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[期刊] 中国农业科学
[作者]
李玉保 裴兰英 鲍恩东 王志亮 赵茹茜
【目的】研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平,探讨其相关性。【方法】利用组织学、原位杂交和本实验室建立的猪HSPs mRNA一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台等方法,研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平的变化。【结果】在长途运输应激初期(1～2h),淋巴结和脾脏出现急性病理性损伤变化,损伤程度较为严重;运输应激4h时,组织的病理性损伤与应激初期相似,但血管的充血程度有所减轻;淋巴结和脾脏中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激持续到10h时,HSP70 mRNA的转录...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李玉保 孙培明 王志亮 鲍恩东
利用组织学、免疫组织化学以及临床血液检测等方法,探讨持续运输应激对育肥出栏猪组织的病理性损伤以及组织损伤与HSP27组织定位之间的相关性。结果表明:运输应激初期(1～2h),反映组织损伤的血液肌酸激酶(CK)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性都显著升高;应激4h时,CK及AST活性有所下降;当应激持续到6h和10h时,CK活性又显著升高。组织病理损伤也呈现出相似的波动变化。免疫组织化学结果显示,随着应激时间的延长,HSP27在组织中的定位没有发生肉眼可见的变化;HSP27主要分布在心肌和肝细胞胞浆中,在背最长肌的细胞浆和细胞核中均呈强阳性表达,在肺脏细支气管的黏膜下层有强阳性表达,在受检组织...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
吕琼霞 张书霞 赵茹茜
【目的】探讨不同时间运输应激对猪免疫机能的影响及其相关细胞因子的调控作用。【方法】将不同运输时间的猪血清稀释后单独或与植物血凝素A(PHA)和脂多糖(LPS)混合后分别刺激正常猪外周血淋巴细胞,用噻唑蓝(MTT)比色分析法分别检测淋巴细胞增殖指数;另用ELISA方法检测试验猪血清中IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10及TNF-a含量的动态变化;分析淋巴细胞增殖指数的变化与各种细胞因子之间的相关性。【结果】经1h、2h、4h的运输应激后,1﹕32稀释的受试猪血清对T、B淋巴细胞转化能力均有影响,都是先升高,并以1h运输猪血清的刺激能力最强(P<0.05),随后开始下降,到4h时降...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吕琼霞 张书霞 赵茹茜
为研究运输应激对猪肠系膜淋巴结中IL-2、IL-6、IL-10及其受体mRNA转录的影响,并探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和核因子κB(NF-κB)对其转录的调控作用,用荧光定量RT-PCR方法对肠系膜淋巴结中3种细胞因子及其受体mRNA进行定量检测,用ELISA方法检测猪肠系膜淋巴结组织匀浆液中P38MAPK含量的动态变化,用激光扫描共聚焦显微镜观察运输前后NF-κB在肠系膜淋巴结细胞中的分布。结果显示:经1、2和4 h的运输应激,肠系膜淋巴结中3种细胞因子的转录均发生了显著变化,且均是4 h时达到最大值,并极显著高于对照组、1 h组和2 h组(P<0.01),而其相应受体的...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李玉保 鲍恩东 王志亮 赵茹茜
目的探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。方法根据HSP90、HSP70和GAPDHmRNA序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,梯度稀释作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90mRNA转录水平的改变。结果经1、2、4、6和10h的运输应激后,组织中HSP70mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激到10h时HSP70mRNA的转录水平升到最高,肝脏和心脏组织中HSP70mRNA的转录水...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
严建燕 鲍恩东 于纪棉 朱琳
为研究环境胁迫条件下热休克蛋白60 mRNA(hsp60mRNA)转录水平和应激性损伤的关系,将30日龄AA肉鸡的饲养环境温度从(22±1)℃突然升高到(37±1)℃分别热应激1、2、3、5和10 h后剖杀,利用临床血液病理学、组织病理学和荧光定量PCR方法,观察热应激不同时间对肉鸡重要器官心脏和肾脏组织损伤及其hsp60mRNA表达水平的影响。结果显示,持续热应激处理后的肉鸡血液肌酸激酶(CK)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)均显著升高,CK在2、3、5和10 h与对照组(无热应激)差异极显著(P<0....
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
胡威 郑路程 易金鑫 郑文亚 徐梦婷 刘犇
采用苏木精–伊红(HE)染色、醋酸铀–枸橼酸铅染色和免疫组织化学染色,对模拟运输应激小鼠免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)的结构和3种热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达情况进行分析。结果表明:试验组小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏结构均受到不同程度的损伤,胸腺髓质增大,皮质中血管充血,淋巴小结缩小,脾小结增大,中央动脉被破坏,细胞发生凋亡等;淋巴细胞核核膜呈锯齿状甚至碎裂,嗜酸性粒细胞胞核溶解消失,浆细胞破坏更为严重,线粒体肿胀,嵴断裂或消失等;HSP27在淋巴小结中的表达逐渐降低,在淋巴结髓质和脾脏中的表达有所增加,HSP70在淋巴结髓质中的表达逐渐降低,在淋巴小结和脾脏红髓中的表达升高,HSP90仅在淋巴结中有明显表达。综上可知,运输所引起的应激反应会对小鼠免疫器官的结构造成严重损伤,应激相关热休克蛋白HSP27、HSP70和HSP90的表达情况也会发生一定的变化,提示热休克蛋白与运输应激之间可能存在着某些调控关系。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
胡威 郑路程 易金鑫 郑文亚 徐梦婷 刘犇
采用苏木精–伊红(HE)染色、醋酸铀–枸橼酸铅染色和免疫组织化学染色,对模拟运输应激小鼠免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)的结构和3种热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达情况进行分析。结果表明:试验组小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏结构均受到不同程度的损伤,胸腺髓质增大,皮质中血管充血,淋巴小结缩小,脾小结增大,中央动脉被破坏,细胞发生凋亡等;淋巴细胞核核膜呈锯齿状甚至碎裂,嗜酸性粒细胞胞核溶解消失,浆细胞破坏更为严重,线粒体肿胀,嵴断裂或消失等;HSP27在淋巴小结中的表达逐渐降低,在淋巴结髓质和脾脏中的表达有所增加,HSP70在淋巴结髓质中的表达逐渐降低,在淋巴小结和脾脏红髓中的表达升高,HSP90仅在淋巴结中有明显表达。综上可知,运输所引起的应激反应会对小鼠免疫器官的结构造成严重损伤,应激相关热休克蛋白HSP27、HSP70和HSP90的表达情况也会发生一定的变化,提示热休克蛋白与运输应激之间可能存在着某些调控关系。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
曹中赞 王晓娜 李静 陈美月 许建文 栾新红
为探讨抗应激添加剂对肉牛因运输应激导致机体应激蛋白表达波动的影响,揭示抗应激添加剂的作用以及肉牛运输应激发生的分子机理奠定理论基础,本试验选择27头体重和体况相近的健康出栏育肥辽育白牛,随机分成3组(n=9),其中对照组饲喂常规基础饲粮,2个添加剂组饲粮中分别添加抗应激1号和2号,饲喂10d后,在20℃、相对湿度51%的环境条件下,以50～60km·h-1的速度在公路上运输5h,分别采集运输前及运输后的肉牛血液及运输后的肉牛肌肉组织,制备血清,提取组织RNA及蛋白,采用ELISA、qRT-PCR、Western Blotting等方法分别检测血清中HSP70含量和肌肉组织中应激蛋白HSP27、HSP70及HSP90的mRNA和蛋白水平的表达量。结果表明:运输后各组肉牛血清HSP70含量显著高于运输前(p<0.05);添加剂组同对照组相比,运输前后血清HSP70均明显下降(p<0.05或p<0.01)。抗应激1号组肌肉组织HSP27、HSP70和HSP90的mRNA相对表达量较对照组明显下降(p<0.05),抗应激2号组肌肉组织中HSP90mRNA的表达量较抗应激1号组显著升高(p<0.05)。两个抗应激添加剂组肌肉组织HSP70和HSP90的蛋白表达量较对照组明显减少(p<0.05)。运输使肉牛血清和肌肉组织中应激蛋白含量增加,而抗应激添加剂可影响运输后肉牛血清及肌肉组织中应激蛋白的水平,尤以抗应激1号作用更明显。
关键词：
应激蛋白 抗应激 运输 添加剂 肉牛
[期刊] 中国水产科学
[作者]
杜浩 危起伟 甘芳 刘鉴毅 杨德国 陈细华 张燕
以苯唑卡因为麻醉剂,研究了人工养殖1+龄美洲鲥(Alosa sapidissima)幼鱼在有无麻醉剂作用下长途运输2 h后血清皮质醇和生化指标的变化,探索美洲鲥运输后高死亡率的原因以及麻醉剂对运输应激的缓解作用。实验对运输前、运输2 h、加20 mg/L苯唑卡因麻醉运输2 h后的美洲鲥血清中的皮质醇激素以及血液生化指标进行了比较。结果表明,运输应激对美洲鲥皮质醇和血液生理生化指标产生了显著的影响。运输2 h后美洲鲥血清皮质醇激素含量非麻醉运输组[(41.97±17.92)ng/mL,n=9和麻醉运输组[(15.62±1.80)ng/mL,n=9比运输前[(2.05±1.48)ng/mL,n=1...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
雷蕾 鲍恩东
【目的】探讨急性热应激条件下肉鸡组织的病理性损伤及其Hsp90含量变化的相关性。【方法】将100只1日龄AA肉鸡随机分成5组,每组20羽。正常环境温度下对受试鸡进行30d的适应性饲养后,除对照组外,将其余80只受试鸡的环境温度迅速由(25±1)℃上升至(40±1)℃,并分别持续进行2、3、5和10h的热应激处理。利用组织病理、免疫组织化学和酶联免疫吸附试验,检测急性热应激状态下受试肉鸡心脏、肝脏及肾脏组织的病理性损伤和Hsp90的定位与表达。【结果】在热应激开始的2～5h,受试鸡心脏、肝脏和肾脏组织的实质细胞损伤表现出随热应激时间的持续而逐渐加重的趋势,病理变化特征以颗粒变性和水泡变性为主。热...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
付旭彬 孙培明 李玉保 王志亮 鲍恩东
将 30日龄AA肉鸡在 ( 4 0± 1)℃高温中分别持续 2、 3、 5和 10h ,定期剖杀 ,进行临床血液病理学、组织病理学和免疫组织化学检测。结果表明 :在热应激 2～ 5h内 ,受试鸡外周血液中肌酸激酶活性持续升高 (P
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
石一凡 李晓彤 锁云鹏 刘俊泽 李春梅 李延森
[目的]本试验旨在探讨维甲酸对热应激小鼠睾丸损伤的保护作用。[方法]试验选用40只7周龄雄性ICR小鼠，随机分为4组：对照组（CON），热应激组（HTRA_(0)），5 mg·kg~(-1)·d~(-1)维甲酸处理组（HTRA_(5)）和10 mg·kg~(-1)·d~(-1)维甲酸处理组（HTRA_(10)）。小鼠灌胃相应剂量维甲酸或玉米油后，42 ℃全身热应激2 h，处理7 d，试验结束后屠宰采样。[结果]与CON组相比，HTRA_(0)组小鼠睾丸的质量、最小直径以及生精小管的横截面积、直径和上皮厚度显著降低（P<0.05），附睾精子活力显著下降（P<0.05），丙二醛（MDA）水平显著升高（P<0.05），总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性显著降低（P<0.05），抗氧化相关基因（nrf2、ho-1、nqo1、sod1、gpx1）表达量显著增加（P<0.05），bax基因表达量显著升高（P<0.05），精子发生相关基因（plzf、c-kit）表达量显著增加（P<0.05）。与HTRA_(0)比，HTRA_(5)组小鼠生精小管的横截面积、直径和上皮厚度显著升高（P<0.05），MDA水平显著降低（P<0.05），T-SOD活性显著升高（P<0.05）；HTRA_(10)组小鼠生精小管的横截面积、直径和上皮厚度显著升高（P<0.05），精子的活力显著提高（P<0.05），MDA水平显著降低（P<0.05），T-SOD活性显著提高（P<0.05），nqo1、bax、bcl-2、zo-1、n-cadherin、plzf和c-kit基因表达量显著降低（P<0.05）。[结论]维甲酸能够改善热应激小鼠的睾丸质量、睾丸组织形态和附睾精子活力，使之更接近对照组水平；这种保护作用可能是通过增加小鼠睾丸抗氧化能力，减少生精细胞凋亡，增强血睾屏障，改善生精微环境实现的。
[期刊] 华北农学报
[作者]
郝月 辛海瑞 张闯 顾宪红
IGFN1基因可在骨骼肌中特异性表达,并呈现出免疫球蛋白Ⅰ和纤维连接蛋白Ⅲ组合的肌小节蛋白的结构域特征。其作用主要是参与蛋白翻译、肌细胞分化、骨骼肌收缩和细胞骨架稳定等。本研究主要对IGFN1基因的结构特点、在动物体内的基因表达调控、参与的信号转导途径,以及动物氧化应激反应与IGFN1表达之间的关系等方面的相关研究进展进行综述,以期为骨骼肌纤维类型转换相关机制的研究提供资料,也为氧化应激条件下修复肌肉损伤及改善猪肉品质的深入研究提供新思路。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
何玉琴 杨小燕 林标声 邱龙新
为研究红车轴草提取物(RCE)对脂多糖(LPS)应激的断奶仔猪生长性能和炎性介质的影响,本试验选用30头健康、平均体重为(6.86±0.14)kg的(21±1)日龄(杜×长×大)断奶仔猪,按照随机区组设计设5个处理,每个处理6个重复,每个重复1头仔猪.5个处理组仔猪分别饲喂基础日粮(非应激空白对照组)、基础日粮+LPS(LPS组)、基础日粮+LPS+0.05%RCE(0.05%RCE组)、基础日粮+LPS+0.10%RCE(0.10%RCE组)、基础日粮+LPS+0.20%RCE(0.20%RCE组).试验期21 d.在试验第7、14天,LPS组和0.05%、0.10%、0.20%RCE组仔猪...
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