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[期刊] 水产学报
[作者]
薛清刚 罗挽涛 宋庆云 王文兴 杨虹
阐述一种从对虾肝胰腺组织中纯化肝腺细小病毒的方法。将对虾肝胰腺组织样品研磨并进行适当脱脂处理后，进行一系列的浓缩和过３５％（ｗ／ｗ）蔗糖垫离心，然后通过一个不连续的酒石酸钾－甘油密度梯度离心纯化。结果证实，该方法对样品中的病毒颗粒的分离和纯化效果均较理想，可以满足有关研究工作的需要。经与ＣｓＣｌ密度梯度离心法比较，提示两者效果相似，但本方法更加经济实用
[期刊] 水产学报
[作者]
薛清刚 钱鸣亮 王文兴 王克行
用密度梯度离心纯化的对虾肝胰腺细小病毒（ＨＰＶ）颗粒免疫家兔制备特异性抗血清，并建立了一种反向间接血凝法以诊断ＨＰＶ感染。该方法的敏感性可达ｎｇ／ｍｌ病毒蛋白的检测限水平。通过对１０份已固定的患病对虾肝胰腺样品分别取一小部分进行检测，证实反向间接血凝法与组织病理检查的相符性良好，而前者具有方法简便、重复性好、试剂稳定和样品检测可在１．５—２小时内完成等特点，适合在现场推广使用。
关键词：
对虾,肝胰腺细小病毒,反向间接血凝法
[期刊] 水产学报
[作者]
傅蓉蓉 李钫 杨丰
建立了利用Percoll不连续密度梯度离心分离红螯光壳螯虾血细胞的方法,并对配制分离体系的缓冲液以及分离体系的密度组成进行了优化。结果显示,由20%、65%和100%的Percoll组成的分离体系分离效果最优。在转速为1 810 r/min的条件下离心20 min之后,可将红螯光壳螯虾血细胞分为SGC与GC 2个细胞层。经流式细胞术分析,发现细胞层纯度均在95%以上,细胞死亡比率低于1.5%,可用于后续的细胞功能分析。此方法简单有效,为后续研究螯虾的免疫防御机制及病害防治方法奠定了基础。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王勤涛 张庆利 杨昊霖 刘天齐 刘笋 杨冰 黄倢
根据对虾肝胰腺细小病毒(HPV)保守基因序列,设计特异性的锁式探针及其扩增引物,优化反应条件,建立了肝胰腺细小病毒超分支滚环扩增检测方法。实验中采用一步法连接,探针在Taq DNA连接酶作用下,58℃连接40 min、62℃扩增30 min便可以扩增出明显条带。反应特异性验证实验表明,该体系能够特异性地检测出HPV,而不与供试的其他对虾病原发生交叉反应;灵敏度分析结果显示该方法的检测极限为105 copies/μl,与PCR检测方法相比,一步法连接的滚环扩增的灵敏度低两个数量级。该方法反应过程中温度变化次数少,基本都在等温条件下进行,不需要PCR仪,可发展成为在简便实验条件下使用的简易检测方法...
关键词：
对虾 肝胰腺细小病毒 检测 滚环扩增
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
於丙军 龚红梅 李名旺 刘友良
分别以不连续蔗糖［２２０／３６０／４５０（ｇ／Ｌ）］和葡聚糖（ｄｅｘｔｒａｎＴ７０）［６０／１２０（ｇ／Ｌ）］两种介质密度梯度，制备并比较了大麦幼根细胞质膜和液泡膜微囊。结果表明，两种介质梯度制备的质膜微囊纯度较高，无线粒体膜和液泡膜污染；液泡膜微囊虽基本上去除了线粒体膜，但均混有少量质膜碎片。用蔗糖梯度制备的质膜微囊较葡聚糖梯度制备的质膜微囊有较高的翻转比率；对液泡膜微囊，前者的原位比例也较后者略高。另外，液泡膜Ｈ＋－ＰＰａｓｅ活性测定反应体系中应加入钼酸钠抑制剂，反应终止液和显色液可与Ｈ＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ相同。因此，在制备质膜和液泡膜进行Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ或Ｈ＋－ＰＰａｓｅ生化特性的研究时...
关键词：
葡聚糖 蔗糖 密度梯度离心 膜微囊
[期刊] 水产学报
[作者]
陆宏达
通过对1993年患暴发性流行病的中国对虾和1994年中国对虾越冬亲虾、幼虾、仔虾、养成期虾，以及暴发病充分发展期虾的肝胰腺、鳃、后胃、前中肠、心脏、卵巢、淋巴样组织和肌肉等组织器官的光、电镜观察，发现虾组织中仅有一种形成核内包涵体的肝胰腺细小病毒。该病毒引起细胞肿大，细胞变性，尤其在疾病充分发展期的病虾肝胰腺、鳃组织，以及后胃和前中肠粘膜层细胞坏死解体，病虾失去消化吸收功能，呼吸器官严重受损，影响气体交换，造成窒息而死。肝胰腺细小病毒为本研究中养殖的中国对虾暴发性流行病的病原。为探讨该病的发生和发展规律，通过对各阶段中国对虾体内病毒包涵体出现率和出现强度进行统计观察得知：1994年的越冬亲虾中...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张峥 黄倢 高强 成君军 王明森
中国明对虾肝胰腺细小病毒是一种单链、线性DNA病毒。本研究利用DNA末端加尾和嵌套PCR首次完成了对虾肝胰腺细小病毒(hepatopancreatic parvovirus,HPV)中国分离株(HPV-Pc)全基因组序列的测定,研究结果表明,HPV-Pc株(GenBank登录号GU371276)的全基因组由6 085个核苷酸组成,包含3个开放阅读框(ORF)(分别代表ns1、ns2和cp基因)和2个非编码区。ORF1、ORF2和ORF3分别编码由427、578和821个氨基酸组成的蛋白,分子量分别为50.4 kD、68.2 kD和92 kD。分析HPV-Pc基因组结构,发现该基因组没有末端反向...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘天齐 杨冰 刘笋 万晓媛 王秀华 黄倢
采用水产行业标准《对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程第1部分:PCR检测法》(SC/T7203.1-2007)的方法,对2011-2013年期间我国沿海7个省市主要养殖对虾品种不同生长阶段的对虾样品进行该病毒携带情况的筛查。该方法的检测灵敏度为0.07 fg,相当于大约20个病毒拷贝。结果显示,639份样品的HPV阳性检出率为18.47%。其中,在中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)和日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)中均有阳性检出,且仔虾、幼虾、成虾各个阶段均可检出HPV,表明HPV已在我国养殖...
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
徐信武 崔悦 汤正捷
以12mm厚意杨Populus deltoids板材为试材,在1MPa,100℃和2～5min条件下,实施横向热压密实试验,采用剖面密度梯度(VDP)测试仪获取了密实后速生杨木锯材的断面密度分布,并利用建立的"密度-压缩率"转换公式,转换为压缩率数据,从而实现了木材断面压缩率的准连续定量和定位。结果表明:①VDP技术可以准确定量密实后木材各厚度微层的压缩率;②意杨木材断面压缩率分布与剖面密度梯度类似,呈现表高芯低的宽"V"形;在试验工艺条件下,表层约50%厚度受到不同程度的压缩,最大压缩率达到34%～37%,而芯层未受到显著压缩。
[期刊] 调研世界
[作者]
汤俊晓
本文以我国第五次和第六次人口普查数据为依据,运用单核心假设下Clark模型,对4大直辖市的人口密度梯度进行估计。结果表明:北京呈现人口郊区化趋势;上海拟合效果较差,脱离单核心结构;天津不符合Clark模型;重庆呈现人口城镇化趋势。并在此基础上,对各直辖市的交通规划提出政策建议。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李惠 宋丽芳 王亚君 兰叶青
研究了酒石酸协同下TiO2光催化降解水溶性染料孔雀石绿的影响因素、降解反应动力学以及作用机制。结果表明:酒石酸对TiO2降解孔雀石绿有明显的协同作用,相同试验条件下,3种不同光源对孔雀石绿的降解效果大小依次为:紫外光、模拟日光、可见光。孔雀石绿的光催化降解反应呈一级反应动力学特征。用苯作为羟基自由基(.OH)捕集剂,通过高效液相色谱仪(HPLC)检测苯酚,间接地测定了反应中间产物.OH。
关键词：
孔雀石绿 二氧化钛 光催化降解 酒石酸
[期刊] 水产学报
[作者]
王吉桥 靳翠丽 张欣 刘革利
在 10个水族箱 ( 5 3cm× 2 4cm× 2 3cm)中各放养中国对虾 (Penaeuschinensis) 4尾 ,混养孔石莼 (Ulvapertusavar) 0、4g、6g、8g和 10g ,采用投饲精养。结果表明 ,孔石莼能有效吸收N、P营养盐 ,提高对虾对饲料中氮的利用率 ( 42 .7%～ 2 12 .9% ) ,水质状况也优于单养对虾。混养的综合养殖指数高于单养对虾。对虾密度为32 0～ 480g·m-3 ,石莼密度为 40 0～ 6 0 0g·m-3 时 ,可以进行免充气养殖
关键词：
石莼 对虾 混养 水质
[期刊] 林业科学
[作者]
李昌晓 魏虹 吕茜 张晔
模拟三峡库区消落带土壤水分变化特征,设置常规生长水分条件(C组)、轻度干旱水分胁迫(MD组)、土壤潮湿(WS组)以及水淹(BS组)4个不同处理组,研究枫杨当年实生幼苗对多种水分胁迫的生理生化响应。结果表明:不同水分处理、时间以及水分与时间的交互作用对枫杨幼苗的生长、生物量、根系的草酸与酒石酸含量均产生极显著的影响(P<0.001或0.01)。与C相比,MD,WS和BS均显著降低枫杨幼苗的高生长与生物量积累,却能显著增加枫杨幼苗主根、侧根以及总根的草酸含量。BS也能显著增加枫杨幼苗主根、侧根以及总根的酒石酸含量。WS仅显著增加侧根酒石酸的含量,与MD显著降低侧根的酒石酸含量形成鲜明对照。随着处理...
[期刊] 水产学报
[作者]
王静 郭冉 苏利 夏辉 崔敏
实验设置黄曲霉毒素B1(AFB1)为0、400、800、1200,1600、2000μg/kg6组饲料,饲养初始体质量为(0.3±0.02)g的凡纳滨对虾,经过8周的生长实验观察饲料中AFB1对凡纳滨对虾生长、体营养成分组成、肝胰腺显微结构以及血淋巴和肝胰腺生化指标的影响。实验结果表明:随着饲料中AFB1的增加,各组全虾粗蛋白量无显著性差异,1600μg/kg组和2000μg/kg组的全虾粗脂肪量高于其他组。AFB1为1200μg/kg时对虾增重率最低(304.67%),2000μg/kg时增重率显著高于其他组,但成活率最低(58.33%)。随着饲料中AFB1的升高酶活性普遍呈下降趋势。200...
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