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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王利利 马彤辉 俞明远 汤林杰 张文君 许剑琴 刘风华 马云飞 滕可导
为研究运输应激对脑内五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)表达的影响及酸枣仁散对运输应激的调控作用,试验采用摇床模拟公路运输途中的摇晃、高温和拥挤等因素,建立大鼠运输应激模型(35℃,60r/min,每天应激2h,连续7d)。将40只大鼠随机分为对照组、酸枣仁组、应激组和应激+酸枣仁组,分别处理7d后,断头取脑,利用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化法检测各组大鼠脑区5-HT含量变化及分布。酶联免疫吸附法检测结果显示,与对照组相比,应激组大鼠中缝核、海马和纹状体等脑区5-HT表达量均明显减少(P<0.05),应激+酸枣仁组较应激组5-HT表达量显著增加(P<0.05)...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
俞明远 王利利 马彤辉 张文君 王齐桓 秦力猛 滕可导 马云飞
为研究运输应激对动物行为、内分泌以及脑内神经型一氧化氮合酶（ＮｅｕｒｏＮａｌ Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙＮｔｈａｓｅ，ＮＮｏｓ）表达的影响，采用摇床加制动束缚模拟公路运输途中的摇晃、拥挤和限制活动等因素，建立大鼠运输应激模型（３５℃，１２０ｒ／ｍｉＮ，应激２ｈ）。将１８只大鼠随机分为对照组、应激组和应激恢复组，采用旷场试验评定大鼠行为反应，放免法测定大鼠血清皮质酮含量，免疫组化法检测大鼠下丘脑视上核（ｓｕｐｒａｏｐｔｉｃ Ｎｕｃｌｅｕｓ，ｓｏＮ）中ＮＮｏｓ的表达。结果显示，与对照组相比，应激组大鼠的自主活动明显减少（ｐ＜０．０１），血清皮质酮（ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏＮｅ，ｃｏｒｔ）含量显．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
胡威 郑路程 易金鑫 郑文亚 徐梦婷 刘犇
采用苏木精–伊红(HE)染色、醋酸铀–枸橼酸铅染色和免疫组织化学染色,对模拟运输应激小鼠免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)的结构和3种热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达情况进行分析。结果表明:试验组小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏结构均受到不同程度的损伤,胸腺髓质增大,皮质中血管充血,淋巴小结缩小,脾小结增大,中央动脉被破坏,细胞发生凋亡等;淋巴细胞核核膜呈锯齿状甚至碎裂,嗜酸性粒细胞胞核溶解消失,浆细胞破坏更为严重,线粒体肿胀,嵴断裂或消失等;HSP27在淋巴小结中的表达逐渐降低,在淋巴结髓质和脾脏中的表达有所增加,HSP70在淋巴结髓质中的表达逐渐降低,在淋巴小结和脾脏红髓中的表达升高,HSP90仅在淋巴结中有明显表达。综上可知,运输所引起的应激反应会对小鼠免疫器官的结构造成严重损伤,应激相关热休克蛋白HSP27、HSP70和HSP90的表达情况也会发生一定的变化,提示热休克蛋白与运输应激之间可能存在着某些调控关系。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
胡威 郑路程 易金鑫 郑文亚 徐梦婷 刘犇
采用苏木精–伊红(HE)染色、醋酸铀–枸橼酸铅染色和免疫组织化学染色,对模拟运输应激小鼠免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)的结构和3种热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达情况进行分析。结果表明:试验组小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏结构均受到不同程度的损伤,胸腺髓质增大,皮质中血管充血,淋巴小结缩小,脾小结增大,中央动脉被破坏,细胞发生凋亡等;淋巴细胞核核膜呈锯齿状甚至碎裂,嗜酸性粒细胞胞核溶解消失,浆细胞破坏更为严重,线粒体肿胀,嵴断裂或消失等;HSP27在淋巴小结中的表达逐渐降低,在淋巴结髓质和脾脏中的表达有所增加,HSP70在淋巴结髓质中的表达逐渐降低,在淋巴小结和脾脏红髓中的表达升高,HSP90仅在淋巴结中有明显表达。综上可知,运输所引起的应激反应会对小鼠免疫器官的结构造成严重损伤,应激相关热休克蛋白HSP27、HSP70和HSP90的表达情况也会发生一定的变化,提示热休克蛋白与运输应激之间可能存在着某些调控关系。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李游 靳爱仙 梁宗锁 董娟娥
【目的】研究优化酸枣仁总黄酮的提取工艺。【方法】采用星点设计-效应面法,对酸枣仁总黄酮的超声提取工艺进行优化。以乙醇体积分数、液(体积,mL)料(质量,g)比、提取时间为自变量,以总黄酮提取量为因变量建立预测模型,并进行了验证。【结果】总黄酮提取量与3个影响因素不能用线性关系进行描述,采用二次多项式的拟合效果较好,复相关系数R2=0.887 9,具有较高的可信度。优选的最佳工艺为:乙醇体积分数84%,液料比40mL/g,提取时间35 min;最佳工艺验证结果与模型预测值相差2.30%,总黄酮提取率达到95.05%。【结论】星点设计-效应面法可以快速、简便地优化酸枣仁总黄酮的超声提取工艺,所建模...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
祝洪艳 张力娜 林海成 王月珍 王国丽 赵岩 郜玉钢 张连学
【目的】采用中心组合试验-响应面法优选酸枣仁皂苷的最佳回流提取工艺,为酸枣仁皂苷提取的工业化生产提供依据。【方法】采用HPLC-UV检测酸枣仁皂苷A和B的含量,用乙醇回流提取法,以乙醇体积分数(0,30%,50%,70%,80%,95%)、液固比(8∶1,10∶1,12∶1,15∶1,20∶1)、提取时间(1,1.5,2,2.5,3h)和提取次数(1,2,3,4)为考察因素,筛选各因素对酸枣仁皂苷提取影响的取值范围,在此基础上进行中心组合试验,用SAS(9.2)软件建立预测模型,响应面分析最佳提取条件。【结果】响应面分析优选得到的酸枣仁皂苷最佳提取工艺为:体积分数66%乙醇,液固比12.5∶1...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
郝建军 徐永平 王红梅 胡小海 多吉拉姆
【目的】研究5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)及5-HT1A受体在SD大鼠妊娠期子宫中的分布情况和变化规律。【方法】选取均为正常妊娠的30只雌性SD大鼠分为妊娠3 d、妊娠5 d、妊娠7 d、妊娠13 d、妊娠19 d及产后第1天6组,处死各组大鼠,取子宫制作石蜡切片,经免疫组织化学SP法染色后,进行观察分析。【结果】5-HT及5-HT1A受体免疫阳性产物广泛存在于子宫内膜上皮细胞、子宫腺上皮细胞、血管内皮细胞、基质细胞、蜕膜细胞、免疫细胞及肌纤维中;5-HT在妊娠7 d和妊娠13 d着色最深,5-HT1A受体在妊娠13 d着色最深。5-HT及5-HT1A受体免疫阳...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈正礼 罗启慧 范光丽 阿依木古丽 方静 潘康成 袁朝富
【目的】探讨雌激素对大鼠小脑内雌激素受体(ER)、神经生长因子(NGF)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达的影响。【方法】运用超敏感的免疫组织化学SP法,以老年SD大鼠小脑为研究对象,通过补充17β-雌二醇对ER、NGF和ChAT在小脑中的表达和分布变化进行研究。【结果】ER、NGF和ChAT免疫阳性反应物分布于小脑的蒲肯野氏细胞层、小脑齿状核、小脑间位核和小脑室顶核,ER阳性产物主要定位于细胞胞浆和突起中,也存在于胞膜和胞核中。老年大鼠小脑皮质及小脑核中ER、NGF和ChAT的表达强度及阳性细胞数量总趋势是显著降低,而补充17β-雌二醇后三种阳性产物的强度和阳性细胞数目显著回升,蒲肯野氏细胞的...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
曹力 贾利云 乔海莲 郑小敏 许勃 司丽芳 张燕 王根辈 范光丽
为了探讨下丘脑对妊娠的调节作用,采用免疫组织化学SP法研究了妊娠中期,正常妊娠大鼠及流产大鼠下丘脑内IFN-γ阳性神经元的形态与分布,同时利用图像分析软件测定了其灰度值。结果显示,正常妊娠大鼠和流产大鼠IFN-γ主要在下丘脑的视前大细胞核、室旁核、视上核、下丘脑前核等部位分布,而流产大鼠的IFN-γ阳性细胞数多于正常妊娠组且表达强于正常妊娠组。表明IFN-γ在下丘脑的表达对妊娠大鼠的神经内分泌调节有重要影响。
关键词：
妊娠大鼠 下丘脑 IFN-γ 免疫组化
[期刊] 水产学报
[作者]
黄辉洋 叶海辉 李少菁 王桂忠
为探讨5-羟色胺和神经肽Y在锯缘青蟹脑内的存在与否和分布状况,应用免疫细胞化学技术,在光学显微镜下观察5-羟色胺和神经肽Y阳性细胞和神经髓质的形态和分布。结果表明:在锯缘青蟹脑中共12个胞体群和11个神经髓质中,前脑和中脑中有4个细胞群和6个神经髓质检出5-HT免疫阳性反应;中脑和后脑中有7个细胞群和3个神经髓质具有NPY免疫阳性反应。5-羟色胺和神经肽Y在锯缘青蟹脑内的特异性分布,为其参与神经生理活动提供了形态学证据。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
宋爽 崔培 王尧尧 蒋书东 章孝荣 方富贵 李福宝
【目的】探究初情期启动前、启动中、启动后大鼠下丘脑、垂体和卵巢中神经激肽B(Neurokinin B,NKB)的表达变化。【方法】以SD雌性大鼠为研究对象,分别取大鼠的下丘脑、垂体和卵巢组织制作冰冻切片,运用免疫荧光染色法检测SD大鼠下丘脑、垂体和卵巢上NKB的分布。【结果】NKB主要分布于各时期大鼠下丘脑的弓状核、腹内侧核、室旁核、腺垂体以及卵巢的黄体细胞、间质细胞。但NKB在不同时期表达水平不同,在初情期启动前(出生后25d)和启动后(出生后60d)表达最强,在初情期启动中最弱(P<0.05)。同一时期不同核团之间NKB表达水平也不同,初情期启动前和启动中室旁核最强,弓状核次之,腹内侧核最...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
杨建民 赵德明 李宁 吴长德 宁章勇 郝永新 韩彩霞
为明确将牛PrPc重组蛋白接种金黄地鼠脑内是否引起异常临床表现、脑组织病理学变化及对其mRNA表达产生影响,为进一步研究PrPc蛋白与异构体PrPsc的结构转换机制提供基础数据,将纯化的牛PrPc重组蛋白磷酸盐缓冲液制剂进行地鼠颅内接种,约3μL/只,对照接种磷酸盐缓冲液(PBS);102 d后取出脑组织:一部分福尔马林固定后进行常规H.E.染色观察,另一部分提取脑组织总RNA,进行实时荧光定量RT-PCR检测。结果表明:处理未见临床异常表现;大脑、小脑、脑干组织病理学检测未见海绵状空泡变性和淀粉样斑;大脑PrPcmRNA表达水平无显著性差异。上述结果表明,用PrPc重组蛋白接种,在检测时间1...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
崔培 宋爽 王尧尧 王瑞瑞 王云 蒋书东 方富贵 李福宝
为研究雌二醇(Estradiol,E2)对大鼠下丘脑神经激肽B(Neurokinin B,NKB)表达的影响,采用免疫组化PV-9003二步法以及DAB显色技术,对外源性E2处理组(E2组)、花生油处理组(C组)、卵巢摘除+E2组(OVX+E2组)和卵巢摘除组(OVX组)大鼠下丘脑的NKB进行检测。结果表明:大鼠阴门开启时间E2组(29.00±0.707)与OVX+E2组(30.20±0.084)早于对照组(43.60±2.074)(P<0.01)。NKB主要分布于所有大鼠下丘脑的弓状核、腹内侧核和室旁核,且OVX组和C组室周核上也有少量表达(P<0.05),但各组间NKB的平均光密度值有差异...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
田光明 范光丽 田海霞 阿依木古丽 张永德 张燕 何玉龙 聂聪 王冠魁 李定强
利用免疫组化SP法,检测了去势及去势后补充雄激素大鼠嗅球中雄激素受体(A ndrogen recep-tors,AR)和神经生长因子(N erve grow th factor,NGF)蛋白的表达情况,探讨了雄激素对嗅球的作用机制。结果表明,睾丸摘除组大鼠嗅球内AR与NGF蛋白的表达显著减少;睾丸摘除并用睾酮替代组大鼠嗅球内2种蛋白的表达接近正常水平。说明去睾丸大鼠由于缺乏内源性雄激素,会引起嗅球内AR和NGF蛋白表达减少,而补充外源性雄激素可缓解或抑制这一变化。
关键词：
雄激素 嗅球 去睾丸 AR NGF
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
曹中赞 王晓娜 李静 陈美月 许建文 栾新红
为探讨抗应激添加剂对肉牛因运输应激导致机体应激蛋白表达波动的影响,揭示抗应激添加剂的作用以及肉牛运输应激发生的分子机理奠定理论基础,本试验选择27头体重和体况相近的健康出栏育肥辽育白牛,随机分成3组(n=9),其中对照组饲喂常规基础饲粮,2个添加剂组饲粮中分别添加抗应激1号和2号,饲喂10d后,在20℃、相对湿度51%的环境条件下,以50～60km·h-1的速度在公路上运输5h,分别采集运输前及运输后的肉牛血液及运输后的肉牛肌肉组织,制备血清,提取组织RNA及蛋白,采用ELISA、qRT-PCR、Western Blotting等方法分别检测血清中HSP70含量和肌肉组织中应激蛋白HSP27、HSP70及HSP90的mRNA和蛋白水平的表达量。结果表明:运输后各组肉牛血清HSP70含量显著高于运输前(p<0.05);添加剂组同对照组相比,运输前后血清HSP70均明显下降(p<0.05或p<0.01)。抗应激1号组肌肉组织HSP27、HSP70和HSP90的mRNA相对表达量较对照组明显下降(p<0.05),抗应激2号组肌肉组织中HSP90mRNA的表达量较抗应激1号组显著升高(p<0.05)。两个抗应激添加剂组肌肉组织HSP70和HSP90的蛋白表达量较对照组明显减少(p<0.05)。运输使肉牛血清和肌肉组织中应激蛋白含量增加,而抗应激添加剂可影响运输后肉牛血清及肌肉组织中应激蛋白的水平,尤以抗应激1号作用更明显。
关键词：
应激蛋白 抗应激 运输 添加剂 肉牛
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