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[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
钟雅婷 邹东霞 廖旺姣 赵鹏飞 黄宁 罗辑
【目的】轮斑病是桉树的常见叶部真菌病害。本研究探讨健康和轮斑病害桉树叶内生真菌群落的结构差异，并筛选对轮班病菌具有拮抗作用的菌株。【方法】采用Illumina Miseq技术对健康和轮斑病害桉树叶内生真菌ITS rDNA进行测序，分析两组样品内生真菌的多样性和丰度。采用平板对峙法检测本实验室保存菌株对轮斑病菌生长的影响，并用PCR法验证抗病菌株是否存在于健康和病害叶片中。【结果】生物信息学分析结果表明健康桉树叶的内生真菌共注释到2门、15纲、55目、139科、238属、300种；轮斑病害桉树叶共注释到2门、12纲、55目、88科、130属、183种。轮斑病害桉树叶内生真菌群落多样性和优势菌种的集中程度均较健康叶片无显著改变，处于相对稳定的状态。而轮斑病害桉树叶内生真菌群落丰度较健康叶显著降低，两组叶片中真菌群落结构和组成存在较大差异。病害和健康桉树叶内均存在轮斑病菌Coniella eucalyptorum、花斑病菌Aureobasidium pullulans和枝枯病菌Lasiodiplodia theobromae，其中轮斑病菌为病害叶内的优势真菌。平板对峙试验结果发现，本实验室保存的菌种中，仅有贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis对轮班病菌具有较强的拮抗作用。用PCR分别扩增轮斑病害和健康桉树叶基因组DNA中的GyrA基因片段，PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果表明B.velezensis仅存在于健康桉树叶内，而在轮斑病害桉树叶中未能检测到。【结论】桉树叶部内生真菌的群落结构可能受轮斑病菌侵染的影响，导致染病叶内生真菌群落的丰度下降；而贝莱斯芽孢杆菌对桉树轮斑病菌的生长具有一定的拮抗作用，有望成为一种新的针对桉树轮斑病的生物防治方法。本研究为明确桉树轮斑病的成因和开发轮斑病生防制剂提供了一定的理论和实验依据。
关键词：
桉树 轮斑病 内生真菌 贝莱斯芽孢杆菌
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
钟雅婷 邹东霞 廖旺姣 赵鹏飞 黄宁 罗辑
【目的】轮斑病是桉树的常见叶部真菌病害。本研究探讨健康和轮斑病害桉树叶内生真菌群落的结构差异，并筛选对轮班病菌具有拮抗作用的菌株。【方法】采用Illumina Miseq技术对健康和轮斑病害桉树叶内生真菌ITS rDNA进行测序，分析两组样品内生真菌的多样性和丰度。采用平板对峙法检测本实验室保存菌株对轮斑病菌生长的影响，并用PCR法验证抗病菌株是否存在于健康和病害叶片中。【结果】生物信息学分析结果表明健康桉树叶的内生真菌共注释到2门、15纲、55目、139科、238属、300种；轮斑病害桉树叶共注释到2门、12纲、55目、88科、130属、183种。轮斑病害桉树叶内生真菌群落多样性和优势菌种的集中程度均较健康叶片无显著改变，处于相对稳定的状态。而轮斑病害桉树叶内生真菌群落丰度较健康叶显著降低，两组叶片中真菌群落结构和组成存在较大差异。病害和健康桉树叶内均存在轮斑病菌Coniella eucalyptorum、花斑病菌Aureobasidium pullulans和枝枯病菌Lasiodiplodia theobromae，其中轮斑病菌为病害叶内的优势真菌。平板对峙试验结果发现，本实验室保存的菌种中，仅有贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis对轮班病菌具有较强的拮抗作用。用PCR分别扩增轮斑病害和健康桉树叶基因组DNA中的GyrA基因片段，PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果表明B.velezensis仅存在于健康桉树叶内，而在轮斑病害桉树叶中未能检测到。【结论】桉树叶部内生真菌的群落结构可能受轮斑病菌侵染的影响，导致染病叶内生真菌群落的丰度下降；而贝莱斯芽孢杆菌对桉树轮斑病菌的生长具有一定的拮抗作用，有望成为一种新的针对桉树轮斑病的生物防治方法。本研究为明确桉树轮斑病的成因和开发轮斑病生防制剂提供了一定的理论和实验依据。
关键词：
桉树 轮斑病 内生真菌 贝莱斯芽孢杆菌
[期刊] 林业科学研究
[作者]
钟雅婷 邹东霞 廖旺姣 黄宁 罗辑
[目的]植食性昆虫肠道微生物的多样性与其食物密切相关,本研究通过探讨油桐尺蛾(Buzura suppressaria)幼虫肠道菌群及其取食的桉树叶内生菌群的多样性,分析两者之间的关系。[方法]利用Illumina Miseq技术对油桐尺蛾5龄幼虫肠道和桉树叶部内生的细菌16s rDNA和真菌ITS rDNA进行测序,分析油桐尺蛾肠道和桉树叶部内生的细菌和真菌的多样性和丰度。[结果]油桐尺蛾肠道细菌共注释到6门、11纲、19目、38科、43属,真菌共注释到8门、29纲、67目、159科、257属;桉树叶部内生细菌共注释到10门、19纲、26目、54科、74属,真菌共注释到8门,31纲,79目,171科,291属。桉树叶内和油桐尺蛾肠道中均发现桉树主要病害病原菌所属菌属,分别为炭疽菌属(Colletotrichum)、假单胞菌属(Pseudomonas)、假尾孢属(Pseudocercospora)、短梗霉属(Aureobasidium)、壳针孢属(Septoria)、毛色二孢属(Lasiodiplodia)、新壳梭孢属(Neofusicoccum)。[结论]油桐尺蛾肠道的细菌、真菌的多样性和丰度与桉树叶之间存在差异,桉树叶对油桐尺蛾肠道微生物的群落结构有重要影响,而携带某些病原菌的油桐尺蛾啃食或其排泄物接触可能是导致该病原菌侵染健康桉树叶的原因。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
杨琴 邹凯 陈爱佳 郭雪 刘学端 梁伊丽
以湖南省壶瓶山国家级自然保护区生长的9株(3组)不同树龄银杏为研究对象,应用IlluminaHiSeq高通量测序技术,分析银杏叶片组织内生真菌的多样性及群落结构。结果表明:银杏叶片内生真菌群落的多样性、群落结构与组成均存在显著性差异,且随着树龄的增加,叶片内生真菌群落结构差异增大;子囊菌门(Ascomycota)为绝对优势菌门;曲霉属(Aspergillus)、假丝酵母属(Candida)、球腔菌属(Mycosphaerella)等真菌为银杏叶内生真菌群落优势菌属;通过对银杏叶黄酮含量进行检测,发现不同树龄银杏叶的黄酮含量存在显著差异,且随着树龄的增加,3种黄酮醇苷(槲皮素、山奈酚和异鼠李素)含量均呈递减趋势;进一步分析表明,黄酮类化合物作为重要环境因子,可能通过影响优势菌门子囊菌中优势菌属的定殖与生长对内生真菌群落的形成与变化产生显著影响。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吴璐瑶 张卓 孔晓 金德才 高丹蕾 袁涛
[目的]研究白粉病对大叶黄杨(Fuonymus japonicus)叶片内生细菌群落结构特征、互作关系及群落关键种的影响,为大叶黄杨白粉病的生物防治提供参考。[方法]以北京市大叶黄杨绿化带的健康叶片(HL)及感染白粉病叶片(DL)为材料,测定其硝酸盐、可溶性糖、可溶性蛋白及叶绿素含量。采用Illumina MiSeq测序技术测定叶片内生细菌群落特征,用ADONIS、MRPP和PERMANOVA方法分析细菌群落不相似性,采用典范对应分析(CCA)和Mantel分析研究细菌群落结构与叶片理化指标的相关性,通过细菌群落的分子生态网络分析(MENA)确定群落互作关系及关键种。[结果]大叶黄杨DL的叶绿素含量显著低于HL,而可溶性蛋白质含量显著高于HL。大叶黄杨HL和DL叶内生细菌群落的多样性及群落结构无显著差异。HL优势菌门为变形菌门、放线菌门、厚壁菌门、蓝细菌门、拟杆菌门,DL优势菌门为变形菌门、放线菌门、厚壁菌门、蓝细菌门。HL优势属相对丰度从高到低依次为罗尔斯通氏菌属、无色杆菌属、贪铜菌属、类芽孢杆菌属、盐孢菌属、芽孢杆菌属、伯克霍尔德菌属、土单胞菌属、节杆菌属;DL优势属为罗尔斯通氏菌属、盐孢菌属、伯克霍尔德菌属、芽孢杆菌属、罗河杆菌属。大叶黄杨叶片的叶绿素含量显著影响细菌群落结构,主要影响HL的变形菌门和放线菌门相对丰度。MENA结果显示,DL内生细菌群落的互作关系比HL更复杂,竞争关系更强。HL内生细菌群落中未发现关键种,而DL中发现了5个细菌群落关键种,分别为放线菌门的诺卡氏菌科红球菌属、类诺卡氏菌科和鱼孢菌科及变形菌门的生丝微菌科丝微菌属和华杆菌科。[结论]白粉病感染对大叶黄杨叶片内生细菌群落结构及多样性无显著影响,但改变了细菌群落的互作关系,说明大叶黄杨叶片内生细菌对白粉病的感染具有响应效应。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
林于蓝 张园可心 王宝英 黄杜鹃 林广宁 魏富刚 张金波 蔡祖聪 赵军
[目的]本文旨在探究健康与罹患根腐病三七内生真菌群落特征差异及在不同植株部位的分布特征与随生长年限的变化规律。[方法]选取一年、二年生健康与罹患根腐病的三七植株，采用组织分离法对其根、茎部位的内生真菌进行分离，基于形态特征和ITS序列分析对分离得到的菌株进行分类鉴定，并对内生真菌群落组成及多样性特征进行分析。[结果]共分离获得966株内生真菌，经鉴定隶属于3门5纲14目25科31属。从菌株分离数量及分离率看：罹病植株＞健康植株，二年七＞一年七，根部＞茎部。健康和罹病三七的可培养内生真菌组成存在明显差异，其中曲霉属、耙齿菌属、毛壳属和青霉属在健康三七内生真菌群落中占主导，而镰刀菌属、曲霉属、篮状菌属、毛壳属和木霉属是罹病三七内生真菌的优势属。植株部位对三七内生真菌群落组成具有明显影响，其中罹病三七根部镰刀菌属的分离频率高达52%，显著高于其茎部的11.2%，且木霉属和篮状菌属等有益真菌在罹病三七根部大量分离，其分离频率分别为11.0%和14.5%，而三七茎部内生真菌群落多样性、丰富度和均匀度均高于根部。此外，随着生长年限的增加，三七内生真菌群落的发育更加完善，健康和罹病三七内生真菌群落组成及多样性特征也随之变化，其中尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌在罹病三七植株中的分离频率大幅增加，达到14.5%和32.9%。健康三七内生真菌多样性、丰富度和均匀度随生长年限增加逐渐上升，而罹病三七内生真菌多样性和均匀度逐渐降低。[结论]三七植株内生真菌多样性丰富，健康和罹病三七可培养内生真菌定殖数量及群落组成具有显著差异，且植株部位与生长年限均对三七可培养内生真菌群落特征具有重要影响。本研究结果为深入了解三七内生真菌的分布特征及其变化规律提供了数据支撑。
关键词：
三七 内生真菌 根腐病 多样性 生长年限
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王谢 李星月 尹诗琳 唐甜 张建华
【目的】桑轮纹病是影响亚洲蚕桑生产的主要真菌病害之一。研究桑轮纹病病斑内部及周边不同区域的真菌群落结构可有助于揭示桑轮纹病的致病机理,为桑轮纹病的防治提供理论基础和数据基础。【方法】本研究利用高通量测序技术,对桑轮纹病发病叶片的病斑核心区(H区)、病斑边缘区(L区)和病斑周围的未发病区(N区)内部真菌群落结构进行了研究。【结果】H、L和N区3个区域内真菌群落结构的组成存在明显差异。在种水平上H、L和N区的真菌Gonatophragmium triuniae相对丰度排名皆是最高,分别为96.25%、96.95%和31.29%。此外,真菌Myrothecium roridum在H区的相对丰度为1.04%,是L区相对丰度的2.17倍。【结论】桑轮纹病的病斑形成过程复杂,病斑的出现、扩大和穿孔涉及多种真菌的共同作用。
关键词：
桑树 轮纹病 真菌 多样性 高通量测序
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
陈慧洁 郭朦朦 冯丽贞 林燕萍 许诺 邹霖湘
对桉树(Eucalyptus spp.)叶片蛋白质的提取方法、溶解方法、溶解条件和上样量进行了优化.结果表明,TCA/丙酮沉淀/苯酚抽提法是桉树叶片蛋白质样品制备的最优方法;裂解缓冲液Ⅰ(7 mol·L-1尿素+2 mol·L-1硫脲+0.04 g·m L-1CHAPS+60 mmol·L-1DTT+0.5%(体积分数)IPG Buffer)可保证蛋白质样品的溶解,较适用于桉树叶片蛋白裂解;对于18 cm、p H 4-7的线性胶条,当每根胶条上样量为50μg时,采用银染可得到质量较高的2-DE图谱.
关键词：
桉树 叶片 双向电泳 优化
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
赖建东 魏日凤 连玲丽 刘伟 叶乃兴 杨江帆 陈丹 杨国一
本试验筛选出一株强致病力茶树刺盘孢菌株ＺＲＧ，并测定其侵染后对茶树叶片相对电导率，丙二醛（ＭＤＡ）含量，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）等抗氧化酶活性及其基因表达量的影响，探究茶树刺盘孢对茶树叶片生理特性的影响．结果表明：ＺＲＧ侵染４８ ｈ内，茶树叶片相对电导率明显增高；ＭＤＡ先是快速积累，含量上升，随后下降；ＰＯＤ、ＳＯＤ和ＣＡＴ活性都出现不同程度的上升，随后下降．ｑＲＴ－ＰＣＲ验证结果显示，ＰＯＤ、ＳＯＤ和ＣＡＴ相关基因的表达先上调后下降，三者相互协调配合，起到清除过剩自由基的作用．
[期刊] 林业科学
[作者]
卢万鸿 杨桂丽 林彦 王楚彪 罗建中
【目的】探索近红外光谱(NIRS)分析技术在赤桉和细叶桉群体叶片水分状态相关生理指标快速检测中应用的可行性。【方法】选取赤桉7个种源21个家系和细叶桉5个种源26个家系的幼苗,每家系选20株苗木植于等规格塑料盆中,对其按平均日蒸发量的100%,70%,50%,30%和0%5个等级进行控水。控水处理60天后,每家系每控水处理选择3株幼苗,测量其顶端第2对完全展开叶片的相对含水量(RWC)和水势(Ψw),用手持式近红外仪采集对应叶片的近红外光谱信息,持续测量18天。【结果】利用近红外光谱技术检测赤桉和细叶桉叶
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
陆爱华 褚孟嫄
本文研究了在果园状况下,梅、杏、桃的水分状况及组织解剖结构.结果表明,梅树叶片伏秋旱卷曲脱落的主要原因是输导系统与耗水结构不协调;气孔调节能力、持水能力及耐旱力差.以致叶片产生严重的水分亏缺,膨压丧失,游离脱落酸大量产生,导致叶片卷曲甚至脱落.
关键词：
梅 叶片卷曲脱落 耐旱力
[期刊] 林业科学研究
[作者]
徐小雪 淮稳霞 程元 周忠福 张学超 刘忠军 赵文霞
[目的]从病原菌和寄主两个维度,探究新疆野果林中疫霉菌对野果林内主要树种叶片的致病性,了解新疆野果林衰退的可能原因及疫霉对新疆野果林造成的潜在风险。[方法]利用菌丝块接种离体叶片的方法,将诱捕自新疆野果林的5种疫霉(Phytophthora plurivora、P.gonapodyides、P.lacustris、P.gregate、P. sp.)接种到苹果、杏、山楂和核桃的健康离体叶片上,一周后观察测量、计算病斑大小,并用R软件对数据进行双因素方差分析和作图。[结果]实验结果及数据分析表明:供试5种疫霉菌株接种到4种植物叶片上后,病斑大小存在显著性差异。其中,P.plurivora和P.lacustris产生的病斑较大,最大分别为18.68 cm~2和14.14 cm~2;寄主植物中,核桃和杏树叶片产生病斑较大,最大分别为18.68 cm~2和9.55 cm~2。[结论]供试树种和菌种对叶片病斑大小都有显著影响;供试5种疫霉对苹果、杏、山楂、核桃叶片的致病性依次为:P.plurivora>P.lacustris>P.gregate≈P.gonapodyides>P. sp.;苹果、杏、山楂和核桃这4种植物叶片对以上5种疫霉菌的感病性依次为:核桃>杏>山楂>苹果。
关键词：
致病性 疫霉 叶片病斑 野果林
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘学群 王春台 杜爱玲 林滢
以碱提取、酸沉淀的方法从樟树叶片中分离得到一种棕黑色粉末，该提取物主要为有色化合物Ａ和Ｂ的混合物，化合物Ａ的含量成倍高于化合物Ｂ；经ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、Ａｌ＿２Ｏ＿３及ｓｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱层析分离纯化等步骤，得到纯化的红棕色化合物Ａ，经ＰＡＧＥ、ＰＬＣ及ＴＬＣ检测均为单一谱带或单一斑点；该化合物熔点为２８０．２９℃，λ＿（ｍａｘ）￣（ＫＯＨ）为２１３ｎｍ，Ｅ１ｃｍ１％为３４２．５，肩峰为２５７ｎｍ，ｐＩ为３．７，对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、枯草杆菌及毛霉有较强的抑菌活性。
关键词：
樟树叶片,抑菌物,抗菌活性,分离,纯化
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
张晓林 张俊娥 贺璞慧中 王笑连 田呈明
【目的】明确胶孢炭疽菌在杨树叶片上的侵染过程,为进一步从分子水平研究该菌的致病机制和杨树抗病分子育种奠定基础。【方法】用绿色荧光蛋白标记的胶孢炭疽菌菌株BH12-2的分生孢子悬浮液接种健康杨树叶片,采用光学显微镜和电子显微镜观察病原菌的侵染过程和杨树叶片的防卫反应。【结果】接种4 h后,孢子开始萌发产生芽管;8 h时芽管顶端形成附着胞;12 h时成熟的附着胞中央形成侵染钉;24 h时,孢子另一端萌发形成芽管和附着胞;48 h后芽管不断分枝异化成菌丝并产生次级分生孢子;接种3 d时,附着胞基部的侵染钉穿透寄
[期刊] 西南农业学报
[作者]
宁平 黄艳花 黄微 邢政杰 陈婵 王小欣
【目的】明确喜树叶斑病病原菌，并探究不同杀菌剂对病原菌的室内抑菌活性，为防治大田喜树叶斑病提供科学依据。【方法】通过常规组织块分离法分离喜树叶斑病病原菌并进行致病性测定，结合形态特征观察及rDNA-ITS序列分析鉴定病原菌的分类地位；采用菌丝生长速率法测定12种常见杀菌剂对病原菌的室内毒力。【结果】从广西农业职业技术大学中草药园的喜树叶斑病上分离到一株真菌，菌株命名为XS-1，经致病性测定、形态学观察和分子鉴定，确定多主棒孢霉（Corynespora cassiicola）是引起喜树叶斑病的病原菌，为国内首次报道，将该病害命名为喜树棒孢霉叶斑病。杀菌剂室内毒力测定结果表明，12种杀菌剂对菌株XS-1菌丝生长均有较强的抑制作用，其中，20%苯甲咪鲜胺微乳剂的抑制作用最强，其EC_(50)为0.0980 mg/L，其次是20%戊菌唑水乳剂、50%多菌灵可湿性粉剂、20%抑霉唑水乳剂、250 g/L丙环唑乳油和10%苯醚甲环唑水分散粒剂，其EC_(50)分别为0.3737、0.4557、0.4878、0.5746和0.5956 mg/L。【结论】经致病性测定、形态特征观察及分子鉴定，确定引起喜树叶斑病病原菌为多主棒孢霉（C. cassiicola）；20%苯甲·咪鲜胺微乳剂、20%戊菌唑水乳剂、50%多菌灵可湿性粉剂、20%抑霉唑水乳剂、250 g/L丙环唑乳油和10%苯醚甲环唑水分散粒剂对喜树棒孢霉菌丝生长均具有较强的抑制作用，可作为喜树棒孢霉叶斑病田间防治参考用药。
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