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[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
肖军 张立军 任志莹 陈珣 肇莹
利用花粉管通道技术,以生长在盐碱地的碱蓬总DNA为供体,以1个不耐盐番茄为受体,进行外源DNA直接导入,对转基因番茄D2代分别浇灌1/2和1/4浓度海水进行筛选,获得了抗盐植株。随机抽取20粒抗盐番茄的种子,以碱蓬基因组为探针,通过基因组荧光原位杂交技术进行鉴定,有13株番茄有杂交位点存在,初步证实碱蓬基因存在并整合入抗盐番茄的基因组中。
关键词：
番茄 花粉管通道 原位杂交 碱蓬
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵世锋 刘根齐 田长叶 刘春光 陈淑萍 侯宁 黄文胜 赵世民
采用花粉管途径将不同倍性燕麦以及花生、大豆、小麦等不同作物外源DIA导入裸燕麦早熟品种品二号、中晚熟品种冀张莜四号和晚熟品种冀张莜五号,获得了较为广泛的变异,经过逐代选择鉴定,育成了一批裸燕麦新种质。本研究以GUS报告基因为外源目的基因用同样方法导入燕麦,从其导入一代(GT)中检测出了表达GUS活性的阳性植株。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王永芳 张军 崔润丽 李伟 智慧 李海权 刁现民
为提高小麦的抗旱能力,采用花粉管通道法将本实验室克隆的谷子抗逆相关基因DNAj转入小麦中。对授粉方式、柱头处理方式、质粒DNA浓度及DNA稀释试剂等因素对结实率的影响进行了对比,结果只有授粉方式对结实率的影响有显著差异,其他条件下结实率均未显示显著差异。对转化获得的703株T0小麦植株提取DNA进行分子检测,有1株小麦稳定扩增到了预期的1 260 bp的目的基因片段。虽然转化效率偏低(1.42‰),但说明利用花粉管通道法将谷子的抗逆相关基因DNAj导入小麦是可行的,为创造抗逆性改良的小麦新材料奠定了基础。
关键词：
小麦 DNAj基因 花粉管通道法 转化
[期刊] 华北农学报
[作者]
魏爱民 张文珠 杜胜利 韩毅科 张桂华 刘楠
研究了不同浓度卡那霉素(Km)对未转化黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响,建立了转基因黄瓜卡那霉素抗性筛选体系。种子首先播在含Km 200 mg/L的1/2MS培养基中,能有效地抑制黄瓜幼苗生长,10 d后剪掉根系扦插移栽于蛭石中,能促使非转基因植株衰弱或死亡,有效地加速筛选。应用该筛选体系对花粉管通道法获得的抗虫转基因黄瓜T0种子进行初步筛选,获得Km抗性植株,抗性植株筛选率为1.6%,其中8.9%经PCR分子检测为阳性植株,初步证实EQKAM抗虫基因已整合到黄瓜基因组中。
关键词：
黄瓜 花粉管通道法 卡那霉素
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王全华 王秀峰 林忠平
【目的】研究转GO基因番茄的抗病机制。【方法】通过测定转GO基因番茄和对照未转基因番茄接种叶霉菌Fulviafulva后,体内超氧物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性变化。【结果】接种后转基因番茄株系的SOD、POD、CAT活性均比对照明显增加,且转基因番茄的活性高峰比对照早。转基因番茄在接种后PAL和PPO活性都出现2个活性高峰,且第2个峰值比第1个高,而对照只有1个活性高峰,其总体水平明显低于转基因番茄。用番茄叶霉病(Fulviafulva)病原菌1.2.3.4生理小种侵染T1代转基因植株。【结论】结果显示转基...
关键词：
番茄 转基因 叶霉病 抗性机制
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
毛秀杰 魏毓棠 金燕 张文新
对4个耐弱光性不同的番茄自交系进行开花期遮光处理,研究花粉活力变化。试验结果表明在光照强度为正常光照15%的条件下,不同自交系番茄花粉萌发和染色结果有显著差异,花粉萌发率和深色花粉率较高的自交系耐弱光较强,反之较弱。因此,花粉萌发率和染色深浅度可作为番茄自交系耐弱光鉴定的一项重要指标。
关键词：
番茄 弱光 花粉活力 自交系
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈宇杰 黄凤兰 狄建军 苏雅拉图 王云
为验证花粉管通道法进行蓖麻转基因研究的可行性,优化花粉管通道法导入方式及导入时间,为花粉管通道法转基因技术在蓖麻分子育种的应用提供参考依据。采用荧光显微观察对蓖麻品种通蓖5号人工授粉后花粉萌发及花粉管生长情况进行了研究,结果表明,花粉管通道法转化蓖麻的最佳时间为授粉后6～24 h。利用花粉管通道技术,将含有GUS基因的植物双元表达载体pPZP221SGN导入蓖麻品种通蓖5号。对85株T0植株进行PCR检测,得到10株阳性转化植株,阳性率约为11.8%。
[期刊] 水产学报
[作者]
章怀云 张学文 何铁林 陈立祥 陈韬 萧调义 李晋衡
精子载体法将外源ＤＮＡ导入草鱼受精卵获得性状转移ＧＥＮＥＴＩＣＴＲＡＩＴＳＴＲＡＮＳＦＥＲＥＮＣＥＡＦＴＥＲＥＸＯＧＥＮＯＵＳＤＮＡＷＡＳＩＮＴＲＯＤＵＣＥＤＩＮＴＯＧＲＡＳＳＣＡＲＰＤＵＲＩＮＧＦＥＲＴＩＬＩＺＡＴＩＯＮＷＩＴＨＳＰＥＲＭＡＳＴＨＥ...
关键词：
总DNA,精子载体,遗传转化,草鱼
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
欧阳波 李汉霞 张俊 叶志彪
通过根癌农杆菌介导转化番茄 (LycopersiconesculentumMill.)下胚轴 ,将外源双价基因导入番茄 ,获得了一批卡那霉素抗性苗 ,经PCR检测证明外源基因已经整合到番茄基因组中。研究表明番茄下胚轴是良好的遗传转化受体 ,具有操作简便 ,节省番茄材料和再生速度快的特点。烟草细胞看护培养能够提高外植体的转化效率和减少农杆菌对外植体的污染
关键词：
番茄 下胚轴 转化再生
[期刊] 华北农学报
[作者]
石薇 黄丛林 张秀海 吴忠义 杨德光
通过花粉管通道法将ZmPti1,ZmPti1-1,ZmCIPK2三种蛋白激酶基因植物表达载体分别导入玉米自交系吉444,经草丁膦筛选后得40株抗性植株,通过PCR检测其中28株为PCR阳性植株,平均转化率为1.33%,最后收获11株转基因植株。干旱条件下通过对转基因T1植株的单株籽粒产量、千粒重两个指标进行差异显著性和耐旱系数的分析,结果表明,转基因植株与非转基因植株对干旱的敏感性不同,初步认为转基因植株具有抗旱性,表明蛋白激酶能够提高玉米的耐旱性。
[期刊] 华北农学报
[作者]
周春江 葛荣朝 赵宝存 黄占景 沈银柱 何聪芬
兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为提高小麦的抗病虫能力,培育优质高抗的小麦品种,采用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入优质小麦品种G8901。对得到的193株T0植株进行抗除草剂筛选,获得4株抗性植株。通过PCR及PCR-Southern杂交,证实了NP-1基因已经整合到转基因植株的基因组中,并稳定遗传到T1。田间抗病虫鉴定结果表明,这些植株对于白粉病、叶锈和条锈病有较强的免疫力和抗性,但对于蚜虫的抗性没有明显提高。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
余朝阁 李天来 孟庆娟 李晓丽 杜妍妍 魏爽
为探明外源化学物质对灰霉菌(Botrytis cinerea)生长和番茄抗灰霉性的影响,将其加入培养基中或喷施到番茄植株上,调查菌落直径和番茄发病程度,比较各种化学物质对灰霉菌生长和番茄抗病性的影响。结果表明,化学物质诱导番茄抗病性与其抑菌活性无关。20～50mmol.L-1的CaCl2,0.5g·L-1的SA和0.5～1.0g·L-1的β-氨基丁酸诱导番茄抗病性显著增强,防病效果达60%;处理后3～5d番茄抗病性最强,其中水杨酸、龙胆酸和茉莉酸甲酯处理后18d,β-氨基丁酸处理后25d,还出现第2个抗病高峰;相关性分析表明,抗病化学诱导物处理改变番茄抗病性与苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性具一定...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
申琳 生吉萍 罗云波
本文结合反义ACC基因向番茄中的导入，就番茄外源基因转化系统建立中的几个问题做了研究。结果表明，转基因番茄的组织培养比普通番茄更复杂和困难，需要对其培养基的激素配比做系统研究，以选择更适合的培养基；抗生素的使用要掌握好剂量，在番茄的子叶上以50mg／L为宜；叶盘法转化番茄子叶时采用的菌液浓度及处理时间对转化也有很大的影响，以农杆菌过夜培养液用MS液体培养基稀释10倍、浸泡时间为5min为宜；转基因植株的鉴定可以从分子杂交及性状检测多方面进行，以保证鉴定结果的准确性。
关键词：
番茄 外源基因 转化 激素 抗生素
[期刊] 华北农学报
[作者]
岳雷 李中勇 尹宝颖 张媛 徐继忠
为探讨外源多胺调控鸭梨自交不亲和的生理生化机制，分别以自花授粉和外源亚精胺处理后１～３ ｄ的花柱为试材，测定了不同处理不同时期花粉管生长发育动态，利用双向电泳技术和质谱分析技术分析了外源亚精胺处理前后不同时期鸭梨花柱蛋白的差异表达。结果显示：与对照相比，不同浓度的Ｓｐｄ处理均能极显著促进花粉管生长，０．２５ ｍｍｏｌ／ｌ Ｓｐｄ处理７２ ｈ后可使大量花粉管到达花柱基部；在自交花柱电泳图谱中发现了３种特异蛋白质，Ａ蛋白质ｍｒ Ａ＝２８．０ ｋ ｄＡ，ｐ Ｉ＝５．７；Ｂ蛋白质ｍｒ Ｂ＝２８．５ ｋ ｄＡ，ｐ Ｉ＝５．７；Ｃ蛋白质ｍｒ Ｃ＝２２．０ ｋ ｄＡ，ｐ Ｉ＝５．３，这３种特异蛋白质可能与自．．．
关键词：
亚精胺 鸭梨 花粉管 花柱蛋白
[期刊] 西南农业学报
[作者]
赵立华 杨婷婷 邱润霜 何思洁 余萍 郑雪 张丽珍 张仲凯
【目的】番茄斑萎病毒(TSWV)在全球范围内广泛发生,危害多种作物引起严重的经济损失,筛选应用具有高效抑制活性的天然产物是防控TSWV引起的病害有效途径之一。前期研究发现三列叶蟛蜞菊(Wedelia trilobata)中提取的贝壳杉烯酸(AHK)具有抑制TSWV侵染的活性,本研究探明其具体的抑制机制。【方法】通过测定接种TSWV前、后用AHK处理的烟草植株相关防御酶活性以及RT-qPCR检测抗性相关主要代谢通路关键转录因子基因表达量,解析AHK防御TSWV侵染的机制。【结果】AHK在病毒接种前后处理中能诱导超氧化物歧化酶(SOD)活性升高而抑制TSWV的侵染;同时AHK能诱导茉莉酸(JA)通路重要转录因子MYC2、NAC表达量升高,增强了系统获得抗性。【结论】AHK主要通过诱导SOD酶活升高以及诱导JA通路增强寄主系统抗性从而抑制TSWV的侵染,具有作为植物源农药研发的潜力,为TSWV引起的病毒病绿色防控积累基础。
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