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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
范绍斌 苏济钰 樊改丽 阮志平 张华峰 胡艳萍 贾悦 梁欣妤 王宗华 胡红莉
近年来，福建省厦门市园林植物园内的酒瓶椰子频发叶枯病，影响了植株的正常生长，降低了酒瓶椰子的观赏价值。从厦门市园林植物园收集了12份感病的酒瓶椰子叶片样品，通过分离和纯化，得到5个类拟盘多毛孢属真菌菌株。结合其形态特征和基于3个基因（ITS、TUB2和TEF1）的系统发育分析结果，这5个菌株被鉴定为Neopestalotiopsis cubana、Pestalotiopsis diploclisiae、P. humicola、P. neolitseae和Pseudopestalotiopsis theae。柯赫氏法则验证结果显示，N. cubana、P. diploclisiae、P. humicola和Ps. theae可以引起酒瓶椰子的叶片发病，而P. neolitseae不能侵染酒瓶椰子的叶片，表明N. cubana、P. diploclisiae、P. humicola和Ps. theae是引起酒瓶椰子叶枯病的病原菌。这是新拟盘多毛孢属真菌和假拟盘多毛孢属真菌在酒瓶椰子上的首次报道。其中，N. cubana为我国首次发现。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
关天舒 朱茂山 李柏宏 张子君
分离纯化了五味子叶枯病的病原菌细极链格孢菌,并对其生物学特性进行了研究。结果表明:病菌在PDA培养基上菌丝生长最快,在PDA,PSA,JB培养液中最有利于孢子萌发。温度对菌丝生长和孢子萌发影响显著,30℃菌丝生长最快,25℃孢子萌发率最高。病菌在pH值2～12之间均能生长,pH值8最适合菌丝生长,pH值6～7孢子萌发率最高。黑暗条件更有利于菌丝生长和孢子萌发。麦芽糖和果糖是菌丝生长和孢子萌发最佳碳源,蛋白胨是菌丝生长和孢子萌发最佳氮源。不同微量元素对菌丝生长和孢子萌发产生作用不同,Ca2+、Zn2+有利于病菌菌丝生长,Na+促进病菌孢子萌发。研究结果为进一步防治五味子叶枯病奠定了基础。
关键词：
五味子 叶枯病 病原菌 生物学特性
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
严雪瑞 胡梦琼 王旭 赵志慧 代汉萍 傅俊范 李天来
在江西蓝莓产区的病害调查过程中，发现一种由镰孢菌侵染的叶部新病害，主要引起叶片枯萎，进行病原菌的分类鉴定将为病原学及该病害综合防控提供前期基础。病原菌的分离采用二步分离法，组织分离之后采取单孢分离。致病菌的确定依据柯赫氏法则。病原菌的鉴定方法依靠表型特征鉴定，同时辅助ＩＴＳ和ＴＥＦ－１α序列进行分子鉴定。引致江西地区蓝莓叶枯病的致病菌为ＪＸ０３ＡＡ，经表型鉴定与分子鉴定表明该病菌为亚细亚镰孢菌（ＦｕＳＡｒＩｕｍ ＡＳＩＡＴＩｃｕｍ）。江西地区发生的蓝莓叶枯病由亚细亚镰孢菌侵染所致，蓝莓是亚细亚镰孢菌的新记录寄主。
关键词：
蓝莓 叶枯病 亚细亚镰孢菌
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王小秋 葛礼姣 仇亮 翟彩娇 王广达 宋益民 程玉静
从发病严重田块采集蘘荷叶枯病病叶，采用组织分离法进行病原菌分离、纯化，获得代表性致病菌株RH–1，对RH–1进行鉴定，并测定其生物学特性。结合病原菌形态学特征和分子生物学鉴定，构建真菌内转录间隔区(ITS)、β–微管蛋白基因(β–Tubulin)和TEF–1α系统发育树，鉴定该菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。分别在温度(5、10、15、20、25、30、35℃)、pH(4、5、6、7、8、9、10)和光照时间(连续光照、连续黑暗、12h光照/12 h黑暗、24 h光照/24 h黑暗)条件下用PDA培养基培养RH–1，结果在30℃、pH 9和连续光照下菌丝生长较快。分别用葡萄糖、α–乳糖和麦芽糖以及酵母膏、牛肉膏、(NH4)_2SO_4、NH_4Cl、蛋白胨和NH_2CH_2COOH等量替代Czapek基础培养基中的碳源和氮源，发现菌丝生长的较适碳源为葡萄糖或麦芽糖，最适氮源为牛肉膏或蛋白胨。将RH–1分别接种于红蘘荷和绿蘘荷，发现绿蘘荷的抗病性强于红蘘荷的。
关键词：
蘘荷 病原菌 尖孢镰刀菌 生物学特性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
许恬 黄大明 李蓉 黄怡婷 李杏蔚 张磊 覃茜
【目的】明确造成南宁植物园青秀山苏铁园内苏铁叶片干枯的病因，研究防治手段，为有效保护苏铁种质资源提供理论基础。【方法】采集不同发病苏铁植株上的枯萎叶片样本113个，使用平板培养及稀释分离法将病原真菌进行分离纯化，通过柯赫氏法则测定分离菌株致病力，依据形态学及分子生物学鉴定等手段对所获得分离株进行物种鉴定，选取代森锰锌、啶氧菌酯、苯甲·丙环唑、苯甲·嘧菌酯、氟菌·肟菌酯、氯氟醚·吡唑酯和百菌清等7种杀菌剂对病原菌进行室内药效试验。【结果】通过对枯萎组织的微生物分离纯化，共获得72株分离菌株，经ITS序列分析发现分别来自炭疽菌属、镰刀菌属、链格孢菌属、拟盘多毛孢属、叶点霉属、黑孢霉属、枝孢菌属、球毛壳菌属、炭团菌属、炭角菌属、葡萄座腔菌属、曲霉属及小新壳梭孢属等13个不同属。对其中的真菌进行致病力测定发现，镰刀菌属的GX2210菌株经针刺接种到苏铁羽片会产生枯萎病斑；进一步采用CaM、bTUB、RPB2和TEF1a基因序列分析，确定该菌株为变红镰孢菌（Fusarium incarnatum）；药效试验显示，代森锰锌是抑制该菌株的最有效药物，抑制中量（ID_(50)）为0.3577 mg/L。【结论】造成南宁植物园苏铁叶枯病的病原菌为变红镰孢菌。代森锰锌对变红镰孢菌具有较好的抑制作用，可考虑用于苏铁叶枯病防治。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王小秋 葛礼姣 仇亮 翟彩娇 王广达 宋益民 程玉静
从发病严重田块采集蘘荷叶枯病病叶，采用组织分离法进行病原菌分离、纯化，获得代表性致病菌株RH–1，对RH–1进行鉴定，并测定其生物学特性。结合病原菌形态学特征和分子生物学鉴定，构建真菌内转录间隔区(ITS)、β–微管蛋白基因(β–Tubulin)和TEF–1α系统发育树，鉴定该菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。分别在温度(5、10、15、20、25、30、35℃)、pH(4、5、6、7、8、9、10)和光照时间(连续光照、连续黑暗、12h光照/12 h黑暗、24 h光照/24 h黑暗)条件下用PDA培养基培养RH–1，结果在30℃、pH 9和连续光照下菌丝生长较快。分别用葡萄糖、α–乳糖和麦芽糖以及酵母膏、牛肉膏、(NH4)_2SO_4、NH_4Cl、蛋白胨和NH_2CH_2COOH等量替代Czapek基础培养基中的碳源和氮源，发现菌丝生长的较适碳源为葡萄糖或麦芽糖，最适氮源为牛肉膏或蛋白胨。将RH–1分别接种于红蘘荷和绿蘘荷，发现绿蘘荷的抗病性强于红蘘荷的。
关键词：
蘘荷 病原菌 尖孢镰刀菌 生物学特性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
廖旺姣 邹东霞 吴耀军 邓艳 黄乃秀
２０１３年广西百色市田林县利周乡油茶苗圃岑软２３号油茶苗出现严重的叶枯病。对叶枯病的病原菌采用组织分离培养、致病性测定、形态特征观察及核糖体内转录间隔区（ｒ ＤＮＡ－ＩＴＳ）基因序列测定。结果表明：引起岑软２３号油茶苗叶枯病的病原菌为茶拟盘多毛孢ＰｅＳＴＡｌｏＴＩｏＰＳＩＳ ＴｈｅＡｅ（ＳＡｗＡＤＡ）ＳＴｅｙＡｅｒＴ。这是广西对油茶叶枯病的首次报道。
关键词：
油茶 叶枯病,病原菌鉴定,茶拟盘多毛孢
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李雪玲 谢美华 杨海艳 陈华红 闫俊梅 王振吉 范树国
从高山榕发生叶枯病的病叶上分离到一株真菌，菌株编号记为ＣＸ００２１Ｄ４。利用传统的形态学观察与现代分子生物学技术相结合的方法，并依据其形态特点与培养性状进行了初步研究。结果表明，病原菌为丝孢纲（ＨｙｐＨｏｍｙＣｅｔｅｓ）瘤座孢目（ｔｕｂｅｒＣｕｌａｒｉａｌｅｓ）瘤座孢科（ｔｕｂｅｒＣｕｌａｒｉａＣｅａｅ）镰刀菌属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｌｉｎｋ）层生镰孢菌。该菌对营养要求不高，碳源和氮源均能利用，最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和牛肉膏。该菌对温度和ｐ Ｈ值的适应范围均较广，２５～２８℃菌丝生长速度最快，２８～３０℃之间孢子萌发率最高；适宜孢子萌发的ｐ Ｈ值为７．０～８．０，弱碱性更利于孢子萌发；有无光．．．
关键词：
高山榕 叶枯病 病原鉴定 生物学特性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
黎青 魏真真 王毛 雷应华 Gongjun Shi 郭静微
【目的】对四川省主要小麦产区的小麦黄斑叶枯病致病菌进行分离与鉴定，分析其致病基因组成情况，探究其致病菌的致病力，明确其生理小种类型，为小麦黄斑叶枯病的防治提供理论基础。【方法】于2021—2022年在四川主要小麦产区采集小麦叶枯病样本，经病原菌分离，通过形态学观察分析，内部转录间隔区（ITS，internal transcribed spacer）序列分析，致病基因（Ptr ToxA 、ToxB 和 ToxC）扩增和小麦黄斑叶枯病鉴定系致病性测定相结合的方法对病原菌进行鉴定。【结果】在小麦叶枯病样本中共分离并鉴定出3个小麦黄斑叶枯病病原菌菌株，均为Pyrenophora tritici-repentis，其在所有分离得到的小麦叶枯病病原菌中所占比例较小。对3个小麦黄斑叶枯病病原菌菌落和分生孢子进行形态学观察，未发现显著差异，符合病原菌形态学鉴定标准。进一步对3个小麦黄斑叶枯病病原菌进行ITS序列分析，结果显示3个菌株与参考基因组（ID：AM887509）的ITS序列相似性达到100%。对致病基因Ptr ToxA、ToxB、ToxC进行扩增，3个菌株在ToxA和ToxB基因的位点上均未扩增出任何片段，但在ToxC基因位点上均成功扩增出约500 bp的条带。病原菌致病性鉴定结果显示，本研究分离得到的菌株在Prosper和6B365品种上表现出较强的致病性，引起大面积叶片黄化，而在Glenlea和6B662品种上则未出现明显的叶片坏死或黄化症状。在四川省主要小麦产区收集到的小麦黄斑叶枯病致病菌为Pyrenophora tritici-repentis生理小种3。【结论】本研究系国内首次针对Pyrenophora tritici-repentis不同生理小种进行鉴定报道，将为我国在小麦黄斑叶枯病的防治上提供重要参考。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谢玲 唐晨光 岑贞陆 黄思良 秦碧霞 覃丽萍 胡春锦
在广西南宁桂花树上严重发生一种叶枯病,从病叶上分离到桂花叶枯病菌(编号CHS),在致病性测定的基础上,根据病原菌株CHS的形态及ITS序列,将其鉴定为Alternaria alternata(Fr.)Keissler。对该菌的生物学特性研究结果表明:菌丝生长、孢子形成和孢子萌发的最适温度均为28℃;生长发育最适pH值为6~7;不同光环境对该菌菌丝生长发育影响不大,黑光环境最利于孢子萌发;在供试的培养基中PDA最适合菌丝生长和产孢;苯醚甲环唑、咪鲜胺和丙环唑对该菌的抑制作用最强。由A.alternata引起的桂花叶枯病在广西的发生属首次报道。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
任晓凤 刘苗 周倩 杨华
2021年春季，从湖南省怀化市中方县正清制药青风藤基地和湖南农业大学试验基地分别采集青风藤叶枯病病叶，利用组织分离法获得病原菌，并进行柯赫氏法则验证。借助形态学鉴定和分子系统学分析，明确青风藤叶枯病病原为交链隔孢(Alternaria alternata)。利用菌丝生长速率法对5种药剂(95%苯醚甲环唑、98%咪鲜胺、96%己唑醇、96.5%丙硫菌唑、98%嘧菌酯)进行筛选，结果显示95%苯醚甲环唑抑菌效果最好，EC_(50)为0.043 6 mg/L;98%嘧菌酯抑菌效果最差，EC_(50)值为8.447 3 mg/L。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
任晓凤 刘苗 周倩 杨华
2021年春季，从湖南省怀化市中方县正清制药青风藤基地和湖南农业大学试验基地分别采集青风藤叶枯病病叶，利用组织分离法获得病原菌，并进行柯赫氏法则验证。借助形态学鉴定和分子系统学分析，明确青风藤叶枯病病原为交链隔孢(Alternaria alternata)。利用菌丝生长速率法对5种药剂(95%苯醚甲环唑、98%咪鲜胺、96%己唑醇、96.5%丙硫菌唑、98%嘧菌酯)进行筛选，结果显示95%苯醚甲环唑抑菌效果最好，EC_(50)为0.043 6 mg/L;98%嘧菌酯抑菌效果最差，EC_(50)值为8.447 3 mg/L。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王小慧 朱震 马雪莲 卢颖林 李奇伟 冉炜 沈其荣
采用室内分离和盆栽致病性试验相结合的方法,分别从田间大棚西瓜枯萎病病株的根部、茎部和叶片分离纯化获得34株疑似病原菌的菌株,并从中挑选出6株形态差异明显的菌株用于盆栽回接试验。结果表明:菌株LD和LB回接7 d后植株开始出现轻微萎焉症状,到第14天时发病率分别达到100%和72%,病情指数分别为2.00和1.14;菌株LA、LC和XB在回接30 d后西瓜植株发病率和病情指数均为14%和0.29;而菌株XA在回接30 d后植株未出现发病症状。对西瓜植株的生物量统计表明,在接种病原菌30 d后,接种菌株XA和XB的处理植株的株高和地上部干质量与对照差异不显著。接种菌株LA和LC的处理西瓜植株的株高...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
黄艳花 崔忠吉 欧善生 黄远光 蒙成 李杨秀
【目的】鉴定西番莲顶枯病病原菌种类，明确其分类地位，为西番莲顶枯病的科学防控及西番莲产业的持续快速发展提供理论依据。【方法】采用植物组织分离法对首次在广西南宁市发现为害西番莲的新病害——西番莲顶枯病进行病原菌分离，测定其致病性，观察其形态特征，分析其核糖体转录间隔区（ITS）、钙调蛋白（CAL）和交配型基因（ApMat）的基因序列，鉴定引起西番莲顶枯病的病原菌。【结果】从具有典型西番莲顶枯病症状植株中分离到同一形态真菌，命名为TK2A2CLA6菌株，其孢子与自然发病西番莲枝条上切片观察到的病原菌孢子形态一致，进行顶芽接种致病性测定均能发病，且发病症状与自然发病症状一致，再分离得到的病原菌与原接种病原菌相同。TK2A2CLA6菌株菌落圆形或近圆形，正面产生发达且较致密的灰白色气生菌丝；菌落背面初期为浅黄色，后期中央浅墨色、周围浅黄色，在PDA培养基上培养7 d后偶有橙色孢子堆产生；菌丝平均生长速率为18.89 mm/d；分生孢子无色，近圆柱状钝圆，另一端钝圆或略细，一般具1～2个油球，大小为(13.03～17.75)μm×(3.75～5.25)μm。对TK2A2CLA6菌株的ITS V1～V4区、CAL和ApMat基因序列进行PCR扩增，将基因序列在NCBI中进行BLAST比对分析，发现其与暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）多个序列的同源性达100%。以ITS、CAL和ApMat基因序列进行多基因系统发育进化树分析，TK2A2CLA6菌株与C. siamense LF177和C. siamense JH-Coll001以100%的自展支持率聚为独立的1支，确定引起西番莲顶枯病的致病菌为暹罗炭疽菌。【结论】使用形态学方法结合多基因系统进化树分析，明确危害广西南宁西番莲顶枯病的病原菌为暹罗炭疽菌。
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