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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
丁逍 刘琳 陈迪 马海田
为了建立体外模拟氧自由基诱导的细胞氧化损伤模型,本试验采用Percoll密度梯度离心法纯化原代大鼠Leydig细胞,并鉴定特异性蛋白3β-HSD;采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位、ROS以及O·-2含量,比色法测定·OH、MDA的含量以及抗氧化物酶SOD、CAT和POD的活性。结果显示:特异性蛋白3β-HSD鉴定后,荧光显微镜观察到大部分细胞呈现特异性荧光。MTT测定结果显示,300~1 000μmol·L-1H2O2处理细胞均可极显著降低细胞活力(P<0.01);300μmol·L-1H2O2处理可显著提高Leydig的凋亡率以及增加ROS含量(P<0.05)...
关键词：
H2O2 睾丸间质细胞 氧化损伤
[期刊] 中国农业科学
[作者]
齐放军 高世强 吴茂森 何晨阳
目的本文研究了信号分子一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)对水稻细胞过敏反应(HR)的诱导作用。方法用溴酚兰染色法定量检测这两种信号分子单独或协同诱导作用下水稻细胞的HR。结果该两种信号分子可以独立或协同诱导水稻细胞HR的产生,H2O2对NO诱导的HR具有调节作用,但NO与H2O2浓度平衡与否对HR诱导并无影响。结论H2O2和NO均是诱导水稻细胞HR的信号分子,诱导过程中并不存在“NO/H2O2浓度平衡作用机制”。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李烈川 申明 宁彩波 管志强 蒋毅 吴望军 刘红林
［目的］本试验旨在研究抑制氧化应激诱导的自噬对猪卵巢颗粒细胞凋亡的作用。［方法］采用流式细胞术和细胞计数试剂盒（ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ－８，ｃｃｋ８）检测不同浓度（０、５０、１００和１５０μｍｏｌ·ｌ～（－１））过氧化氢处理１２ ｈ对猪颗粒细胞的凋亡诱导作用和细胞活力的影响；Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测微管相关蛋白１轻链３（ｌｃ３，包括ｌｃ３－Ⅰ和ｌｃ３－Ⅱ）和自噬相关蛋白Ｐ６２／ｓＱｓｔｍ１的表达量变化，转染ｇＦＰ－ｌｃ３质粒检测自噬体的数量；利用３－甲基腺嘌呤（３－ｍＡ）提前４ ｈ抑制自噬后再氧化应激１２ ｈ，用流式细胞术检测细胞的凋亡率，ｃｃｋ８检测细胞活力。［结果］氧化应激．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李惠民 胡洁 贺军民
【目的】研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)催化产物磷脂酰肌醇3-磷酸(PI3P)对紫外线B(UV-B)诱导保卫细胞中过氧化氢(H2O2)产生和气孔关闭的影响,为进一步阐明植物细胞转导UV-B辐射信号的机制提供依据。【方法】以蚕豆(Vicia faba L.)表皮条为材料,采用PI3K的抑制剂沃曼青霉素(WM)和LY294002(LY)来抑制PI3P的形成,采用二苯基碘(DPI)和水杨基氧肟酸(SHAM)分别抑制H2O2形成的NADPH氧化酶途径和细胞壁过氧化物酶途径,通过气孔开度分析和激光扫描共聚焦显微镜技术,确定PI3P在0.8 W·m-2UV-B辐射诱导蚕豆保卫细胞H2O2产生和气孔关闭中...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张雯 沈应柏 沈瑗瑗
以复叶槭为实验材料,采用DAB组织染色和分光光度法,定性定量地检测了人为机械损伤和外源茉莉酸甲酯处理0、15、30、60、120、240 min后损伤叶片,系统叶片以及诱导叶片内H2O2含量的变化情况。结果显示,机械损伤可诱导H2O2系统性产生,无论是受伤叶片、系统叶片还是诱导叶片,在伤害处理60 min内,H2O2含量一直增加,240 min后含量达最大值后开始下降。用1μmol.L-1茉莉酸甲酯熏蒸健康植株后,叶片H2O2含量显著增加。证明茉莉酸甲酯作为植株体内伤信号的报警信号分子,能代替机械损伤等外界刺激启动相似的信号防御系统,起到防御外界伤害的作用。
关键词：
复叶槭 机械损伤 茉莉酸甲酯 诱导抗性
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
陈颖 杨华 乐利 林芳芝 罗永亚 王俊霖 曹福亮
以银杏悬浮细胞为研究材料,通过向液体培养基中添加0~20.0 m M的H2O2,探讨H2O2处理下银杏细胞黄酮代谢、抗氧化酶及活性氧之间的相互关系。主要结果有:1外源H2O2处理限制了悬浮细胞的生长,但提高了苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性(20 m M第6 d除外)和总黄酮的合成,最高达18.8 mg/g DW(10.0 m M处理)。2低浓度(0.5~1.0 m M或0.5~5.0 m M)的H2O2能够激活SOD和CAT酶,而高于5 m M以上抑制两酶活性,POD活性在10~20 m M较高。0.5~1.0 m M外源H2O2对细胞内源H2O2和MDA(第6 d的20m M除外)的积累影响不...
关键词：
银杏 悬浮细胞 过氧化氢 黄酮 抗氧化酶
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李欣 李鑫玲 庞新跃 朱文学 樊金玲 罗磊 杜琳 王娜 王利平
【目的】分析细菌内源过氧化氢在细胞分裂周期中的时空变化,探讨细菌增殖中过氧化氢的生理功能。【方法】采用组织化学法通过透射电子显微镜技术观察水稻白叶枯病菌内源过氧化氢的积累位置。【结果】不同菌株内源过氧化氢水平不同,在细菌的整个细胞分裂周期中观察到过氧化氢在细胞壁上的积累水平维持稳定,在多个菌株的细胞分裂过程中,除细胞壁之外,还在2个新的位点(类间体结构和核区)出现过氧化氢的大量积累,表现出数量和空间定位的显著变化。【结论】在多个水稻白叶枯病菌菌株中发现胞内额外的大量过氧化氢积累和定位与细胞分裂的进程密切相关,这种过氧化氢的时空变化很可能是细菌分裂时的普遍现象。推测过氧化氢应在细菌增殖中具有重要...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨芳 张宗申 杨斌
以稳定的丹参悬浮细胞为实验材料,研究过氧化氢和过氧化氢与酵母提取物组合对丹参悬浮细胞生长及次生代谢物积累的影响。结果表明,过氧化氢和过氧化氢与酵母提取物的组合均对细胞生长有不同程度的抑制作用;过氧化氢对丹参酚酸和丹参酮的生成均有促进作用,其中10μmol/L过氧化氢处理的细胞中丹参酚酸含量达到最大值94.85 mg/g干重,为对照组的2.43倍;过氧化氢与酵母提取物的组合对丹参次生代谢物的积累作用效果不明显。上述结果表明,过氧化氢是丹参悬浮细胞次生代谢物积累的有效诱导子。
关键词：
丹参 悬浮细胞 次生代谢物 过氧化氢
[期刊] 中国农业科学
[作者]
董书伟 高昭辉 申小云 薛慧文 荔霞
【目的】分离和鉴定纳米铜对大鼠肝脏毒性相关蛋白过氧化氢酶(catalase,CAT),探讨CAT在毒性发挥中的作用,为揭示纳米铜对肝脏毒性机制提供依据。【方法】应用2-DE技术和PDQuest 8.0软件在大鼠肝脏蛋白组中筛选纳米铜对肝脏毒性差异蛋白,经质谱鉴定后进行生物信息学分析。【结果】筛选到下调的差异蛋白点6602和7702与肝毒性相关,鉴定均为CAT蛋白;其性质稳定,有一定亲水性,无信号肽,定位于细胞质,可能属于非分泌性蛋白,含有过氧化氢酶活性位点64FDRERIPERVVHAKGAG80和过氧化氢酶亚铁血红素配合基位点354RLFAYPDTH362等功能位点;无规则卷曲、α螺旋和延伸...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
栗杰 焦颖 依艳丽 张大庚 程希雷 刘孝义
探讨磁场处理棕壤后,土壤中过氧化氢酶和过氧化物酶活性的动态变化。以棕壤为供试土壤,研究不同磁场强度(0、100,300,500mT)磁处理土壤后,对土壤过氧化氢酶和过氧化物酶活性的影响。棕壤风干土经磁场处理后,100和300mT磁场强度促进了过氧化氢酶和过氧化物酶活性,磁致效应为正效应。磁处理后的28d内,500mT磁场处理抑制了棕壤过氧化氢酶的活性,仅在培养的第14天,500mT处理过氧化物酶活性高于对照,比对照增加34.50%;棕壤湿土经磁处理后第1天,100mT对过氧化氢酶活性表现出正效应,300mT和500mT处理对湿土的过氧化氢酶无明显影响,磁处理后的7～28d,磁处理后过氧化氢酶活...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
彭道林 谢达平 任文辉 汤剑峰
为了探索酶活性测定的新方法 ,降低酶活性常规测试中干扰因素的影响 ,提高酶活性测定的准确性 ,利用低电势电位差计及热电偶换能器检测过氧化氢酶活性 .结果表明 ,测定时的 H2 O2 质量分数以 9.6 %为好 ,可以用于酶活性从 0 .5 u至 3.5 u酶活力的检测 ;当 H2 O2 质量分数在 2 .4 %～ 7.2 %时 ,酶反应速率与底物浓度有线性关系 ;当底物质量分数超过 9.6 %时 ,酶反应速率显现底物抑制的动力学特征
关键词：
热电偶 过氧化氢酶 反应抑制
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吕凤霞 彭麟 曹礼华 罗家莹 张崇 季辉 江善祥 张军忍
以无水硫酸钠、30%过氧化氢(H2O2)溶液和氯化钠为原料制备固体H2O2;采用单因素试验设计法考察了原料配比、反应温度、反应时间及干燥温度对产品产量及产品中H2O2含量的影响,并据此确定最佳制备条件;采用微生物悬液定量杀菌试验考察了所制备固体H2O2的抗菌活性。结果显示:在25 mL 30%H2O2溶液中,加入32 g硫酸钠、4 g氯化钠,反应时间30 min,反应温度40℃,干燥温度60℃时得到的产物H2O2含量最高,产品质量最好。10.8 g.L-1的H2O2消毒液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作用10 min的平均杀菌率达到99.9%,对蜡样芽孢杆菌作用1 h的平均杀菌率达到100%。结论...
关键词：
固体H2O2 制备工艺 杀菌
[期刊] 水产学报
[作者]
乔晓静 张卫卫 邵铱娜 赵雪琳 李成华
过氧化氢酶(catalase， CAT)是抗氧化酶体系的主要成员，在维持机体氧化还原平衡、抵御病原感染过程中具有重要作用。为研究CAT基因在软体动物应答病原胁迫过程中的作用，本研究采用RACE技术通过克隆和序列拼接获得了缢蛏CAT基因的全长cDNA序列，并命名为ScCAT。ScCAT基因全长为2840 bp，编码508个氨基酸。序列分析表明ScCAT蛋白含有1个CAT核心结构域(25-410)，1个保守的酶活性位点(_(61)FNRERIPERVVHAKGAGA_(78))和1个亚铁血红素结合位点(_(351)RLFSYPDTH_(359))。多序列比对和系统进化树分析结果表明ScCAT属于CAT基因家族，且与无脊椎动物文蛤的亲缘关系最近。组织分布表明ScCAT在所有检测的组织中均能表达，其中在肝胰腺中表达量最高，鳃中次之，血细胞中的表达量最低，分别为闭壳肌的85.67倍(P < 0.01)、50.09倍(P < 0.01)和0.76倍。副溶血弧菌胁迫下，ScCAT在缢蛏肝胰腺中的表达明显上升，且在12 h达到最高值，为对照组的3.56倍(P < 0.01)；酶活测定表明副溶血弧菌胁迫显著诱导缢蛏肝胰腺和鳃组织中的CAT活性，为进一步探讨ScCAT的蛋白功能，构建ScCAT原核表达质粒，通过诱导、纯化后发现ScCAT重组蛋白具有显著的CAT酶活性。本研究结果表明ScCAT作为一类重要的抗氧化酶参与了缢蛏体内的免疫应答。
关键词：
缢蛏 过氧化氢酶 基因克隆 表达分析
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李欣 于慧春 庞新跃 李红玉 王金生
采用辣根过氧化物酶-酚红法定量检测病原菌细胞内源过氧化氢的产生,并通过组织化学法观察细胞中过氧化氢积累的亚细胞定位。结果表明:辣根过氧化物酶-酚红法及组织化学染色法均检测到水稻白叶枯病菌内源过氧化氢的产生。透射电子显微镜观察结果和辣根过氧化物酶-酚红法定量检测结果均显示,过氧化氢在水稻白叶枯病菌细胞中普遍存在,不同病原菌内源过氧化氢的水平有极显著差异。病原菌细胞中过氧化氢的积累主要定位在细胞壁。
关键词：
白叶枯病菌 过氧化氢 组织化学 定位
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