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[期刊] 淡水渔业
[作者]
张国军 王高学 潘厚军 石存斌 吴淑勤
研究了酸性α-醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中应用的可行性。用不同比重的淋巴细胞分离液对鳜外周血中的淋巴细胞进行分离,结果表明比重为1.080的分离液可最大程度地将鳜外周血中的淋巴细胞分离出来。用酸性α-醋酸萘酯酶染色法对分离出的淋巴细胞进行染色,结果显示最佳的染色条件为在pH6.0~6.5的孵育液中37℃孵育90 m in,然后2%甲基绿37℃复染10 m in,酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞胞核被染成绿色而胞浆被染成红色,阴性细胞胞核和胞浆都被绿染。对正常未免疫鳜与嗜水气单胞菌脂多糖和鳜病毒主要衣壳蛋白免疫一周后的鳜外周血淋巴细胞染色计数,结果酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞所占的比例分别为1...
[期刊] 水产学报
[作者]
孙菊香 范丽君 贾林芝 厉小波 陈东华 曲迪 王群
以伊红和PI两种染色法,结合光学显微镜和流式细胞仪对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子的存活率进行评价研究。将新鲜精子和60℃水浴处理致死精子以不同比例混合,配成含有死精子比例为0%、20%、40%、60%、80%、100%的6个浓度梯度,将其作为"理论死亡率",分别用上述两种染色法进行检测。结果表明:伊红能有效区分死、活精子,其实测精子死亡率与"理论死亡率"之间具有明显的相关性,相关系数为R=0.98(P<0.01)。对伊红和PI两种染色法进行...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
韩伟国 刘新富 孟振 温海深 雷霁霖
综合运用肉眼观察、活体压片-醋酸洋红染色和组织切片-H.E.染色3种方法对大菱鲆Scophthalmu smaximusL.幼鱼进行性别鉴定。结果表明,在所有采集的1217尾全长8.3～21.5cm、体重9.0～183.9g的大菱鲆幼鱼样品中,体重>90g的269尾幼鱼和体重10～90g的790尾幼鱼,可用肉眼直接观察鉴定性别;体重10～90g的另外154尾幼鱼,可采用活体压片方法鉴定性别;体重10g的幼鱼,均可以采用活体压片方法准确地鉴定出性别,其准确率可以达到100%。本研究...
关键词：
大菱鲆 性别鉴定 活体压片 醋酸洋红
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
杨先乐 林茂 喻文娟 王翔凌 房文红
MTT检测的OD值与细胞量之间呈显著的线性正相关(R2>0.96),能较好地反映活细胞密度。MTT的作用浓度及反应时间对此OD值均有较大影响,根据实验结果在细胞的MTT检测中,采用0.5 mg/mL为MTT作用浓度,4 h为反应时间。细胞接种量对最终的细胞活力有一定影响,根据实验结果在鱼类细胞毒性实验中,选取每孔2.0×104为最初接种量(初始密度为105cell/mL),对照SMMC7721细胞则选择每孔0.5×104细胞接种量(初始密度为2.5×104cell/mL)。通过优化的MTT比色法检测抗生素和多环芳香烃等药物对细胞的毒性,药物的剂量-效应曲线以Logistic模型拟合,获得实验药...
关键词：
噻唑蓝 鱼类 细胞 毒性
[期刊] 山西财经大学学报
[作者]
陆岩
羰基合成法醋酸生产技术是国际上先进的醋酸生产方法,由于该装置具有较高的风险,发生火灾、爆炸、中毒等事故可能性非常大。因此,文章针对该醋酸生产装置,采用蒙德法对其进行定量评价,得到各单元的危险程度,从而提出有效的安全管理措施,为企业的安全管理提供科学依据,具有实用意义。
关键词：
醋酸 蒙德法 安全评价
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵娟 沈佳 李海梅 娄群峰 李季 陈劲枫
[目的]MTG(Mito Tracker Green)是一种线粒体特异绿色荧光探针,但是目前还没有研究将MTG应用于细胞的树脂半薄切片中线粒体的荧光染色。分子生物学研究证明黄瓜线粒体是父系遗传但是还没有在细胞学观察中得到进一步证实,因此我们选择MTG和DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)2种染料建立适用于黄瓜花粉细胞的树脂半薄切片荧光双染色技术。[方法]树脂半薄切片厚度为0.3μm,切片首先经20 nmol·L-1的MTG染色液处理30 min,然后用0.1μg·m L-1的DAPI溶液染色6 min,即可在荧光显微镜下清楚地显示出线粒体结构及DNA的存在情况。[结果]观察显示:黄瓜贴壁...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
秦磊 陆承平 陈怀青
将嗜水气单胞菌的胞外毒素(HEC) 和胞外蛋白酶(ECPase) 与迟缓爱德华氏菌脂多糖(LPS)、脱毒多糖(PS) 偶联, 制成3 种亚单位偶联疫苗 (HEC-PS、HEC-LPS、ECPase-PS), 分别免疫小鼠。另设这两种细菌的全菌灭活苗免疫及注射生理盐水对照组, 每组8 只。在第2 次免疫后第7 天用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT), 检测脾淋巴细胞转化率与腹腔巨噬细胞吞噬活性, 并检测各组小鼠的全菌凝集抗体。结果表明, 亚单位疫苗的这两项细胞免疫指标明显高于对照组,但略低于全菌灭活苗免疫组, 而细胞免疫指标与抗体水平无对应的平行关系。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
辛泽毓 周燮 张能刚
以茉莉酸－牛血清白蛋白复合物作为免疫原，获得了兔抗茉莉酸甲酯抗血清，并在此基础上建立了茉莉酸固相抗原型ＥＬＩＳＡ。此外，利用茉莉酸甲酯和辣根过氧化物酶标记的茉莉酸对鼠抗茉莉酸甲酯单克隆抗体的竞争结合，建立了茉莉酸固相抗体型ＥＬＩＳＡ。上述两种ＥＬＩＳＡ的检测灵敏度分别为０．４２ｐｍｏｌ和０．２０ｐｍｏｌ，检测范围分别为０．９８～１０００ｐｍｏｌ和０．６３～２０ｐｍｏｌ，批内变异系数分别为３．４４％和１．６２％，批间变异系数分别为２．４７％和２．０６％。样品的平均回收率分别为７３．３％和７６．９％。
[期刊] 华北农学报
[作者]
李晨 王思月 嵇少泽 李雪嵩 张喜庆 田佳琪 马红霞 高云航
为研究醋酸钙不动杆菌的致病机制及防控措施,对疑似患有醋酸钙不动杆菌的病死牛肺脏组织进行病原分离,得到了1株优势菌命名为9-1。对分离菌株进行形态学观察、生化试验、16S rDNA基因序列测定,动物致病性试验和药敏试验。结果显示,分离菌株为革兰阴性杆菌且对试验小鼠具有较强的致病性,经生化试验和16S r DNA基因序列测定分析确定为醋酸钙不动杆菌。药敏试验结果显示该分离菌株对氟苯尼考、头孢噻肟、头孢氨苄、阿奇霉素耐药,对其余8种测试药物敏感。经β-内酰胺类(TEM、DHA、OXA-23、OXA-58)耐药基因检测结果显示均为阴性。为醋酸钙不动杆菌引起的疾病选择合理的抗菌药物提供了一定科学依据,并为进一步研究其耐药机制奠定了基础。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
胡白石 卢玲 刘凤权 许志刚 陈建东 焦国尧
提取梨火疫病菌 (0 0 5 6菌株 )的脂多糖免疫家兔 ,获得抗血清 ,建立了检测梨火疫病菌的间接免疫荧光染色和协同凝集检测技术 ,对梨火疫病菌的不同菌株和人工接种发病样品实施了检测。结果表明 ,这 2种方法可以准确、灵敏地检测梨火疫病菌及样品 ,方法简单、快速、实用 ,可以在中国口岸推广使用 ,减少梨火疫病进入中国的风险。
[期刊] 林业科学
[作者]
白钢 王玉嬿 马洪周 李海燕 杨文博
以松材线虫的粉碎虫体免疫家兔制备抗血清 ,通过免疫印迹考察抗血清的特异性。利用固相松材线虫抗原和游离线虫抗原同线虫抗体相竞争 ,建立竞争型ELISA法用于疫木中松材线虫的分析。该方法可以直接检测出 10mg的木屑中 0 1μg微量的线虫蛋白 ,约 7条线虫的存在。利用该方法对 2 0个不同地区、树种及类型的松材样品进行检测 ,疫木中松材线虫的检出率为 10 0 % ,但拟松材线虫也呈现了一定的交叉反应。研究结果表明 ,以松材线虫抗原蛋白为指标的免疫学检测方法简便快速、灵敏度高 ,为松材线虫的快速检疫提供一种可能的途径
关键词：
松材线虫 线虫鉴定 免疫印迹 ELISA
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
胥婧 沈秀萍 邵秀玲 胡白石 许志刚
根据风信子黄腐病菌(Xanthom onas hyacinthi,XHA)的fimA基因,合成了1对特异性引物JAAN/JARA,目的片段为226 bp,用来检测样本中有无目标细菌。用XHA全菌体免疫家兔,获得抗血清,建立了检测风信子黄腐病菌的间接免疫荧光染色检测技术。用上述两种方法对风信子黄腐病菌和人工接种发病样品进行检测。结果表明,这两种方法可以准确、灵敏地检测风信子黄腐病菌及带菌样品,方法简单、快速、实用,可以在口岸检疫中推广使用,以减少风信子黄腐病菌进入中国的风险。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王瑞庆 马书尚 张继澍
【目的】建立一种可靠、易于推广的科学判断苹果成熟度的方法,用于指导苹果规范采收。【方法】以"嘎拉"、"秦冠"和"富士"苹果为试材,于其成熟期内每周采样1次,测定果实生理指标,并将果实横切后用碘液染色,选取有代表性的苹果染色切面照相。【结果】随着果实的成熟,其硬度下降,可溶性固形物含量(SSC)升高,可滴定酸含量(TA)呈下降趋势,着色率和淀粉指数(SI)升高,后期发生乙烯跃变。根据果实切面淀粉染色程度由深至浅分为8级,制作了3个苹果品种的淀粉染色图谱,依照该图谱,"嘎拉"、"秦冠"和"富士"苹果分别在淀粉指数为4.5,6.0和7.7时,达到园艺成熟度,此时为适宜的采收期。【结论】苹果果实的淀粉...
关键词：
苹果 淀粉染色 成熟度
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
韦铮 王逯屏
本文研究共聚乳液的聚合工艺条件，选择改性单体。实验结果用综合评分方法进行分析表明，醋酸乙烯酯与丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯三元共聚制得的乳液，对提高醋酸乙烯酯均聚乳液的耐水性胶接强度和其他性能的综合效果最好。醋酸乙烯酯与顺丁烯二酸酢或顺丁烯二酸的乳液共聚合反应很难正常进行，所得产物转化率低，无应用价值。
[期刊] 中国科学技术大学学报
[作者]
王雨薇 梁高林
设计并合成了一种新型自组装多肽纳米荧光探针.在合成方法上使用了新型的生物兼容性的CBT-Cys点击反应实现了RGD肽的环化.该探针可通过RGD序列靶向肿瘤细胞αvβ3整合素受体,促进细胞的摄取;同时可与细胞内弗林酶作用导致荧光的"关-开",达到对肿瘤细胞的靶向荧光成像功能.
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