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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 蔡向阳  谢勇平  蔡碧琼  郑新宇  李清禄  
采用荧光光谱法研究了烟酸(NTA)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.结果表明,NTA主要以动态猝灭的方式使BSA的内源性荧光下降.通过计算得出了在测定温度(T)为293和310 K时,NTA与BSA的结合常数(KA)分别为31.9和72.9 L·mol-1.根据热力学参数确定了NTA与BSA之间以疏水力相互作用.同步荧光光谱与紫外光谱技术分析表明,NTA对BSA的构象几乎没有影响.
[期刊] 山西财经大学学报  [作者] 孟玲菊  孟玲洁  玄兆坤  孟明辉  
文章主要运用荧光光谱研究了葛根素与人血清白蛋白结合反应的光谱特征,着重研究了葛根素对人血清白蛋白的荧光猝灭机理,得出了葛根素与人血清白蛋白的表观结合常数、结合位点数及结合距离,根据热力学参数确定了结合作用力的类型。
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 高兴军  郭明  李兵  郭建忠  李铭慧  
采用荧光光谱法和紫外光谱法研究了5种二价金属离子与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,通过生物大分子猝灭反应机制和结合位点模型研究发现锌离子Zn2+,镍离子Ni2+,钴离子Co2+和钙离子Ca2+均可导致牛血清白蛋白内源荧光猝灭,Zn2+,Ni2+和Co2+离子半径处在正常范围,能有效进入牛血清白蛋白结合位点与牛血清白蛋白结合形成超分子配合物,使牛血清白蛋白的二级结构发生改变,主要表现为静态猝灭。Ca2+离子半径较大,受空间位阻影响不能有效进入结合位点对BSA二级结构影响较小,不能与BSA形成配合物,表现为动态猝灭;而Mg2+由于大的水合半径阻碍了Mg2+与牛血清白蛋白的有效碰撞,使电子或能量的...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张淼  邹烨  王道营  杨玉玲  张牧焓  卞欢  吴海虹  诸永志  耿志明  徐为民  
[目的]研究不同影响因素对一磷酸腺苷(adenosine 5'-monophosphate,amp)和肌动球蛋白结合反应的影响,为进一步深入探讨amp与肌动球蛋白间的相互作用及改善鸭肉嫩度的最佳条件提供理论依据。[方法]以鸭肉肌动球蛋白为材料,采用荧光光谱法,选择不同影响因素(ph值、反应时间、缓冲溶液及离子溶液)处理amp-肌动球蛋白体系,测定其荧光光谱和反应过程中猝灭常数(Ksv)及结合常数(KLB)值,通过比较相关参数的变化,分析amp-肌动球蛋白体系在不同环境下的稳定性变化。[结果]ph值、反应时间、缓冲溶液及离子均对amp-肌动球蛋白体系稳定性有不同程度影响。amp-肌动球蛋白体系的...
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 徐兴涛  郭明  吴志武  李铭慧  高兴军  钱慈  
应用荧光光谱法结合紫外-可见分光光度法研究了中药分子土大黄苷(rhaponticin,RT)与牛血清白蛋白(bovineserum albumin,BSA)的结合反应机制,并考察了金属离子的介导作用。依据不同理论模型测定了反应体系的结合常数K、结合位点数n,并进行了分析比较,探讨了荧光猝灭机制。根据Fōrster非辐射能量转移机制确定了授体-受体间结合距离和能量转移效率。采用同步荧光技术考察了RT对BSA分子构象的影响。结果表明:不同理论模型计算的结合参数基本相符并显示出RT与BSA结合反应形成了稳定的静态复合物,RT对BSA分子的结构域微区构象产生了影响,导致BSA相应结构微区疏水环境改变。...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 昝林森  张莺莺  耿繁军  田万强  
【目的】研究海藻糖(TH)和牛血清白蛋白(BSA)单独或配合使用对牛精液冷冻效果的影响。【方法】向种公牛精液商业稀释液中添加不同浓度的TH(0,0.000 37,0.025和0.05 mol/L)和BSA(0,1,2,3 g/L),TH和BSA的4个添加水平分别两两组合,组成16个处理,以其中二者添加水平均为0作为对照,制作0.25 mL细管冻精,解冻(40℃,10 s)后比较分析精子活率、顶体完整率和质膜完整性3个指标。【结果】单独添加TH、BSA及其互作对牛精液的冷冻效果与对照组相比达到显著水平。与对照组相比,单独添加不同水平的TH或BSA对冻后牛精子活率和质膜完整率均有明显影响(P<0....
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王策  李侠  邓少颖  王航  张春晖  
【目的】研究羟基自由基(·OH)氧化对蛋白结构及其水合特性的影响,探讨氧化介导的关于蛋白质和水分相互作用的变化情况。【方法】将牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)溶解在含15 mmol·L(-1)的PIPES缓冲溶液中(pH 6.0),并在不同浓度H_2O_2(0、0.5、1.0、5.0、10.0和20.0 mmol·L(-1))的铁-抗坏血酸-过氧化氢(FeCl_3-Vc-H_2O_2)羟基自由基氧化体系孵育12 h,采用氨基酸自动分析仪分析BSA不同程度氧化的氨基酸含量变化
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王玮  滕爽  朱业培  徐幸莲  周光宏  
[目的]建立一种表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术,用于快速、准确、灵敏、定量检测动物过敏原牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)。[方法]将鼠抗BSA单克隆抗体偶联于SPR生物传感器芯片表面,监测BSA与抗体结合后芯片表面的变化,并基于SPR技术建立快速检测微量BSA的新方法,确定其检出限和最佳线性范围,并进行重复性验证和初步应用。[结果]抗体的偶联水平为18 000,对BSA具有良好的亲和能力;BSA质量浓度在6.25400 ng
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 朱业培  王玮  吕青骎  钱行  徐幸莲  周光宏  
[目的]制备鼠抗牛血清白蛋白(bovine serum albumin,bsa)单克隆抗体,在此基础上建立可用于定量检测动物过敏原bsa含量的间接竞争酶联免疫检测方法(iC-elisa)。[方法]采用bsa纯品为抗原免疫balb/C小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术制备抗bsa单克隆抗体,并对其特异性进行鉴定;在此基础上,建立bsa间接竞争elisa检测方法,并对其分析条件进行优化。[结果]采用自行制备的特异性抗bsa单克隆抗体,建立间接竞争elisa检测方法,优化得到最佳反应条件:抗原最佳包被浓度为0.25μg·m l~(-1),单抗最佳工作浓度为1∶32 000,酶标二抗最佳工作浓度为1∶10 ...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵永贞  魏雁  曹斌云  李莉  魏庆信  郑新民  
探讨了获取受精卵的时间、显微注射和培养液等因素对显微注射胚胎体外发育的影响。结果表明 :在注射HCG后 2 4~ 2 6h和 18~ 2 2h时获得的受精卵的囊胚率分别为 4 5 %和 2 0 % ,二者差异显著 ;注射胚和非注射胚卵裂率差异显著 (5 6 /80VS 74 /76 ) ,但显微注射对 2 细胞以后阶段的发育没有显著影响 ;mWM1培养液和mWM2 培养液都能有效克服受精卵体外发育阻断 ,mWM2 培养液更支持早期转基因胚胎体外发育。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王天顺  牙禹  范业赓  莫磊兴  廖洁  杨玉霞  闫飞燕  朱俊杰  
关键词:
[期刊] 华北农学报  [作者] 白薇  孙海莲  Mawsheng Chern  Randy Ruan  Pam Ronald  樊明寿  
NPR1(Non-expresser of pathogenesis related genes 1)是水杨酸(Salicilic acid,SA)介导的系统获得抗性(Sys-temic aquired resistance,SAR)的关键调控因子,在水稻中过量表达拟南芥NPR1和水稻NH1/OsNPR1(NPR1 homo-logue 1)(NPR1的同源物)可增强抗病性。水稻基因组中还有4个NPR1旁系同源物(Paralog),为NH1的家族蛋白。本试验利用双分子荧光互补技术(Bimolecular Fluorescence Complementation,BiFC,or split YF...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王玮  朱旭东  梁丽姣  舒蕊华  范巧君  
#N/A
[期刊] 中国农业科学  [作者] 徐琪  陈阳  李秀  黄正洋  张扬  李欣钰  童一宇  段修军  陈国宏  
【目的】克隆鸭血清白蛋白(duck serum albumin,DSA)基因,并对其进行生物信息学分析和mRNA表达规律研究。【方法】以前期抑制性消减杂交技术筛选的白蛋白(albumin,ALB)基因为候选基因,通过构建雏鸭肝炎病毒和聚肌苷酸胞苷酸(polyinosinic polycytidylic acid,Poly(I:C))感染模型,利用RT-PCR、RACE技术和基因组步移技术分别克隆ALB基因cDNA序列和5′侧翼序列,并对其进行生物信息学分析;同时利用RT-qPCR检测ALB基因各组织时空表达量。【结果】①ALB cDNA全序列长为2 107 bp,包括47 bp的5′UTR、2...
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)  [作者] 章纳  王衡瑞  毛彦娜  张成林  秦斌  王志民  
寨卡病毒(Zika Virus)属于黄病毒科中的黄病毒属,虽然很早就已经被人类所发现,但是一直到2015年在南美巴西的大规模爆发,才引起了广泛的关注.寨卡病毒对人类的感染往往引起包括小头畸形和格林-巴利综合征在内的多种症状.寨卡病毒的基因组为单链正链RNA,其基因组可以编码翻译并剪切加工出3个结构蛋白,分别为膜蛋白,囊膜蛋白和核衣壳蛋白,以及7个非结构蛋白(NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B, NS5).相关研究已经证明,NS1蛋白与同属黄病毒属的登革病毒的发病有紧密的联系,而且根据其蛋白结构推测其可能与寨卡病毒穿越血脑屏障有关.因此鉴别NS1与细胞内的相互作用蛋白对于发现寨卡病毒在细胞内的转运,转录,以及装配都有重大的意义.在此,该课题构建并在HEK293细胞中表达包含Flag和Strep两种标签的NS1融合蛋白,通过免疫沉淀的方法将与NS1结合的蛋白利用标签蛋白进行分离,利用高分辨生物质谱技术,对蛋白进行分析鉴定.通过分别带有Flag与Strep标签的相互作用蛋白分析,发现了16个两种标签共同的结合蛋白,其进一步的通路分析证明这些蛋白于与病毒转录、病毒复制和免疫反应多个通路有关,相关的研究结果为今后进一步研究寨卡病毒的复制机制以及开发抗病毒药物提供了重要的参考价值.
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