破碎率升高,当匀浆时间达到5 min时,细胞破碎率升至94.24%。利用Hoechst 33258染色栉孔扇贝消化盲囊亚细胞分离组分(S2、C2、C4、S5和C5),镜检发现,C2组分荧光强度最强,荧光颗粒数目多,而其他组分荧光强度弱,且基本观察不到荧光颗粒。由此推测,细胞核主要存在于C2组分中;同时,细胞膜(5’-核苷酸酶)、线粒体(琥珀酸脱氢酶)、细胞质(乳酸脱氢酶)和微粒体(葡萄糖-6-磷酸酶)标志酶活力在其他亚细胞组分中有少量检出,但它们在S2、C4、S5和C5组分中的的标志酶活性比例较高(分别为63.90%、64.89%、77.82%和67.55%)。由此推测,S2、C2、C4、S5和C5分离组分分别为细胞膜、细胞核、细胞质、线粒体和微粒体。本研究成功构建了栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术方法,为贝类生理机制研究提供技术支持。
关键词：
栉孔扇贝 消化盲囊 亚细胞组分 分离鉴定
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
林海生 廖津 秦小明 曹文红 陈忠琴 高加龙 郑惠娜 章超桦 梁远维 陆韵琪 杨维
为挖掘华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)高值化利用的潜力，选用复合蛋白酶水解华贵栉孔扇贝的闭壳肌，探讨华贵栉孔扇贝闭壳肌酶解物（Enzymatic hydrolysate of Chlamys nobilis adductor muscle， EHCA）对α-葡萄糖苷酶活性的影响和对DPPH自由基的清除能力，并以空腹血糖浓度、血清胰岛素含量、肝脏丙二醛和超氧化物歧化酶含量等为指标，评价EHCA对正常小鼠体内辅助降血糖功能和抗氧化活性。结果表明，EHCA具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性，且其DPPH自由基清除能力随着酶解物浓度增加而上升；动物实验结果显示，一定浓度的EHCA能增强小鼠的糖耐量，并显著降低小鼠肝脏丙二醛，提高超氧化物歧化酶活力。复合蛋白酶能够有效酶解华贵栉孔扇贝闭壳肌，其酶解物具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化活性，具有一定的辅助降血糖作用。本研究结果为开发辅助降血糖海洋功能食品提供理论依据。
关键词：
酶解 华贵栉孔扇贝 降血糖活性 抗氧化
[期刊] 水产学报
[作者]
崔畅 杨祖晶 窦峥 陆维 邢强 黄晓婷 胡景杰 包振民
为了比较3种扇贝血液中的钾离子（K~(+)）、钠离子（Na~(+)）、钙离子（Ca~(2+)）、氯离子（Cl~(-)）浓度，血氧（pO_(2)）和血二氧化碳（pCO_(2)）气体分压及血液酸碱度（pH）的差异情况，实验利用血气分析仪对栉孔扇贝、虾夷扇贝和海湾扇贝的血液生理指标进行测定。结果显示，扇贝的血液生理指标呈现显著的物种差异，其中栉孔扇贝血液的K~(+)浓度[(15.74±1.47) mmol/L]、Na~(+)浓度[(388.07±11.38) mmol/L]、Cl~(-)浓度[(462.43±6.88) mmol/L]和pO_(2)[(140.13±15.35) mmHg]含量最高。此外，栉孔扇贝和虾夷扇贝的Ca~(2+)浓度和pCO_(2)含量较高，而海湾扇贝的pH最高。对相同月龄不同大小栉孔扇贝血液指标进行比较，发现栉孔扇贝的血液pH值与其壳高呈正相关（r = 0.611），而生理指标与壳高呈负相关。随着温度的升高，栉孔扇贝血液的Ca~(2+)浓度显著增加而pO_(2)显著下降，K~(+)、Na~(+)和Cl~(-)浓度先升高后恢复到初始水平，而pH和pCO_(2)保持相对稳定。研究结果为贝类血液生理研究提供参考，也为贝类生理状态的评估提供了一种新的思路与方法。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
胡昂 段蕊 刘志东 林娜 张俊杰 李磊 蒋玫
采用响应面法优化中性蛋白酶酶解海湾扇贝(Argopecten irradias)副产物蛋白制备抗氧化酶解物工艺。以DPPH自由基清除率和还原能力为响应值,在底物浓度、温度、时间、酶与底物比4个单因素实验基础上,优化确定3个显著性因素。获得实验条件下最佳制备工艺为:底物浓度25 mg·mL~(-1)、温度50℃、时间3.8 h、酶与底物比1.5%。在此条件下,实验验证酶解海湾扇贝副产物蛋白制备抗氧化酶解物的DPPH清除率为81.93%(预测值为83.19%),还原能力为58.12%(预测值为58.92%),DPPH自由基清除率和还原能力的IC_(50)值分别为0.264 mg·mL~(-1)和3.136 mg·mL~(-1),且表现出较强的抗氧化活性。研究表明,优化后的回归模型用于预测中性蛋白酶酶解海湾扇贝副产物蛋白制备抗氧化酶解物是可行的。
关键词：
海湾扇贝 副产物 抗氧化酶解物 响应面
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王宜艳 孙虎山 孙修勤 李光友
采用组织化学方法,AB-PAS染色,对人工养殖的1龄海湾扇贝(Argopecten irradians,壳长35～40 mm)进行显微观察,发现海湾扇贝唇瓣、口唇、胃、肠、直肠、晶杆囊和肝脏中均有粘液细胞分布,其中,内唇瓣的内表皮和外唇瓣的外表皮粘液细胞数量较多,其中Ⅱ型(AB-PAS染色呈蓝色)最多,Ⅳ型(蓝紫色)次之,Ⅲ型(紫红色)较少,Ⅰ型(红色)极少;内唇瓣的外表皮和外唇瓣的内表皮粘液细胞仅在每一横褶的皱褶处集中分布,多为Ⅱ型,另有少量Ⅳ型。口唇粘液细胞较多,排列比较紧密,Ⅱ型最多,ⅣJ型次之。胃粘液细胞数量很少,均为Ⅱ型。肠粘液细胞(Ⅱ型)较多,在肠上皮细胞较薄的区域分布密集。直肠粘...
关键词：
海湾扇贝 消化系统 粘液细胞
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
何斌 杨爱国 王清印 刘志鸿 周丽青
通过对栉孔扇贝Chlamys farreri×虾夷扇贝Patinopecten yessoensis正反单对杂交子一代幼虫进行ISSR(Inter Simple Sequence Repeats)标记,分析了双亲位点在杂交子一代中的传递分离方式。从20个ISSR引物中筛选出引物807和834进行扩增,正交家系和反交家系均统计了70条清晰稳定的扩增带。正交家系中双亲和F_1共有位点占总位点数的38.6%,仅由母本或父本传递给F_1的位点分别占总位点数的27.1%和21.4%。反交家系中双亲和F_1共有位点占总位点数的34.3%,仅由母本或父本传递给F_1的位点分别占总位点数的25.7%和22.9...
关键词：
栉孔扇贝 虾夷扇贝 单对杂交 ISSR
[期刊] 水产学报
[作者]
林华娟 秦小明 章超桦 长岛裕二
为了获得麻痹性毒素标准品,以毒化扇贝为试验材料,对扇贝中的麻痹性毒素(PSP毒素)进行了提取和分离纯化。以酸性80%乙醇溶液反复提取麻痹性毒素,得到了总毒性为6170MU的毒素粗提液。毒素粗提液经过超滤、Bio-GelP-2凝胶柱层析和Bio-Rex70离子交换柱层析等二次层析柱分离纯化后得到以膝沟藻毒素群(GTXs)为主的纯化PSP毒素。HPLC分析结果显示,扇贝中主要含有膝沟藻毒素GTX3,GTX1、GTX2、GTX3、和GTX4的组成比例约为2∶4∶14∶1(以HPLC上的峰面积比例计)。纯化后的毒素可以作为标准物质用于GTX1-4的HPLC分析。
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
刘丽燕 杨爱国 王清印 周丽青 刘志鸿
通过SDS-PAGE电泳,从提取液的倍数、提取时间、Triton X-100的浓度、SDS的有无等4个方面对提取条件进行优化,确定栉孔扇贝精子膜蛋白的最佳提取条件是:将精液150g离心去除精原细胞,0·1mol/L PBS缓冲液清洗两次,0·1mol/L Tris-HCl缓冲液清洗两次,3000g离心10min(4℃)得精子悬液;然后向精子悬液中加入3倍体积含1%Triton X-100和0.1%SDS的膜蛋白提取液中冰浴振摇1·5h;4℃,50000g离心15min,收集上清精子膜蛋白溶液。SDS-PAGE电泳后,考马斯亮蓝R-250染色检测出22种膜蛋白,分子量在23~156kDa之间,P...
关键词：
栉孔扇贝 精子膜蛋白 糖蛋白 脂蛋白
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
何斌 杨爱国 王清印 刘志鸿 周丽青
采用不连续垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对栉孔扇贝(Chlamys farreri)♀、虾夷扇贝(Pa-tinopecten yessoensis)♂及其杂交子一代的ADH、MDH、SDH、IDH、ME和SOD共6种同工酶的酶谱进行分析,以探讨双亲遗传物质在杂交子代中的表达情况及杂交子代基因的表达特征。结果表明,杂交子代的同工酶酶谱与母本栉孔扇贝的相似,而与父本虾夷扇贝的明显不同,说明父本虾夷扇贝的同工酶在杂交子代中没有表达。幼虫阶段的同工酶酶谱亦表明,父本虾夷扇贝的同工酶在杂交子代的幼虫阶段仍然没有表达。另外,在对母本栉孔扇贝群体和杂交子代群体的同工酶酶谱进行比较研究时发现,在杂交子代中出现了一...
关键词：
栉孔扇贝 虾夷扇贝 杂交 同工酶
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